RECHERCHES EXPÉRIMENTALES

Ainsi que je l'ai dit dans l'Introduction et dans l'Aperçu historique cette seconde partie de mes études consiste en des recherches 'expérimentales sur la question de l'origine des canaux biliaires. Depuis que l'on sait positivement que ces canaux se rencontrent dans des affections aussi différentes que la cirrhose, la syphilis, l'atrophie par compression, l'atrophie aiguë du foie, la stase biliaire chronique, l'enkystement de corps étrangers, en un mot là où du parenchyme hépatique disparait et où du tissu conjonctif se développe, le choix des moyens propres à provoquer une néoformation de canaux biliaires s'est de plus en plus étendu.

Ces moyens ne pouvant pas tous être appliques aux animaux dont je pouvais disposer (lapins et chiens), je me suis borné aux expériences suivantes.

A l'exemple d'ACKERMANN, j'ai fait usage de la méthode indiquée par WEGNER pour provoquer la cirrhose, à savoir l'administration prolongée d'une faible dose d'arsenic et de phosphore.

En second lieu, à l'exemple de NASSE qui, dans la Semaine médicale du 28 avril 1894 (i4ème année), a fait mention de la ligature d'une petite branche du canal hépatique, j'ai pratiqué cette opération chez le lapin, afin de provoquer une stase biliaire partielle de plus longue durée que ce ne peut nécessairement < être le cas lorsque l'on fait la ligature du canal hépatique ou du canal cholédoque tout entier (CHARCOT et GOMBAULT) ').

En troisième lieu j'ai, comme NEISSER l'a fait le premier avec de l'huile de croton, injecté dans le parenchyme du foie quelques gouttes d'une solution d'acide phénique, afin de provoquer la formation d'un foyer inflammatoire circonscrit, dans le foie.

En outre, j'ai voulu provoquer une périhépatite en interposant un corps étranger (une feuille d'étain) entre le diaphragme et le foie, dans l'espoir que la périhépatite, en s'étendant aux couches superficielles du foie, y produirait une hyperplasie du tissu conjonctif avec formation consécutive de canaux biliaires.

1) J'ai pratiqué aussi la ligature totale du canal cholédoque, comme expérience de contrôle et de comparaison , chez deux animaux.

Enfin, à l'exemple de Boix, qui dans sa thèse (août 1894) a donné une nouvelle manière de voir sur l'étiologie de la cirrhose du foie, j'ai tenté, chez des animaux, de provoquer la cirrhose en leur administrant des acides, notamment de l'acide butyrique, de l'acide valérianique et de l'acide acétique. Nous verrons plus loin jusqu'à quel point ces expériences ont fourni quelque résultat.

Je désire seulement décrire en quelques mots ma technique opératoire.

Toutes les opérations ont été pratiquées dans une légère narcose chloroformique. J'ai constaté que si l'on n'administre le chloroforme qu'à faible dose mais pendant longtemps, l'animal est vite endormi. On le maintient très facilement en état de narcose, en ajoutant de temps à autre une goutte de chloroforme; en administrant le narcotique de cette façon et en cessant de le faire aussitôt que l'opération est achevée, l'animal reste tranquille pendant que l'on suture la plaie et il ne souffre que très peu.

En ce qui concerne l'opération même, j'ai toujours observé une antisepsie très rigoureuse, tandis que généralement je faisais l'incision abdominale assez grande (environ 7 cm.), ce qui facilite l'opération et en diminue la durée.

La plaie est fermée en suturant séparément d'abord la séreuse et la couche musculaire et ensuite la peau.

Comme pansement occlusif il suffit d'employer une mèche de gaze iodoformée, maintenue avec du collodion.

La plupart de mes animaux traités de cette façon se portèrent bien, excepté ceux qui, en raison de la nature même de l'opération, comme par exemple la ligature du canal cholédoque, succombèrent rapidement.

Dans ces expériences mon but était, après avoir provoqué des altérations cirrhotiques , d'injecter les canaux biliaires à l'aide d'une solution de bleu de Berlin, comme l'a fait ACKERMANN. Pour autant donc que mes animaux ne succombaient pas spontanément à une maladie intercurrente et qu'ils ne mourraient pas à une heure trop avancée de la nuit, je les faisais tuer par un coup porté sur la nuque, je les ouvrais immédiatement après et tâchais d'injecter les canaux biliaires par le canal cholédoque.

J'ai pour cela fait usage de la méthode employée autrefois par M. le Prof. Mac Gillavry, au Laboratoire de Ludwig, pour ses recherches sur les capillaires biliaires et les vaisseaux lymphatiques dans le foie normal du lapin.

Cet auteur a obtenu de très beaux résultats en introduisant le liquide sous une pression de 30 à 40 cm. d'eau. J'ai cependant quelque peu modifié sa méthode et pratiqué les injections de la manière suivante.

A un entonnoir de verre est adapté un long tuyau de caoutchouc , ayant à son extrémité une fine canule ; le tuyau peut être fermé au dessus de la canule à l'aide d'une pince. On ne laisse d'abord

nasser que de l'eau pure; puis, on ferme subitement le robinet, passer que a 1^ contenu dans le tuyau en est chasse.

