TABLEAU III
| Fer attribué Fer abandon- Poids total Filtre utilisé en trop à né par le des cendres (filtres ronds de 10 em. 100 cm filtre du filtre de diamètre) de sang (en mg) (en mg) (en mg) Filtre F,, en PARDON LUE rame ordinaire .. .. . 21,6 0,043 1,2 Filtre F,, « sans cendres »
(lavé à CIH et FH, marque Durieux) .. .. 4,3 0,0086 0,154 Filtre F,, « sans cendres »
(lavé à CIH, FH et dégraissé, marque Du- 3,7 0,0074 0,090
rieux)
D’après ces résultats, on voit que du fait de la filtration toutes les valeurs réunies dans le tableau II sont systématiquement entâchées d’une erreur par excès, erreur dont la valeur absolue est toujours d'environ 4,3 (55).
(55) Etant donné les filtres auxquels nous avions recours (filtres Fe):
Le simple examen de ce tableau II faisait d’ailleurs pré: voir une erreur de cette sorte et de cette importance. En effet, alors que l'erreur relative ne dépassait pas 4 pour cent dans la détermination des hémoglobinémies, elle atteignait +7 à +10 pour cent dans le cas des dosages d’épreuve pratiqués sur les solutions d’alun à 50 mg de fer par 100 cm* et jusqu’à +16 % pour celles dont 100 cmé correspondaient seulement à 30 mg de ce métal; c’est bien que dans tous ces dosages devaient s’ajouter une erreur fortuite valant toujours de 3 à 4 pour cent, et une erreur systématique par excès pratiquement constante en valeur absolue (56), erreur qui passait inaperçue dans le cas des sangs où l’on n’a aucun élément de comparaison, mais devenait au contraire très nette dans celui des solutions d’alun. C’est d'ailleurs pour établir la preuve de l'erreur systématique que nous avions entrepris les dosages à blanc qui nous permirent d’en déterminer l’origine et l’ordre de grandeur.
Les apports de fer dûs aux filtrations s'expliquent aisément si l’on se souvient que les matières minérales des papiers-filtres sont celles que l’on rencontre dans leurs eaux de fabrication et que n’enlèvent jamais complètement les lavages à l’acide chlorhydrique, à l’acide RUE et à l’eau distillée qu’ils subissent.
L'importance des erreurs que ces apports provoquaient dans la méthode de Won& (ces erreurs atteignant environ 8,6 pour cent dans le cas des hémoglobinémies humaines normales et des filtres F,, comme il est facile de l’établir
(56) Puisque, dans le cas des solutions d’alun, l'erreur relative était d'autant plus forte que le fer dosé était moindre,
De.
d’après ce qui précède) nous mettait dans l'obligation de les éviter.
Nous avons d’abord essayé d’y parvenir en recourant à des papiers-filtres F,, sans cendres, de traitement plus poussé (double lavage à CIH et FH; quantité totale de cendres paï filtre rond de 10 em. de diamètre: 0 mg, 086) mais ces filtres renfermaient encore une notable proportion de fer. |
Aussi, finalement, au lieu de persister dans cette voie, nous avons remplacé la filtration par une centrifugation, ce qui résoud le problème. Il suffit en effet de centrifuger une assez grand partie (40 cm‘) du précipité tungstique pendant deux minutes à 2.000 tours pour pouvoir pipeter directement et sans difficultés, daus le tube à centrifugation, les 20 cm° de liquide clair nécessaires au dosage colorimétri-
que.
B. — Toute erreur de dosage due à la filtration ainsi écartée, nous avons apporté à la technique de WonG plusieurs autres améliorations sur divers points où elle pouvait gagner en précision et commodité.
1° Nous avons d’abord reninlacé, pour préparer l’étalon colorimétrique, le simple tube à essai gradué préalablement à 20 et 25 cm* et à bouchon en caoutchouc par un ballon jaugé de 25 cm° bouchant à l’'émeri. Nous évitons ainsi tout apport de fer étranger, quand on agite pour le mélange, par un bouchon en caoutchouc douteux (ce qui est souvent le cas, tout comme pour les bouchons en liège), et rendons du même coup toutes les mesures très exactes dans la préparation de la solution étalon. Pour obtenir désormais . celle-ci, nous introduisons, en effet, successivement dans le ballon: 1 em* de la solution d’alun de fer étalon, 0 cmë, 8