‹ Technique microbiologie et sérothérapique (microbes pathogènes de l'homme et des animaux)Chapitre 194 sur 350 · CHAPITRE V · texte numérisé non relu

CHAPITRE V

Le Bacille du choléra des poules, entrevu par Moritz, Perroncilo, Toussaint, a été décrit par Pasteur.

Le choléra des poules (septicémie, peste ou typhus des volailles) fait de grands ravages dans les basses- cours, sévissant sur les gallinacées (poules, faisans, pintades, dindons et pigeons) et les palmipèdes (canards, oies). Le lapin, bien qu'extrêmement réceptif, est assez rarement atteint par l'épizootie.

La marche de la maladie peut être rapide, foudroyante, mais d'ordinaire l'évolution est plus lente, les animaux succombent au bout de cinq à sept jours après avoir présenté de la tristesse, de la somnolence et de la diarrhée souvent sanguinolente ; la poule malade ne mange pas, a les ailes pendantes, les plumes ternes et hérissées, la crête noire. Vers la fin de l'épidémie, les cas deviennent moins graves et quelques animaux guérissent.

Les animaux s'infectent par les voies digestives en picorant sur le sol les aliments souillés par les déjections des sujets malades. Le bacille se rencontre dans le sang, les pulpes d'organes et le contenu intestinal.

Article 1. — MALADIE EXPÉRIMENTALE.

§ 1«. — ANIMAUX RÉCEPTIFS.

Tous les oiseaux et en particulier les petits oiseaux (moineaux, etc.) sont très sensibles au virus du choléra des poules ; ils prennent la maladie soit par injection sous-cutanée, intrapéritonéale ou intraveineuse, soit par ingestion.

Le lapin est éminemment réceptif ; il succombe rapidement sans avoir le temps de présenter de la diarrhée, bien qu'à l'autopsie on trouve l'intestin rempli de matières liquides (ce fait explique la rareté de l'épizootie chez les lapins, les excréments étant le véhicule ordinaire du contage) ; le ventre se ballonne, le sang est noir, dissous, on observe de nombreuses suffusions sanguines et une pleurésie double.

La souris, le rat sont très réceptifs. Parmi les rongeurs sensibles

il faut encore citer le spermophile ; à l'instigation de Metchnikoft on a pu, avec le Bacille du choléra des poules, provoquer de véritables épidémies parmi ces animaux et en délivrer en partie la Russie méridionale qui en est infestée.

Le cobaye est assez résistant. L'inoculation d'une dose moyenne de culture virulente dans le tissu conjonclif n'entraîne pas la mort de cet animal et produit simplement un abcès à pus peu riche en microbes, mais virulent pour la poule ; cependant, le cobaye succombe à l'injection intrapéritonéule d'une culture virulente.

Le chien, le chat, l'homme ne sont pas réceptifs.

1° Injection. — Avec les précautions ordinaires, injecter sous la peau, dans le péritoine ou dans le muscle pectoral des oiseaux, quelques gouttes d'une culture âgée de vingt à vingt-quatre heures ou de sang d'un animal récemment mort du choléra des poules.

2° Ingestion. — Arroser les aliments avec une culture virulente ou faire ingérer la culture suivant les procédés décrits page 188.

Nous décrirons ces symptômes chez la poule, animal le plus fréquemment utilisé; nous avons signalé plus haut les particularités propres au lapin.

Quelques gouttes d'une culture virulente tuent la poule en douze à vingt heures. Dans les cas foudroyants, les symptômes sont à peu près nuls ; si la survie est suffisante, on observe les mêmes troubles que dans la maladie spontanée : l'animal est chancelant, il se met en boule, les plumes se hérissent, la crête est noire, puis apparaît la diarrhée muqueuse ou sanguinolente en même temps que du jetage ; la poule tombe dans la somnolence et le coma et succombe après quelques secousses convulsives.

