La Fluorescence en général
Au début de nos recherches, nous nous sommes demandé, si nous ne tenterions pas à notre tour, après tant d’autres, de fonder une méthode de dosage de l'urobiline et de la stercobiline sur la spectroscopie et nos premiers essais ont été effectués dans ce sens. Mais convaincu bientôt de l’inanité de nos efforts, nous avons abandonné l’usage du spectroscope comme moyen de dosage pour plusieurs raisons, dont nous citerons ici les trois principales.
D'abord le maniement du spectroscope est délicat et demande une habitude,que certains acquièrent très difficilement.
De plus il intervient dans l’appréciation du moment d'apparition de bande minima de l’urobiline des divergences considérables avec chaque observateur. Ces divergences, négligeables peut être pour la simple recherche de ce pigment, deviennent capitales dans une méthode de dosage, puisqu'elles peuvent faire varier l’appréciation
de la quantité d'hydrobilirubine dans des proportions considérables.
La troisième objection plus importante est la suivante : avec des solutions titrées d’urobiline, on peut à la rigueur arriver à des résultats approximatifs, mais lorsqu'on s'adresse àl’urine etaux matières fécales, il y a à côté de l’urobiline et de la stercobiline, quantité de pigments, de substances colorantes diverses, qui viennent ou masquer, outransformer, ou rendre méconnaissable le spectre de l’hydrobilirubine et empêcher le dosage.
Ne pouvant nous adresser au spectroscope, nous avons eu l’idée de faire reposer notre méthode de dosage sur une propriété physique, essentielle de l’urobiline et de la stercobiline : /a fluorescence.
La fluorescence ? c'est-à-dire cette belle teinte dichroïique, phosphorescente par instants, à reflets plus ou moins verdâtres ou mordorés que prennent les solutions d’urobiline et de stercobiline en présence d’un sel de zinc.
Quoi de plus pathognomonique en effet que l’apparition de cette réaction indiscutable et qui ne peut prêter, elle, ni à confusion, ni à discussion et qu'il suflit d'avoir vu une seule fois pour toujours la reconnaitre au premier coup d'œil.
Netteté manifeste de cette réaction, facilité évidente pour tous de sa constatation, sont déja deux arguments puissants en faveur de la fluorescence. Nous en trouvons un troisième dans sa sensibilité délicate.
Pendant longtemps, tous les auteurs quise sont occupés de cette question ont considéré le spectroscope comme le moyenle plus sensible de déceler des traces d’urobiline! Beaucoup pensent encore ainsi. Or, nos recherches personnelles nous ont montré que la bande caractéristique de
