‹ Technique microbiologie et sérothérapique (microbes pathogènes de l'homme et des animaux)Chapitre 139 sur 350 · VII. - INOCULATION IN TRA PÉRI TONÈA L E · texte numérisé non relu

VII. - INOCULATION IN TRA PÉRI TONÈA L E

A. Substances liquides. — Toutes les précautions possibles doivent être prises pour ne pas perforer l'intestin.

1° Fixer solidement l'animal surle dos; raser et désinfecter quelques centimètres carrés de la peau de l'abdomen.

2° Pincer la paroi abdominale entre le pouce et l'index de la main gauche de façon à obtenir un pli comprenant la peau et les muscles.

3° Enfoncer l'aiguille de la seringue à la base du pli de manière à ce que la pointe fasse saillie au dehors, du côté opposé; ramener alors l'aiguille en arrière pour amener la pointe dans la cavité abdominale, et pousser l'injection. Retirer ensuite l'aiguille.

Le procédé suivant donne une sécurité plus grande ; avec une

aiguille recourbée qui n'est creuse que dans sa première moitié et dont le trou est situé à la partie la plus déclive de l'arc (fig. 123), on traverse la base du pli de la paroi abdo-

Fig. 123. — Aiguille pour mo- , . ... . .„. , ,

cuiation dans le péritoine. minale; la pointe taisant saillie au dehors,

le trou se trouve dans la cavité péritonéale; on pousse alors l'injection. La pointe de l'aiguille, restant au dehors pendant toute la durée de l'injection, ne peut blesser l'intestin.

B. Substances solides. — 1° L'animal est fixé sur le dos, la peau de la région rasée et aseptisée.

2° Pratiquer sur la ligne blanche une incision de la peau, incision dont la longueur varie avec la taille du corps à inoculer.

3° Couper l'aponévrose au niveau de la ligne blanche en s'aidant de la sonde cannelée pour ne pas léser l'intestin.

4° Saisir chaque lèvre de l'aponévrose avec une pince à forcipressure et l'attirer en haut autant que possible pour s'opposer à la bernie de l'intestin; introduire dans la plaie le corps à inoculer et le faire pénétrer dans la cavité péritonéale en l'engageant latéralement sous la paroi musculaire.

5° Suturer l'aponévrose à la soie, puis suturer la peau et recouvrir la plaie avec du collodion.

Remarque. — La plus grande asepsie est nécessaire dans la pratique des inoculations intrapéritonéales; ces inoculations seront toujours faites avec un produit pur; si l'on injectait dans le péritoine des crachats, matières fécales, etc., l'animal succomberait rapidement à une péritonite banale.

C. Sacs de collodion. — Dans leurs recherches sur la toxine cholérique, Metchnikoff, Roux et Salimbeni ont imaginé de cultiver les microbes dans de petits sacs de collodion fermés et inclus dans le péritoine des animaux. Par ce procédé on cultive les microbes à l'abri des phagocytes. La mince paroi de collodion s'oppose au passage des cellules (microbes et phagocytes), mais permet les échanges osmotiques qui modifient la composition du milieu de culture dans

INOCULATIONS. 183 les sacs et laissent diffuers dans l'organisme animal les toxines sécrétées par les microbes. Ce procédé a reçu de nombreuses applications en technique bactériologique.

a. Préparation des sacs. — Avoir à sa disposition : du collodion non ricmé dans un flacon à large ouverture, de petits tubes de verre de 5 à 6 millimètres de diamètre intérieur, de petits bouchons coniquës en caoutchouc, un tube à essai bien calibré et sans renflement à sa partie inférieure, du fil de soie.

1° A la surface inclinée du collodion promener l'extrémité inférieure du tube à essai en lui imprimant un mouvement de rotation régulier.

2° Retirer le tube du contact du collodion, continuer à le tourner entre les doigts pendant environ une minute.

3° Plonger dans de l'eau, pendant une minute, le tube recouvert de collodion. Le sortir de l'eau, polir avec les doigts la surface du collodion, replonger dans l'eau pendant plusieurs minutes.

4° Séparer du tube le sac de collodion ; opérer lentement, commencer par dégager l'extrémité supérieure du sac avecl'ongle du pouce puis dévaginer progressivement. Distendre le sac par insufflation, le remplir d'eau ; le sac doit avoir une capacité de un à plusieurs centimètres cubes.

5° Sur l'orifice du sac, coupé perpendiculairement à l'axe, fixer un petit tube de verre par une ligature serrée à la soie. Mettre dans un flacon bouché à l'ouate les sacs ainsi préparés et les bouchons de caoutchouc. Stériliser à 115°.

6° Chaque sac est retiré du flacon avec une pince flambée et porté dans un verre stérile recouvert de papier. Aspirer l'eau du sac avec une pipette et la remplacer par un bouillon de culture ensemencé avec le microbe à étudier.

7° Fermer l'orifice du tube avec un bouchon de caoutchouc manié avec une pince flambée ; couper le bouchon au ras du tube avec un scalpel flambé. Déshydrater le bouchon à l'alcool absolu, le recouvrir de plusieurs couches de collodion.

Le sac est alors prêt pour l'inclusion dans le péritoine ; les manipulations qu'exige sa préparation sont longues et délicates et on n'arrive à obtenir un sac parfait qu'avec un peu d'habitude.

b. Inclusion dans le péritoine. — Se pratique chez le cobaye, le lapin,' le chien, le mouton, les bovidés. Ces animaux tolèrent très bien des sacs aseptiques remplis de bouillon stérile.

Au bout d'un temps variable, quelques jours à plusieurs mois, on sacrifie l'animal, relire le sac et étudie son contenu. Quand l'inclu-

sion dure plusieurs semaines, il arrive fréquemment que l'on trouve le sac rompu, aussi doit-on opérer sur plusieurs animaux pour être sûr de retrouver un sac inlacl.

L'inclusion dans le péritoine se pratique comme nous l'avons exposé plus haut (B).

Roux et Nocurd ont proposé de remplacer le sac de collodipn par un fragment de la membrane tubulaire qui tapisse la cavité centrale du roseau ; nous n'avons aucune expérience de cette façon de faire.

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