DÉTERMINATION DE LA FLUORESCENCE-LIMITE

geant pas dans la cuve à glace; cela pour la commodité des manipulations, On lave préalablement la burette graduée en centièmes de centimètre cube avecde l'alcool, puis on y verse une petite quantité de la solution titrée d’hydrobilirubine et cela afin de se débarrasser des dernières traces de l'alcool de lavage.

Le robinet de la burette étant alors fermé, on remplit cette dernière avec la solution titrée ou solution-étalon, qui doit s’élever dans l’hydrobilirubinomètre jusqu’à la base de la portion terminale évasée, c’est-à-dire bien audessus de la division initiale O. Ouvrant alors le robinet, on fait échapper le liquide, de façon à ce que le ménisque supérieur vienne en regard de la division O.

Cette facon de procéder a l'avantage, grâce à l’écoulement du trop-plein de la burette, de chasser les bulles d’air qui s'accumulent fatalement au niveau et au-dessous du robinet.

À l’aide d’une pipette exactement calibrée, on aspire 10 centimètres cubes du réactif révélateur au valérianate de zinc et on l’introduit dans une des cuves à glace; on remplit de la même façon la deuxième cuve. On vérifie une fois encore la position du ménisque supérieur du liquide dans la burette graduée, et si ce qui est la règle, il est remonté au-dessus du zéro, on le ramène soigneusement à la position voulue. Cela fait, à l'aide d’une feuille de papier buvard, on essuie avec précaution l'extrémité inférieure de la burette, afin de ne laisser aucune trace de s0lution à ce niveau.

On ferme alors le couvercle de la chambre noire et l’on adapte grâce à untube de caoutchouc, l'extrémité inférieure de la burette sur l’embout en verre qui, passant au travers du bouchon perforé, vient pénétrer jusqu'à l'intérieur de la

cuve à glace qui se trouve la plus rapprochée de la source lumineuse. On sait qu'un deuxième trou percé dans ce bouchon permet à un tube de verre de pénétrer à l’intérieur de cette même cuve, afin de permettre par insufflation l'agitation de son contenu.

On allume à ce moment l’arc électrique et on le règle.

Puis, regardant à l’aide du viseur à l’intérieur de la

chambre noire, l’observateur aperçoit les deux cuves à glace, accolées l’une à l’autre, éclairées toutes deux par “un cylindre lumineux qui apparait d'une blancheur éclatante sur le fond noir environnant, au sein même des 10 centimètres cubes de réactif révélateur placés dans les deux cuves.

Ouvrant alors le robinet de la burette graduée, on fait tomber lentement et une à une quelques gouttes de la solution étalon, tandis que en mêmetemps on agite le mélange dans la cuve à glace par le petit appareil à insufflation déjà décrit. À mesure que les gouttes tombent dans les 10 centimètres cubes de réactif valérianique, l'observateur, regardant toujours par le viseur, voit se succéder les diverses colorations suivantes dans la cuve à glace placée à sa gauche, c’est-à-dire dans celle qui se trouve tout contre la source éclairante : tout d’abord le cylindre lumineux est d’une blancheur éclatante, puis une fluorescence légère se desine, mais à la fois verte ettrouble ; peu à peu le vertet le trouble s’accentuent et enfin brusquement le trouble disparaît, la fluorescence claire et verte est atteinte. Le dosage est terminé, puisque la fluorescence-limite est obtenue.

Dans la cuve de droite au contraire, cuve de comparaison, le cylindre lumineux qui éclaire le réactif apparaît toujours d'une blancheur éclatante. Si on lit alors sur la burette graduée le nombre de divisions qu'il a fallu em-