C. R. . 189S, a' Semestre. (T. CXXVII, M- 21.) HO

» 4" ^^^^ '^^'s trouvés dans les tourbières montrent, de haut en bis, une altération de plus en plus profonde; leur tissu est souvent parcouru par des mycéliums de Champignons microscopiques; ils contiennent des modifications curieuses du proloplasma; enfin, ils montrent de nombreux Microcoques, dont quelques-uns restent mobiles longtemps après leur sortie de la tourbière. »

ZOOLOGIE. — Production artificielle des perles chez les Haliotis. Note de M. Louis Boutan, présentée par M. de Lacaze-Duthiers.

« L'Huître perlière (Méléngrine) n'est pas le seul Mollusque qui soit capable de donner des perles fines. On sait que d'autres Acéphales peuvent également en contenir à l'état naturel et que, depuis longtemps déjà, des essais ont été tentés pour en faire produire artificiellement par les coquilles d'eau douce.

» Je me suis demandé s'il ne serait pas possible de faire naître artificiellement des perles dans les coquilles marines et en particulier dans celles des Gastéropodes. Beaucoup de ces animaux présentent une nacre très irisée, qui paraît susceptible, en s'orienlaiit en couches circulaires, de fournir l'orient cherché.

» Dans les Gastéropodes que j'ai mis en expérience, j'ai été amené à choisir VHaliolis. Ce Mollusque est abondant dans les fonds rocheux de la Manche; il atteint une taille considérable; sa coquille est revêtue, dans l'intérieur, d'une couche nacrée très brillante; dep'us, il se prête très bien à l'expérimenlatioti. Place dans les grands bacs du laboratoire de Roscofi", où ces recherches ont été faites, il s'acclimate facilement et, pourvu qu'on lui fournisse de l'eau bien aérée en quantité suffisante, on n'a pas à se préoccuper de son alimentation (').

» Contrairement à la plupart des animaux marins, V Haliotis peut résister à des opérations très sévères.

» C'est ainsi, par exemple, que, pour éluclier la formation de la nacre, j'ai été amené à enlever complètement la coquille sur un certain nombre d'échantillons. Quelques

(') Ces conditions se trouvent réalisées dans le laboratoire fondé en Bretagne par M. de Lacaze-Duthiers, grâce à la présence d'une grande cuve qui permet de faire arriver l'eau de mer sous pression dans les aquariums : c'est là que ces expériences ont été faites.

sujets ont résisté et se sont promptement rétablis, malgré la gravité du traumatisme que je leur avais fait subir. Actuellement, plus d'une demi-douzaine, admirablement soignts par le gardien de la station, sont encore parfaitement vivants, et cependant l'ablation de la coquille remonte au mois de mars dernier. Ces étonnantes bêles ne paraissent pas avoir beaucoup souffert de cette mutilation; elles ont sécrété déjà toute une série de coquilles, sans pouvoir arriver à en constituer une définitive. Ces coquilles, de nouvelle formation, n'ont probablement pas de point daltaclie suffisant sur les muscles contusionnés, et, lorsque l'animal se contracte, elles se détachent avec une rare facilité.

» Celle expérience préliminaire m'a montré que le périostrncum n'est pas ime sécrétion particulière du bord du manteau et que, chez l'adulte, toules les glandes de la surface du manteau peuvent donner lieu à la même production. Je suis arrive à cette conclusion, que le périostracum n'est autre chose que In sécrétion des glandes au contact du milieu extérieur, et la nacre, la même sécrétion à l'abri de la coquille.

» De là à m'occuper de la production artificielle des perles, il n'y avait qu'un pas.

» J'ai commencé assez timidement l'expérience de la protluction artificielle des perles, au mois d'octobre de l'année dernière, en insérant dans l'intérieur du manteau, et entre le manteau et la coquille, une série d'aiguilles de nacre que je faisais pénétrer à l'aide de pinces.

» Au mois de mars dernier, j'ai constaté que les aiguilles insérées dans le manteau ne paraissaient avoir produit aucun effet, et que ces corps étrangers introduits dans les tissus n'avaient amené aucune formation particulière.

