PROCÉDÉS APPLICABLES A LA GÉNÉRALITÉ DES MICROBES

a. Procédé de Weigert. — 1° Déposer sur la coupe quelques gouttes de violet de gentiane aniliné (p. 140). Laisser en contact environ trente minutes; enlever avec du papier de soie l'excès de colorant.

2° Plonger la coupe pendant quelques secondes dans un cristallisoir contenant une solution aqueuse d'acide acétique à i p. 200. .

3° Plonger la coupe dans l'eau distillée, la laver avec soin ; la reprendre sur la lame ; enlever l'excès d'eau avec du papier de soie.

4° Déshydrater très rapidement par l'alcool absolu.

5° Éclaircir avec l'essence de girofles, puis le xyloi.

6» Monter dans le baume du Canada.

b. Procédé de Lbffler. — Opérer comme précédemment en colorant la coupe (temps I) dans le bleu alcalin de Loffler (p. 140) pen-

COUPES

dant environ quinze minutes, ou la fuchsine de Ziehl (p. 139) pendant cinq à six minutes.

c. Procédé de Kuhne (I). — 1° Colorer pendant quinze minutes avec le bleu phéniqué ou le bleu ammoniacal (p. 140).

2° Porter la coupe dans l'eau distillée.

3° Porter la coupe pendant quelques secondes dans l'acide chlorhydrique dilué (p. 219).

4° Porter rapidement la coupe dans la solution lithinée (p. 21 9).

5° Reporter dans Peau distillée, laver avec soinlacoupe, la reprendre sur la lame. Enlever l'excès d'eau avec du papier de soie et laisser la coupe se dessécher, à l'air libre, presque complètement.

6° Déshydrater très rapidement par l'alcool absolu.

7° Éclaircir par l'essence de girofle et le xylol.

8° Monter dans le baume.

d. Procédé de Kûhne(li). — 1° Colorer au bleu phéniqué (p. 139) pendant environ trente minutes.

2° Laver dans l'eau distillée.

3° Traiter par l'acide chlorhydrique dilué (p. 219) jusqu'à coloration bleu pâle.

4° Laver dans la solution lithinée (p. 219)*

5° Laver plusieurs minutes dans l'eau distillée; reprendre la coupe sur la lame, enlever l'excès d'eau avec le papier de soie.

6° Déshydrater très rapidement par l'alcool absolu légèrement teinté par le bleu de méthylène.

7° Remplacer l'alcool par de l'huile d'aniline également teintée en bleu ; laisser au contact environ deux minutes.

8° Remplacer l'huile teintée par de l'huile d'aniline ordinaire; laisser en contact une à deux minutes.

9° Eclaircir par l'essence de girofle et le xylol ; remplacer deux fois le xylol pour enlever toute trace d'huile d'aniline.

10° Monter dans le baume.

Cette méthode, très laborieuse, ne colore qu'un nombre restreint de microbes ; nous ne saurions en conseiller l'emploi.

e. Procédé à lathionine. — Procédé recommandé . — 1<> Colorer avec la thionine phéniquée (p. 139), laisser en contact plusieurs minutes.

2° Porter la coupe dans l'eau distillée, la reprendre sur la lame, enlever l'excès d'eau avec le papier de soie. 3° Déshydrater très rapidement par l'alcool absolu. 4° Éclaircir par l'essence de girofle et le xylol. b° Monter dans le baume.

f. Procédé de Gram pour le bacille typhique. — 1° Colorer pendant quelques heures dans le violet de gentiane aniliné (p. 140).

Bks30ît. — Techn. microb., ï° éclit. 15

2° Laver la coupe dans l'eau distillée.

3° Placer la coupe pendant une minute dans une solution d'acide chlorhydrique à 1 p. 100.

4° Reporter la coupe dans l'eau distillée, la laver avec soin, la reprendre sur la lame, enlever l'excès d'eau.

5° Déshydrater très rapidement par l'alcool absolu.

0° Éclaircir à l'essence de girofle et au xylol.

7° Monter dans le baume.

Les bacilles restent seuls colorés.

g. Procédé au tanin de Nicolle. — Procédé recommandé. - 1° Colorer la coupe pendant deux à trois minutes au bleu de Lofflerou de Kiihne (p. 139 et 140).

2° Laver la coupe dans l'eau distillée.

3° Traiter pendant quelques secondes par une solution aqueuse de tanin à 1 p. 10.

4° Porter la coupe dans l'eau distillée, la reprendre sur la lame; essuyer l'excès d'eau.

5° Déshydrater rapidement par l'alcool absolu. 6o Éclaircir à l'essence de girofle et au xylol. 7° Monter dans le baume.