LA FLUORÉSCENCE CLAIRE ET VERTE IMMÉDIATE

exactement { centigramme d’hydrobilirubine de Merck dans 100 centimètres cubes d'alcool amylique. s Nous avons fait plusieurs solutions analogües, dont certaines à près de deux ans d'intervalle; nous avons prié plusieurs chimistes de confectionner eux-mêmes des solutions analogues et nos essais ont été effectués avee ces multiplessolutions desources différentes et cela afin denous entourer de toutes les garanties possibles. Les résultats obtenus ont toujours été sensiblement identiques.

3, — La fluorescence claire et verte immédiate

ou fluorescence-limite.

Nous avons exposé déjà les raisons principales pour lesquelles nous avons choisi le valérianate de zinc pour déceler la fluorescence. Nous avons omis volontairement la plus importante, à savoir la qualité toute particulière de cette fluorescence. Nous nous expliquons.

Lorsqu'on fait tomber grâce à la barette spéciale dans les 10 centimètres cubes de réactif au valérianate de zinc quelques gouttes de la solution étalon d’hydrobilirubine, on voit se succéder deux phases très nettes dans lPévolution des phénomènes de la fluorescence.

Tout d’abord, on voit se produire dans le réactif, non pas un précipité, mais un léger louche. À mesure que l'on ajoute une à une quelques gouttes de la solution étalon d’urobiline, /e louche persiste mais sans augmenter, tandis qu'apparaît simultanément une fluorescence progressivement plus intense. Soudain une goutte de plus et le louche disparait brusquement, faisant place à une magnifique fluorescence verte et claire.

Donc en résumé, on assisteà une première phase de fluo-

rescence verte mais trouble, à laquelle succède (1) brusquement une fluorescence verte mais claire. Cette constatation nous semble précieuse pour délimiter ce que nous appelons la fluorescence limite ou fluorescence type sur laquelle repose toute la précision de notre méthode.

Or cette fluorescence-limite est atteinte pour nous lorsque à x gouttes de la solution étalon d’hydrobilirubine à un centigramme pour 100 nécessaires pour faire apparaître dans 10 centimètres cube de réactif au valérianate de zinc, la fluorescence verte mais trouble, une seule goutte de plus suffit à faire apparaître une fluorescence verte et claire immédiate. En d’autres termes, le dosage est terminé et la fluorescence-type ou limite est atteinte lorsque la fluorescence verte mais trouble fait place brusquement à une fluorescence verte mais claire.

Or, nous verrons ultérieurement qu'avec la solution étalon, titréeà un centigramme d'hydrobilirubine pour 100 centimètres cubes d'alcool apnylique, la fluorescence-limite ou fluorescence verte et claire immédiate apparait dans les 10 centimètres cubes de réactif révélateur toutes les fois que ce réactif contient exactement 10 millionièmes de gramme d’hydrobilirubine,

Nous concluons donc de là, quetoutes les fois que x centièmes de centimètre cube d'alcool amylique, ayant repris toute l’urobiline ou toute la stercobiline d'une urine ou d'une matière fécale donnée, feront apparaitre dans 10 centimètres cube de réactif révélateur la fluorescence verte et claire, limite, type, lenombre de centièmes de centimètre cube x, variable avec chaque urine et chaque fèces, con-

(1) Les mêmes phénomènes se produisent du reste, ainsi que M, Grimbert l'a signalé depuis longtemps, avec l’acétale de zinc,