» Il n'en est pas de même des fragments de nacre placés entre la coquille et le manteau. Ceux-ci s'étaient soudés à la coquille et étaient recouverts d'une belle couche irisée. Encouragé par ce premier résultat, qui me prouvait qu'on pouvait obtenir une abondante sécrétion de la nacre chez \'Haliotis en interposant des corps étrangers entre la coquille et le manteau, j'ai fait plus en grand ces expériences, pendant le courant de l'élé et du printemps derniers (mars-octobre 1898).

» Avec l'aide de Marly, le dévoué gardien du laboratoire, qui m'a été d'un grand secours dans le travail opératoire, j'ai mis en train trois séries d'expériences, dans le courant de mars, avril et juin.

)> Première expérience. — Soixante Haliotis ont été trépanées au niveau du tortillon, de manière à enlever un fragment de coquille de G"" à 7""° de diamètre. Par cet orifice, j'ai fait pénétrer une perle de nacre, de manière à refouler le niajiteau et à interposer la perle entre le manteau et la coquille: l'orifice a été ensuite obstrué à

l'aide de ciment faisant de suite prise rapide dans l'eau. L'expérience a eu lieu en mars.

» Deuxième expérience. — Une cinquantaine A'Haliotis ont été opérés du 22 au 26 avril. J'ai introduit dans l'intérieur de la cavilé branchiale une perle que j'ai fixée à l'aide d'un crin de Florence, en faisant pénétrer le crin par les orifices qui existent naturellement dans la cavité branchiale.

» Troisième expérience. — Dans le mois de juin, j'ai opéré une série de quarante Haliotis en perçant sur le côté droit de la coquille deux orifices, au niveau du muscle coquillier, et j'ai introduit ensuite une perle de nacre au niveau des deux orifices qui me servaient de point d'attache, en procédant comme précédemment,

» Voici les principaux résultais obtenus :

M Toutes les Haliotis ont sécrété de la nacre au niveau des corps étran- £;ers introduits et, dans plusieurs coquilles, ont nnoulé, à la sin-face des perles de nacre, de véritables perles fines, dont je soumets quelques échantillons à l'Académie.

» Les premières perles obtenues ne sont pas suffisamment détachées de la coquille et présentent une base de soudure trop Lirge avec cette dernière; le défaut a été en partie corrigé dans les expériences ultérieures, et sur les échantdlons récents, on peut constater que la partie de la perle la plus rai)prochée de la coquille est d'abord englobée par la couche nacrée.

» Il faut remarquer cejjendant que les perles ainsi obtenues artificiellement, si elles ont sensiblement la même constitution chimique que les perles naturelles, ne sont orientées en couches circulaires qu'à la périphérie, ce qui leur doime l'orient cherché, mais renferment dans leur intérieur un gros noyau de nacre dont l'orientation des couches est nécessairement dillércnte de celles de la périphérie. On ne saurait cependant prétendre que ce sont là des perles fausses, puisque les perles naturelles contiennent, également, un noyau de grosseur indéterminé.»

BIOLOGIE. -- Sur une méthode de coloration du protoplasma par les pigments bactériens. Note de M. L. Matruciiot (') présentée par M. Gaston boniiier.

« Malgré les nombreux travaux qui, depuis vingt ans, ont eu pour objet l'étude des Bactéries chromogènes, ntd expérimenlaleur, à ma connais-

(') Travail fait au laboratoire de Botanique de la Sorbonne, dirigé par M. Gaston Bonnier.

( 83i ) sance, n'a cherché à étudier l'action des pigments bactériens en nature sur le protoplasma d'autres organismes vivants. Il est cependant possible d'obtenir, dans cette voie, des résultats intéressants, et c'est l'un de ces résultats queje voudrais signaler aujourd'hui.

» En faisant végéter simultanément, sur un même milieu, une Bactérie chromogène à pigment violet et un Champignon fdamenteux, on peut obtenir une imprégnation du protoj)lasma du Champignon par le pigment; comme la matière colorante est élective et ne se fixe que sur une partie du protophisma, cette technique, théoriquement très simple, constitue une véritable méthode de coloration permettant de révéler, tout au moins partiellement, la structure du protojilasma vivant.

