ÉTUDE QUALITATIVE DE L'ALIMENTATION CARBONÉE, AZOTÉE ET SULFURÉE

Ce travail a été fait avec la souche isolée et étudiée par J. Chase (1925) et conservée depuis en culture pure au laboratoire de Botanique du P. C. N. Nous en devons la possession à l'obligeance de M. Guilliermond (1).

La nutrition de Saprolegnia à élé étudiée avec du mycélium ensemencé en milieu liquide, dans des tubes de verre Pyrex de 15 X 150 millimètres, contenant 9 cent. cubes de solution nutritive. Les cultures, bactériologiquement pures, ont été conservées à l'abri de la lumière directe et à la température du laboratoire ; cette dernière oscillant quotidiennement entre 17°-18° le matin et 20°-22° le soir.

Comme il est malaisé d'effectuer de nombreux ensemencements à partir d’une même eulture en milieu liquide (étant donné la résistance des filaments mycéliens), ce sont des milieux gélosés qui nous ont servi pour la conservalion des souches. Ces milieux ont servi également lorsqu'il s'est agi de substituer un régime alimentaire donné à un autre, pour l'élimination des traces de l’ancien milieu et l'adaptation du champignon au niveau.

Mieux céÉLosés. — Nous avons utilisé des milieux de même composition que les milieux liquides, additionnés d'une quan-

(1) La détermination exacte de celte souche ne peut être faite, étant donné qu'on n’en peut obtenir la reproduction sexuée (voir Chase, loc. cül.).

SR

tité de gélose suffisante pour l'obtention d’un ensemble rigide (de 13 à 48 p. 1.000 suivant la composition et l'acidité du milieu). La gélose doit être préalablement lavée quarante-huit heures à l’eau courante, puis à l’eau bidistillée plusieurs fois renouvelée. Même avec ces précautions, la gélose contient des impuretés en quantité suffisante pour assurer une croissance de Saprolegnia — à vrai dire, très médiocre — en l'absence de corps sulfurés surajoutés. L'existence de ces impuretés dans le fragment de gélose, qui est introduit avec le mycélium au moment du premier repiquage en milieu liquide, se manifeste par une « croissance résiduelle » du champignon dans un milieu incomplet. Un deuxième repiquage dans le même milieu est alors impossible.

Les milieux gélosés présentant l'avantage d'assurer une survie très prolongée du mycélium : pratiquement, elle est limitée par la dessiccatior du milieu. D'autre part « l'effet bios » ne se fait pas sentir en présence de gélose, chose importante lorsqu'il s’agit d'étudier la croissance de Saprolegnia dans des milieux simples, pauvres en substances organiques.

Miuœux ciquines. — La présence d'impuretés diverses dans la gélose oblige à recourrir aux milieux liquides pour l'étude de la nutrition des Saprolegnia. Notons que la culture en milieu liquide permet de réaliser des conditions qui se rapprochent du mode de vie naturel des Saprolegnia, champion aquatique.

Les expériences de J. Chase montrent que Saprolegnia sp. présente une grande tolérance vis-à-vis des variations de pression osmotique du milieu. D'un autre côté, il possède un pouvoir de concentration élevé vis-à-vis des substances alimentaires (1). Tout ceci permet de faire varier la composition du liquide nutritif dans de larges limites.

Nous avons fixé la composition minérale de nos milieux à la

formule suivante :

Eau bidistillée, en centimètres cubes . . . 1.000 POSHRS EN STAMME EE RE 0,1 GEMEenSraTRMe RER ES EE 0,1

CE PO SR ER En RE EE a Traces.

Na O HN NERO A RE ER ARS 0. $. pour pH = 7,0.

(1) Nous voulons dire par là qu'il est capable de s > développer aux dépens de solutions très diluées de substances nutrilives.

mn —

Lorsqu'il était nécessaire d'accroître le pouvoir tampon du milieu, sa composition élait modifiée ainsi :

Eau bidistillée, en centimètres cubes. . . 1,000 ACélatemdenNdt entorammMen 0 1,0 DOSERETeN STaAMMES. M AE ee 4,0 GIMSreNISrAMME. ee M 0,1

(CN MELLE nn re DR UE PEINE LEP Traces.

NADIA RE LS ne AL RES OMSSpour rt t20.

Ces deux milieux nous on! servi au cours de toutes nos expériences.

MORPHÔLOGIE DES CULTURES EN MILIEU LIQUIDE. — Si un petit fragment de gélose chargé de mycélium est déposé au fond d’un tube contenant une solution alimentaire, des filaments mycéliens se développent et montent vers la surface du liquide ; arrivés là, ces filaments se ramifient abondamment, au point de constituer un disque feutré très serré. La surface supérieure de ce disque mycélien est effectivement émergée : ainsi, une goulte d’eau déposée sur cette surface ne l’imprègne pas immédialement, mais reste sphérique ; l'immersion du disque nécessite un certain effort, et, une fois immergé, il entraine souvent une petite bulle d'air collée à sa surface.

Ayant atteint un certain développement, le premier disque mycélien plonge généralement et, au-dessus de lui, se développe alors un disque nouveau ; et ainsi de suite, jusqu'à épuisement du milieu nutritif. Dans une culture ainsi conslituée, le dernier disque mycélien formé est seul vivant. Dans des milieux alimentaires défectueux, la formalion de disques peut être enrayée et le mycélium arrivé à la surface se ramilie alors dans les limites du ménisque aqueux et grimpe le long du verre entraînant dans sa croissance une mince pellicule d'eau. Dans la partie centrale du tube, il se forme alors un enchevètrement de filaments mycéliens immergés. Cetle croissance en manchon (sans formation de disques mycéliens) indique le plus souvent une alimentation sulfurée défectueuse (qualitativement ou quantitativement).

L'épaisseur des filaments mycéliens varie quelque peu suivant la composition du milieu. Chase signale un amincissement des filaments en présence de fortes concentrations de