A Y autopsie, on constate au point d'inoculation une très petite quantité d'un œdème sanguinolent, riche en microbes. Si le virus inoculé était peu actif, l'œdème est plus marqué, et quand la maladie dure plusieurs jours, l'infiltration est gélatiniforme, la partie du pectoral avoisinant le point d'inoculation est tuméfiée, jaunâtre et peut même avoir un aspect lardacé : on se trouve en présence d'une véritable nécrose. Le sang est noir, se coagule mal, présente l'aspect du sang dissous et renferme en abondance le bacille pathogène. Le ti^su cellulaire sous-cutané, les séreuses, le cerveau, les poumons

présentent des suflusions sanguines; les poumon.s contiennent des noyaux d'infiltration, le foie est volumineux, jaunâtre, friable, la rate est tuméfiée, ramollie; cependant ces dernières lésions ne sont pas constantes. Le péricarde renferme une sérosité limpide, parfois rosée ou gélatiniforme. Le même épanchement se rencontre dans les plèvres du lapin (la cavité pleurale n'existe pas chez les oiseaux). Les muscles, le cœur ne sont altérés que si la maladie a duré plusieurs jours: ils sont alors ramollis, jaunâtres, feuille morte. L'intestin présente des lésions d'entérite, la muqueuse a la teinte hortensia et est ulcérée de-ci, de-là ; le contenu intestinal est diarrhéique, quelquefois hémorragique. Suivant la règle générale, les lésions sont d'autant plus accentuées que la survie a été plus longue.

< >n recherchera le bacille dans le sang, dans la pulpe des différents organes et dans le contenu intestinal.

a. Examen microscopique. — Faire des lamelles avec le sang, des frottis avec les pulpes d'organes, le contenu du tube intestinal. On y recherchera le bacille par les procédés décrits plus loin. Les coupes des viscères (foie, rate, poumons) sont particulièrement intéressantes et montrent les capillaires gorgés de bacilles.

b. Cultures. — Dans des tubes de bouillon ordinaire, ou mieux de bouillon de poule, on ensemence une gouttelette de sang du cœur ou une ose de pulpe de rate ou de foie.

Au moment de l'autopsie, ou peut recueillir et conserver une petite provision de sang qui servira à ensemencer des cultures ultérieures. Pour cela, eu suivant les règles ordinaires, on aspire le sang dans une pipette pareille à celle de la figure 72 ; la pipette pleine, ou la ferme par deux traits de chalumeau, à l'extrémité d'abord, puis au point rétréci a. Le contenu de l'ampoule ensemencé, même après plusieurs mois, donne une culture virulente.

c. Inoculations. — Se pratiquent de préférence chez la poule ou le lapin avec un peu de sang du cœur, de pulpe de rate, ou mieux quelques gouttes de la culture récente en bouillon de poule.

Article IL — CARACTÈRES MORPHOLOGIQUES.

§ 1e'. - ASPECT MICROSCOPIQUE.

Le microbe du choléra des poules est un très petit bacille ou plutôt un coccobacille dont la longueur n'excède pas 0,5 à 1,2b [x et la largeur 0,25 à 0,40 <x. Non coloré, il apparaît comme de petits

Fig. 147. — Bacille du choléra des poules. — Culture en bouillon. — Thiouinc pliéniquée (Reich.; Obj. 1/12 im. ; Oc. II).

points plus ou moins allongés, réfringents à leur partie centrale, souvent associés par deux, animés de mouvements browniens. Mais

il doit être étudié de préférence sur les préparations colorées ; on voit alors nettement sa forme ovoïde ; on constate que ses extrémités sont arrondies ; quand la coloration est peu intense, on remarque au centre des microbes un petit espace clair, réfringent. Si la multiplication du bacille a été rapide, et dans les cultures jeunes, les formes arrondies dominent; dans les cultures plus âgées on trouve surtout des formes allongées.

Le Bacille du choléra des poules ne forme pas de spores.