» C'est par ce procédé qu'ont été observés tous les détails de structure du protoplasma fondamental d'une espèce de Mortierella, détails que j'ai déjà fait connaître à l'Académie ('). Dans ce cas, le pigment violet de la Bactérie se fixe uniquement sur l'enchyléma ou proto|)lasma granuleux du mycélium immergé : on voit apjjaraître, dans la masse du cytoplasma, un certain nombre de cordons d'un violet franc, noyés au milieu d'une masse hyaloplasmique indiflérente au réactil colorant. Ces cordons, qui, à l'état vivant, sont seuls le siège des courants protoplasmiL|ues, ne sont continus que dans les parties moyennement jeunes du mycélium; dans les parties plus âgées, ils se fragmentent par un processus que j'ai décrit, et ils finissent par se réduire à des granules de taille variable fixés à la paroi du filament. J'ajoute enfin que, dans aucun cas, la membrane du Champignon ne se colore par l'action du pigment.

)) On peut se demander si cette diflérenciation du cvtoplasma en deuv parties distinctes n'est pas quelque chose d'arlificiel, dû à l'action même du réactif. Il n'en est rien : la structure mise en évidence par le réactif colorant préexiste à son action. J'ai déjà signalé, en effet, dans ma première Note à l'Académie relativement à ce sujet, une observation très précise faite par moi sur l'écoulement de gouttelettes huileuses dans le protoplasma vivant, et j'en ai conclu à l'existence de cordons canaliculaires à

( ) L. Matruchot, Sur la structure du protoplasma fondamental dans une espèce de Mortierella {Comptes rendus, t. CXXIII, p. i32i). — Sur la structure et l'évolution du protoplasma des Mucorimies {Comptes rendus, t. CXXVI, p. i363). Depuis la publication de cette dernière Xote, mes expériences n'ont pas toujours confirmé l'interprétation des faits relatifs à quelques Mucorinées. Mes observations n'ont donc pas peut-être, pour toute la famille des Mucorinées, la généralité queje leur avais attribuée. Mais, pour le genre Mortierella en particulier, dont j'ai pu depuis lors étudier deux autres espèces, mes observations et mes conclusions subsistent en entier.

l'état vivant. Je puis ajouter aujourd'hui que la fixation du pigment bactérien sur toute une portion de myréiium y fait .npparaître des structures dilTtTentes, qui dérivent visiblement les unes des autres et qui ne sont pour ainsi dire que des stades d'évolution d'un même protoplasma à divers âges. Si la structure observée était due à l'action du réactif sur un protoplasma homogène, la constitution morphologique ainsi mise en évidence devrait être la même sur toute la longueur du filament. Puisqu'il n'en est rien, c'est qu'avant l'action du pigment le protoplasma n'était pas le même aux divers points; c'est donc qu'il évolue dans sa forme interne, et la structure observée est précisément l'image de cette forme interne rendue apparente à nos yeux. Et puisque, d'une part à l'état vivant, d'autre part après coloration par le pigment, les cordons d'enchyléma semblent garder même contour, c'est que la technique employée ne déforme que très peu, ou même pas du tout, la structure fondamentale du protoplasma.

« I>a Rnctérie h pigment violet qni a servi à mes expériences est un Bacille allongé dont les éléments ont normalement 4''-5'^ de longueur sur i^" de liirgeur. Je l'ai isolé de l'eau de Seine, et, malgré ses dimensions considérables, je le crois voisin du Bacillus violoceus. Il se cultive avec facilité sur divers milieux, mais perd très rapidement son pouvoir chromogène.

>' \.p pigment sccréié p;ir ce Bacille est expulsé au dehors de la cellule à travers sa membrane; il s'accumule à la surface de la zooglée, surtout dans les sillons et les méandres qu'elle forme; et c'est là que le mvcélium du Champignon, prenant contact avec la matière colorante, l'absorbe et la fixe sur son protciplasma.

» Il est à remarquer, à ce propos, que l'affinité, que je constate ici, des pigments bactériens pour le proloplasma, comjilèle l'analogie remarquable qu'on a déjà signalée entre ces principes colorants et les couleurs d'aniline, analogie qu'on fondait, jusqu'alors, surtout sur les réactions chimiques et le propriétés optiques.

