LE CORPS ÉLECTROACTIF INTERMÉDIAIRE
G. Recherche du corps électroactif. — Pour choisir le corps électroactif susceptible de servir d’intermédiaire dans la mesure électrométrique du potentiel du système hypoxanthine <7 xanthine Z acide urique, j'ai essayé successivement les divers indicateurs jusqu’à ce que l’un d’eux fût seulement partiellement réduit en présence des 2 premières oxypurines.
On savait déjà que la xanthinedéshydrase qui est très spécifique vis-à-vis des donateurs d'hydrogène, hypoxanthine et xanthine, n’est pas spécifique vis-àvis de l’accepteur d'hydrogène ; et que presque toutes les substances réductibles, peuvent oxyder l’hypoxanthine ou la xanthine en présence de la diastase.
Parmi les réducteurs essayés par Dixon (*) se trouvaient tous les indicateurs de l’échelle de M. CLark compris entre le o-chlorophénolindophénol et le disulfonate d’indigo. L’indicateur recherché devait donc avoir un potentiel négatif plus grand que 0,125 volt.
Effectivement, j’ai vérifié au moyen de la technique de THUNBERG que l’hypoxanthine et la xanthine en présence de la xanthine déshydrase réduisent toute la série des indicateurs d’oxydo-réduction, y compris le chlorure de diméthyl-y/'-dipyridile de MicHAELIS.
En outre, J'ai suivi électrométriquement la variation du potentiel d’une électrode inerte plongée dans un milieu fortement tamponné contenant un mélange de diastase, d’hypoxanthine ou de xanthine, et de divers indicateurs d’oxydo-réduction.
Le tableau I et les courbes suivantes (fig. 4) montrent les valeurs du potentiel d’un mélange d’hypoxanthine (1 em de solution 1,47.10—2 M dans NaOH N /10), de xanthine-oxydase (solution à 1 % dans tampon M de phosphate de pH — 7,5) et de bleu de méthylène (2-10—*M) ou de phénosafranine (2-10—4 M) ou de chlorure de diméthyle-yy’-dipyridile (10 M) avec 1 em tampon de Benepicr (9 grammes de PO,NaH et 1 gramme de PO,NaH, par litre) et 2 em° de tampon de phosphate monosodique M et de NaOH de pH = 7,3.
Les valeurs de Ex indiquées dans ce tableau et dans tous les tableaux qui tr sont la moyenne des mesures faites avec les deux électrodes de chaque tube.
On voit que les potentiels limites qui s’établissent, sauf dans le cas où le corps électroactif est le chlorure de diméthyle-yy'-dipyridile sont peu reproductibles et peu stables. Ils sont d’ailleurs très éloignés des potentiels normaux des colorants employés.
