Détermination de la teneur en urobiline
ou stercobiline des urines ou des tèces examinées.
Après avoir ainsi extrait de l’urine ou des fèces à examiner l’urobiline et la stercobiline, on obtient en définitive une solution d’alcool amylique, renfermant toute l’urobiline ou toute la stercobiline qu'il va s'agir de doser.
L'appareil de dosage est placé en bonne [lumière sur une table qui le met à portée de l’expérimentateur.
Pour faciliter les manipulations la burette graduée est placée en dehors de la cuve à glace, le couvercle de la chambre noire étant relevé.
On procède d'abord au lavage à lalcool et de la burette graduée et des cuves à glace.
L'alcool amylique chargé de l’urobiline ou de la stercobiline de l’urine ou des fèces dont on veut effectuer le dosage, est versé à l’aide de portion terminale évasée en entonnoir, à l’intérieur de la burette graduée. On a soin de laisser perdre les premiers centimètres cubes ainsi introduits, de facon à entrainer les dernières traces d'alcool de lavage que cette burette pourrait encore eon-
tenir. Fermant le robinet, on remplit la burette de telle sorte, que le niveau du liquide atteigne la partie supérieure de cette burette, dépassant de beaucoup la division initiale O.
On fait alors échapper ce trop plein en ouvrant le robinetet on amène le ménisque supérieur du liquide en regard de la division O. L’évacuation de ce trop-plein a pour but de chasser les bulles d’air qui, s’accumulant au niveau et au-dessous du robinet, fausseraient la précision du dosage.
On attend quelques minutes et on s'aperçoit bientôt que le ménisque supérieur du liquide est remonté audessus du O. Cela tient au faible calibre de la burette : le niveau du liquide a son intérieur a varié du fait de traces de ce liquide restées sur les parois et lentement descendues.
On ramène soigneusement ce ménisque en face de la division O.
On essuie l’extrémité inférieure de la burette :vec un, feuille de papier buvard, afin d'enlever les dernières traces de la solution anylique qui auraient pu y demeurer.
Aspirant deux fois de suite, à l’aide d’une pipette graduée, [0centimètres cubes de réactif au valérianate de zine, on les verse successivement dans les deux cuves à glace, on rabat alors le couvercle de la chambre noire, et l’on adapte à l’aide d’un raccord de caoutchouc, l'extrémité inférieure de la burette sur l'embout en verre, qui descend à l'intérieur de la cuve à glace la plus rapprochée de l'appareil d'éclairage. Un deuxième tube de verre, destiné à agiter le contenu de la cuve à glace y pénètre également.
On allume Parc électrique, on le règle, et regardant
par le viseur, le regard visuel de l'observateur tombe perpendiculairement sur les deux cuves à glace. Les 10 centimètres cubes de réactif révéiateur qu'elles renferment sont éclairés latéralement par un cylindre lumineux brillant d'une blancheur éclatante.
On peut à ce moment commencer le dosage proprement dit. Pour cela on ouvre le robinet de la burette graduée, et on fait tomber une goutte de la solution amylique à doser dans les 10 centimètres cubes de réactif valérianique; on agite par insufflation, on regarde par le viseur et dans l’immense majorité des cas, on voit toujours la blancheur éclatante du cylindre lumineux, éclairant les deux cuves. On continue à verser goutte à goutte la solution amylique, agitant toujours le mélange et surveillant toujours, à l’aide du viseur, le cylindre lumineux.
Bientôt, dans la cuve de gauche dans laquelle tombe le liquide à doser, un trouble apparaît, trouble d’abord léger, puis plus accusé, tandis que se dessine parallèlement une fluorescence qui progressivement s’accuse et se précise.
On voit donc au total dans le cylindre lumineux une f/uorescence verte mais trouble, et cela dans la cuve placée à la gauche de l’observateur. Dans la cuve placée à sa droite le cylindre lumineux demeure naturellement d’une blancheur éclatante, puisque cette cuve ne sert pas au dosage. Elle est placée là, nous le rappelons, pour servir de terme de comparaison; grâce à elle, dont la couleur et l'aspect ne varient pas, l’observateur apprécie d'autant mieux les variations de couleur et d’aspect de la cuve voisine. Le dosage est presque terminé et il suffit en général d’ajouter une seule goutte de la solution à doser pour voir immédiatement le cylindre lumineux fluorescent vert et trouble de la cuve de gauche, se changer brusquement en tune
fluorescence verte mais claire (1). La fluorescence-limite est atteinte : le dosage est terminé. |
À ce moment il n’y a plus qu'à lire sur la burette graduée le nombre de divisions, c’est-à-dire de centièmes de centimètres cubes qu'il a été nécessaire de faire tomber dans les 10 centimètres cubes de réactif valérianique pour obtenir cette fluorescence-limite. On note soigneusement ce chiffre.
Remarque. — Dans quelques cas rares, il peut se faire qu'une solution amylique, très riche en urobiline ou en stercobiline, fasse apparaître et au delà, la fluorescencelimite dans le réactif valérianique, avec une seule goutte. La marche à suivre dans ces cas est très simple : il suffit d'étendre la solution amylique primitive de deux ou trois fois son volume, en se servant naturellement pour cette solution d'alcool amylique et de recommencer ensuite le dosage. On notera bien entendu le titre de la dilution, afin d’en tenir compte dans les calculs.