» La méthode de recherches que je viens d'exposer et qui m'a donné des résultats si curieux par l'association d'une Bactérie violette et d'un champignon du genre Morlierella, seinble devoir être féconde, car elle est susceptible, ainsi qu'on le voit aisément, d'une double extension :

» Dune part, on peut faire agir l'agent chromogène sur tel ou tel organisme choisi à volonté ( ' ).

(') On conçoit même la possibilité d'étudier par ce procédé la structure du protoplasma chez divers animaux inférieurs (Protozoaires, etc.) et même chez les animaux supérieurs ( leucocytes teiniés par le pigment du Bacillus pyocy une us). Il ne semble pas que l'attention des bactériologistes ait été attirée de ce côté.

» D'autre part, on peut f;iire varier ror;iîanisme chromogène et étudier ainsi tout une gamme de pigments dont l'origine et les propriétés ne ^ont pas les mêmes, et dont le mode de fixation sur le protoplasma doit vraisemblablement conduire à des résultats intéressants.

» Je veux aujourd'hui donner un premier exemple de la généralité de la méthode.

» En cultivant simultanément, sur un même milieu, la Bactérie violette décrite plus haut et un long Bacille filamenteux incolore, j'ai constaté sur celui-ci une localisation très nette de la matière colorante. La membrane du bacille, ainsi qu'une partie du protoplasma, reste incolore; le pigment ne se fixe que sur un cordon plasmatique légèrement granuleux, qui n'est pas sans offrir quelque analogie avec les cordons d'enchyléma des Mortierella. Ce cordon unique n'occupe pas l'axe du filament bactérien; il est enroulé en tire-bouchon, et ses tours de spire, voisins de la paroi du filament, ménagent, par conséquent, une partie centrale non colorée. La forme de ce cordon est régulièrement hélicoïdale, et le pas de l'hélice se trouvant être sensiblement égal à son diamètre, le profil de ce cordon rappelle assez exactement celui d'un escalier à marches aussi hautes que larges.

)i Je considère ce cordon spirale comme étant l'homologue du corps ce/j^ra/ déjà décrit chez diverses Bactéries (Bùtschli, iNIitrophanow, etc.); mais il a ici une forme plus dinérenciée, \\\\ coutour mieux défini et plus régulier; il est moins déformé peut-être, grâce au réaclil" très particulier qui m'a servi à le mettre en évidence.

» En résumé, les pigments sécrétés par certaines Bactéries sont susceptibles de se fixer sur le protoplasma des cellules d'autres organismes. En faisant végéter, sur un même milieu, une Bactérie chromogèue avec un Champignon filamenteux ou avec une Bactérie incolore, on peut arrivera mettre partiellement en évidence, chez ceux-ci, la structure du [)rotoplasma fondamental.

» En particulier, ce procédé de coloration, dont je me réserve d étendre l'application, m'a déjà fourni des docimients sur la structure protoplasmique de plusieurs JMucorinées (^Morliereila) et m'a permis d'apercevoir, d'une façon plus nette qu'on ne l'avait fait jusqu'ici, le corps cerdral de certaines Bactéries. «

GÉOLOGIE. - Sur les phosphates noirs des Pyrénées. Note de M. David Levât, présentée par M. Haton de la Goupillière.

« J'ai été appelé à visiter, dans les premiers jours du mois de mai 1898, un gisement de phosphate situé à 32*^'" au sud d'OIoron (Basses-Pyrénées). L'aspect caractéristique de la matière, qui ressemble à de l'anthracite impur, son mode particulier de gisement, à la limite du terrain dévonien et delà formation houillère pyrénéenne, m'engagèrent à étudier de plus près la question et à porter mes reclierches sur l'ensemble de la formation dévonienne du versant français de la chaîne des Pyrénées.