Coloration. — Le Bacille du choléra des poules se colore aisément par les solutions ordinaires. Le bleu phéniqué de Kùhne et la

thionine phéniquée sont ses colorants d'élection. U ne prend pas le Gram.

a. Cultures. — Colorer avec la thionine phéniquée, le bleu phéniqué de Kùhne, ou la solution de Ziehl diluée.

b. Frottis, lamelles de sang.

— 1° Coloration simple. — Paire agir quelques minutes le bleu ou la thionine phéniqués, laver, sécher et monter ; les globules blancs, les noyaux des globules rouges des oiseaux et les bacilles sont colorés en bleu ou en violet intenses.

2° Double coloration. — Déposer sur la lamelle de sang un peu de solution aqueuse à 1 p. 100 d'éosine; après deux à trois minutes de

Fig. 148. — Bacille du choléra des poules. — Sang de poule. — Éosine et bleu phéniqué (Reich. ; Obj. 1/12 im.; Oc. II).

contact laver, passer au bleu phéniqué, laver, sécher et monter. On obtient ainsi de fort belles préparations : les globules rouges sont teintés par l'éosine, les noyaux et les microbes sont colorés par le bleu (fig. 148); malheureusement l'opération est assez délicate à conduire, il faut surveiller avec soin, sous le microscope, l'action du bleu et l'arrêter dès que la différenciation est obtenue. Le procédé de Chenzinsky donne des résultats moins satisfaisants.

c. Coupes. — Employer le procédé de Nicolle au tanin (Voy. p. 226).

Conditions de culture. — Le Bacille du choléra des poules est strictement aérobie. Jl se développe mal entre +20° et 25°; les cultures sur gélatine restent grêles et se produisent lentement. La température optima de culture est comprise entre 35° et 39°. Les milieux les plus favorables sont le bouillon de poule ou de veau, neutres ou légèrement alcalins

Bouillon. — A 37°, en bouillon de poule, la culture se développe rapidement : dès la dixième ou douzième heure apparaît un léger trouble ; ce trouble augmente dans le cours de la journée, puis le liquide s'éclaircit et il se forme un sédiment peu abondant ; le développement s'arrête du quatrième au huitième jour.

C'est vers la dix-huitième ou la vingt-quatrième heure que la culture présente son maximum de virulence ; à ce moment les formes rondes dominent, plus tard les formes longues l'emportent. Quand la culture est arrêtée, le sédiment est constitué par des granulations dont l'aspect ne rappelle plus celui des microbes mais qui sont encore aptes pendant quelque temps à donner par ensemencement en bouillon neuf une culture virulente.

Gélose. — Le développement se fait rapidement à 37°, on obtient une strie mince, blanche et brillante, plus épaisse au centre que sur les bords.

Sérum coagulé. — Même aspect que sur gélose.

Gélatine. — Développement lent, culture minime, à 22°-23°.

La piqûre donne une mince ligne blanche s'étalant un peu en clou à la surface, très peu développée à la profondeur. En strie, l'ensemencement produit une très mince raie blanchâtre, parais-

Fig. 119. — Choléra des poules. — Piqûre en gélatine (6e jour).

sant bleue par trunsparence. Lu gélatine n'est pas liquéfiée. Pomme de terre ; eau de levure. — Pas de développement.

Article III. — PROPRIÉTÉS BIOLOGIQUES.

S 1°r. — VITALITÉ ET VIRULENCE.

Le Bacille du choléra des poules est très fragile, il périt rapidement dans les cultures. La dessiccation, une température de + les solutions antiseptiques ou acides très diluées le tuent aisément.

Les cultures en milieux liquides résistent plus longtemps que celles sur milieux solides ; néanmoins une culture en bouillon perd rapidement sa virulence, la vitalité disparaît au bout de six semaines à deux mois. L'atténuation est due à l'action de l'oxygène de l'air; nous avons vu plus haut que le sang conservait longtemps sa virulence dans des ampoules scellées ; de même on peut conserver des cultures virulentes en scellant dans des ampoules des cultures en bouillon âgées de dix-huit à vingt heures.

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