II

L'acide osmique pénètre jusqu'au centre de la pièce et tous les. éléments cellulaires donnent des images très nettes. : :E7

A PNRAISE Pour les coupes provenant de morceaux durcis dans l'alcool, il est bon de recourir à la technique suivante qui nous a été également indiquée par M. Brault:

1) Les coupes sortant de l’eau sont mises pendant une demi-heure à 2 heures dans la solution d'acide osmique à 1 pour 100 ; | Fe 2) Plonger ensuite dans l’eau acétique pendant 24 heures. Un séjour plus prolongé des coupes dans ce deuxième liquide n’a aucun inconvénient.

M. Brault trouve qu'avec cette technique les éléments sont mieux fixés que par la méthode de M. Azou-

V. — Quand on veut chercher les phénomènes karyocinétiques, il faut recourir à la méthode employée par notre maître M. Retterer (1). La voici :

1) Plonger les morceaux à examiner dans une quantité abondante de liquide de Zenker (pour obtenir ce dernier : saturer à froid de bichlorure de mercure le liquide de Müller et y ajouter seulement 3 centimètres cubes d’acide acétique pour 100 au moment de s’en servir). Laisser la pièce 3 ou 4 heures dans ce milieu ;

2) Retirer les morceaux et, sans les laver, les plon-

(1) Ed. RETTERER. Épithélium et tissu réticulé. Journal d'anat. et de

physiol., 1897. p. 461-522,

AB Ta ger pendant six heures environ dans une solution concentrée de bichlorure de mercure ; 3) Laver dans un courant d’eau ; 4) Plonger dans l'alcool à 70° auquel on ajoute une petite quantité de teinture d’iode ; 5) Au bout de 24 heures on substitue l'alcool absolu à ce mélange d'alcool et de teinture d’iode ; 6) Eclaircir les pièces dans la benzine Collas du commerce (benzol) immédiatement après l’alcoolabsolu ; 7) Mettre à l’étuve pendant 12 à 24 heures, dans un mélange de benzol et de parafline ; 8) 24 heures de séjour à l’étuve dans la paraffine 430:

9) Monter dans la paraffine à 48° et couper.

D’après M. Retterer, par cette méthode on conserve admirablement les images de la karyokinèse et on fixe très bien les détails de la structure protoplasmique.

VI. — L'inclusion des appendices {celloïdine, collodion, paraffine) est de rigueur. Autrement on éprouve de grosses difficultés dans l'interprétation des coupes histologiques.

ordinaires (picro-carmin, hématéine-éosine, etc.). Ajou-

Nous avons employé les matières colorantes

tons que la thionine rend de grands services, surtout lorsqu'on étudie les nécroses de l’appendice, les cellules nerveuses et les cellules d’Ehrlich. k