» J'ai été assez heureux pour pouvoir, à la suite de mes études sur le terrain, retrouver ces plios|)hates sur un grand nombre de points, en dehors des Basses-Pyrénées, notamment dans l'Ariège, la Haute-Garonne et même dans l'Aude et le Tarn. Je suis donc en mesure de faire connaître, au moins dans ses lignes principales, cette nouvelle source de phosphates friinçais, de fixer son niveau géologique et de donner une idée de son importance au point de vue agricole.

» Nature des gisements. — J'ai reconnu d'abord que ces i;isements ne constituent ni des poches, comme les phosphates de la Somme, ni des amas plus ou moins filoniens comme les phosphorites du Quercy, mais bien une couche régulière et puissante, située à un niveau géologique si bien déterminé que |'ai pu le suivre sur toute la longueur des Pyrénées, en le recoupant dans les vallées d'Accous, de Lcscun, des Eaux-Bonnes, de Luclîon, du Salât, de l'Ariège, aux environs de Prades; puis, remontant vers le nord, dans les Corbières et jusque dans la Montagne-Noire aux environs de Cannes; nul doute qu'il ne se prolonge dans l'Hérault, où l'horizon classique à Graptolites et à Cardiola interrupta a été si bien décrit par MM. de Rouville et Viguier dans leurs publications récentes.

» Sans entrer dans le détail de mes reconnaissances sur le terrain, je me bornerai à dire ici que ces phosphates se trouvent invariablement situés au contact du calcaire dévonien supérieur, la Griotte des Pyrénées, avec les schistes sus-jacenls, attribués soit au Permien, soit au Carbonifère, soit même, d'après les travaux de M. Seunes, au Dinantien.

» La composition du niveau phosphaté est sujette à des variations considérables. La continuité de la couche, au point de vue purement géologique, est désormais un fait acquis et indiscutable, mais sa valeur indus-

trielle est, au contraire, très variable et dépend essentiellement de la proximité des voies de communication, élément primordial pour l'utilisation de matières avant une valeur intrinsèque aussi faible que celle des phosphates.

» Nature des phosphates. — Les phosphates des Pyrénées se présentent sous un aspect tout à fait comparable à celui de l'anthracite, tachant fortement les doigts en noir; ils prennent volontiers la texture imbriquée, écailleuse, comme un bulbe d'oignon. On les a décrits maintes fois sous le nom de schistes noirs, schistes charbonneux, anthracite impur, couche graphiteuse, etc.

» Sur certains points privilégiés, notamment sur le grand affleurement dévonien qui forme une bande dirigée est-ouest entre S.iint-Girons etFoix, la couche est caractérisée par la présence, dans son sein, diine quantité de nodules noirs, brillants, généralement aplatis, dont voici la composition :

Analyse des nodules de phosphate de l'Ariège.

Corps dosés. I. i. 3. 4. 5. 6. 7.

Acide phosphorique. .. . 32,20 35,45 28,75 02, 5o 3i,2S 28,10 29,22

Silice 16 8,60 non dosé non dosé non dosé non dosé i4>6o

Chaux 46.40 49-60 id. id. id. id. 42,20

Oxyde de fer et alumine, très peu très peu id. id. id. o,4o 1,78

Equivalent en phosphate

tribasique 70, 3o 77)28 62,67 70,85 68,20 61,26 68,69

» Ces nodules arrivent à former le quart ou le tiers de la masse totale ; mais il v a plus : le remplissage lui-même est formé de matières phosphatées, de telle sorte qu'après criblage et séparation des nodules, le résidu contient encore i4 à 16 pour 100 d'acide phosphorique, teneur convenable pour les applications agricoles.

» Les matières, d'apparence la plus schisteuse, d'aspect terne, ressemblant à l'ardoise, contiennent encore 7,10 pour 100 d'acide phosphorique. Les schistes luisants, contournés, qui enrobent les nodules et qui forment une portion importante de la masse, accusent jusqu'à 11,70 pour 100 d'acide phosphorique.

» Présence de matières organiques et de l'azote. — Une dernière particularité de ces phosphates noirs, c'est leur association constante avec une proportion de matière organique qui atteint ^5 et 28 pour 100 dans certaines parties de la couche. La teneur en azote organique varie entre i^^ et 5''^ à la tonne. Il n'y a pas d'azote nitrique.