CeCeÏÏe précaution est nécessaire; car, au début comme j avais i£ Z ia «rendre, il m'arriva de ne pas faire réussir 1 injection, ^ qu'une bulle d/âir, logée dans la canule, empêchait la masse

à iniection de passer. ,

On laisse l'eau s'écouler lentement et au moment ou 1 entonnoir est vide, on verse dans ce dernier une solution de bleu de Berlin1). Lorsque le liquide bleu foncé commence a sortir de a canule on ferme le petit robinet. L'appareil est dispose de telle sorte que le niveau du liquide se trouve à 30 ou 40 cm. environ au dessus de la table d'opération2).

C'est alors seulement que l'animal est tue et immédiatement ouvert • on cherche très rapidement le canal cholédoque, on 1 incise et on le lie après y avoir introduit la canule. Si maintenant on ouvre le robinet, l'apparition de taches bleues à la surface du foie sur un grand nombre de points, prouve que l'injection passe régulièrement. On constate que ce sont surtout les parties perilobulaires des lobules qui deviennent bleues et qu'elles proéminent pour ainsi dire à la surface du foie. Après cinq minutes environ , on enlève la canule, on lie le canal cholédoque et l'on enlevé le foie in toto hors du cadavre, pour le placer dans l'alcool a 70 /„. Le lendemain on découpe le foie et on fixe les morceaux dans

de l'alcool à Q2°/0 3). .

Pour l'étude microscopique, il convient de faire des coupes de fragments non inclus et de fragments inclus dans la celloidine. Les coupes pratiquées dans ces derniers fragments nous fournissent de belles images des éléments en place, tandis que les préparations obtenues à l'aide des fragments non inclus nous permettent de mieux observer les éléments isolés, parce que les coupes sont souvent déchirées.

Les foies, que je n'ai pu injecter, à cause de la mort des animaux pendant la nuit, ont été durcis par l'alcool et les fragments de ces organes ont été, pour la plupart, inclus dans la celloidine.

Comme méthode de coloration, je me suis presque exclusivement servi de la double coloration à l'hématoxyline alunée et a l'éosine; en effet, le foie du lapin, coloré par simple coloration,

1) Solution de Ranvier.

2) Parfois cette pression n'était pas suffisante et j'augmentais la pression jusqu ;\ 50 ou 60 cm. et même davantage. 11 arrive parfois aussi que, par l'intermédiaire des capillaires, on injecte en même temps les vaisseaux lymphatiques: mais on s'en aperçoit immédiatement et cela offre l'avantage que l'injection pénètre plus loin et remplit un plus grand nombre de canaux biliaires. .

3) Pour être sûr de ma technique et avant de passer à mes expériences , j ai d'abord injecté quelques foies normaux et cela aussi bien par les vaisseaux sanguins (veine porte) que par les canaux biliaires. C'est un bon conseil que je puis donner à tout qui s'occupe de l'étude des canaux biliaires; car l'étude de la disposition normale des organes nous fournit une foule de renseignements et aide sérieusement à l'étude des dispositions déterminées par des conditions pathologiques.

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par exemple par le carmin aluné, donne des images très peu nettes, parce que le protoplasme des cellules hépatiques est très granuleux.

Pour étudier les canaux biliaires, j'ai encore taché d'utiliser la méthode de GOLGI, qui fait apparaître les lumières des glandes en général.

J'ai tâché, par cette méthode, de mettre en évidence les capillaires biliaires sur deux foies humains normaux; mais je n'y ai pas réussi. Mon insuccès dépend sans doute de ce que ces foies n'ont pu être traités que 15 heures au moins après la mort, alors que la méthode de GOLGI exige d'être pratiquée sur des organes frais.

Ensuite cette méthode est si subtile et si longue et donne si rarement des résultats satisfaisants, que je l'ai abandonnée pour mes recherches spéciales.

Je puis maintenant passer à la description de mes expériences.

Mais il est bon que je commence par donner un court aperçu de la texture histologique que présente le foie normal du lapin.

La structure lobulaire du foie est, chez le lapin, un peu plus nettement marquée que chez l'homme ; les prolongements des dernières ramifications du tissu conjonctif périlobulaire sont aussi très minces, très longs et s'unissent parfois aux prolongements voisins.

Les lobules ne sont pas entourés d'anneaux fermés de tissu conjonctif. Par conséquent, lorsque dans les foies d'animaux soumis à des expériences on trouve ces anneaux , on peut-dire qu'il y a eu hyperplasie du tissu conjonctif.

Les cellules hépatiques sont serrées les unes contre les autres, les capillaires sont fins et, si l'on n'a pas recours à des injections, on ne voit pas le réseau des capillaires biliaires, ni les petits orifices entre les trabécules hépatiques. Les cellules hépatiques sont , en général , polyédriques , à contours nets et contiennent un petit noyau arrondi. Leur protoplasme est très granuleux. Ces granulations ne sont pas toutes colorées en noir par le liquide de Flemming.

En beaucoup d'endroits, aussi bien à la périphérie des lobules qu'au voisinage immédiat de la veine centrale, on voit que les cellules hépatiques extrêmes, d'un côté comme de l'autre, ne sont pas granuleuses, mais possèdent un protoplasme homogène, opaque et vitreux. Ces cellules sont parfois plus grandes et parfois plus petites que les autres cellules hépatiques et, en général, elles sont un peu étirées dans un sens.

1) Je me permets de demander si ce ne sont pas là les cellules de Kuri'FER, dont il est fait mention dans quelques traités anciens. Je n'ai jamais rencontré ces cellules dans des foies humains.

M. le Prof. Siegenbeek van Heukelom ne les a jamais trouvées dans les foies qu'il a examinés et StôHR, dans la dernière édition de son Histologie normale, n'en parle pas non plus.