B. — DOUBLE ET TRIPLE COLORA TIONS

Procédés applicables aux microbes prenant le gram.

Quand on veut colorer une coupe où se trouvent des microbes prenant le Gram, on commence par teinter le fond (cellules animales) avec une couleur acide ayant peu d'affinité pour les microbes; puis on traite la coupe par le procédé de Gram : les seuls microbes se colorent en violet et se détachent vivement sur le fond.

La coloration du fond est obtenue à l'aide de différentes solutions.

Pour les doubles colorations on emploie l'éosine, la fluorescéine, le carmin (carmin de Orth), le vésuvine, l'hématoxyline de Bœhmer, le jaune auranlia, l'hématéine, etc.

La triple coloration utilise une solution colorante à élections, teintant différemment les divers tissus; on peut ainsi étudier les lésions liées à la présence des microbes dans les organes ; on emploie d'ordinaire le picrocarmin de Orth ou l'hématoxyline alliée au jaune aurantia, à l'éosine, etc. Voici les formules des colorants de fond les plus usités :

COUPES

Solution aqueuse faible d'éosine.

Éosine soluble à l'eau Ob'.SO

Eau distillée 300 à 400 centimètres cubes.

Filtrer.

On préparerait de même les solutions de fluorescéine, de vésuvine, de jaune aurantia, etc.

Hématoxyline de Bœhmer.

Préparer les deux solutions suivantes :

a. Hématoxyline cristallisée. .. . 1 gramme.

Alcool absolu 10 centimètres cubes.

Placer dans un flacon bien bouché.