LE BACILLE DU PUS BLEU

L'agent des suppurations bleues a été découvert par Gessard.

Les suppurations bleues, très fréquentes avant l'antisepsie, sont plus rares aujourd'hui ; toujours le Bacille pyocyanique se trouve associé dans le pus bleu aux microbes ordinaires de la suppuration; sa présence constitue simplement une complication des plaies, complication d'ailleurs peu grave.

Le Bacille pyocyanique est capable d'envahir l'organisme humain quand une maladie préexistante lui ouvre une porte d'entrée; c'est ainsi qu'on l'a rencontré dans les organes d'un homme atteint de fièvre typhoïde ; Calmette l'a trouvé dans le sang de sujets atteints de dysenterie chronique; on connaît une vingtaine d'observations d'infections généralisées à Bacille pyocyanique (Ehlens, Neumann, Karlinsky, OEttinger, Schimmelsbuch, Kossel, Lartigau).

On trouve quelquefois le Bacille pyocyanique dans le sol, les eaux ; Besson a signalé sa présence presque constante dans les eaux de la régence de Tunis, région où les suppurations bleues sont très fréquentes.

Article ï. — MALADIE PYOCYANIQUE EXPÉRIMENTALE. § 1er. — ANIMAUX RÉCEPTIFS.

Le cobaye, le rat, la souris sont très réceptifs vis-à-vis du Bacille de Gessard ; ils succombent à l'inoculation sous-cutanée de petites doses de cultures en bouillon.

Le lapin est plus résistant ; il ne succombe pas d'ordinaire après l'inoculation sous-cutanée ; l'inoculation ;ntrapéritonéale donne des résultats inconstants, mais l'injection intraveineuse de 1 centimètre cube de culture amène la mort en vingt-quatre à quarante-huit heures. Les inoculations en série chez le lapin exaltent la virulence du microbe, si bien qu'après quelques passages on obtient un bacille tuant rapidement à la dose de 0co,l de culture en bouillon.

MALADIE PYOCYANIQUE EXPÉRIMENTALE.

Quand on injecte à un lapin 1 centimètre cube de culture en bouillon dans la veine de l'oreille, l'animal fait une maladie aiguë, il présente de la fièvre, de l'albuminurie, de la diarrhée ; les microbes sont peu abondants dans le sang, mais très nombreux dans les reins.

L'inoculation de doses plus faibles de culture confère au lapin une maladie chronique caractérisée par de l'amaigrissement et des paralysies des membres, accompagnées de contractures. L'animal peut guérir; quand la mort survient, il n'est pas rare de trouver à l'autopsie une véritable néphrite avec petit rein contracté et même de l'hypertrophie du ventricule gauche du cœur. Dans certains cas, on trouve une dégénérescence amyloïde des reins, des infarctus des muqueuses digestives (Charrinj.

L'inoculation sous-cutanée, chez le cobaye, produit une tuméfaction locale suivie d'une ulcération, puis le bacille se généralise et la mort survient. L'inoculation intrapéritonéale est plus sévère, la mort est rapide et le sang renferme le bacille.

Un bacille que nous avons isolé de l'eau tuait le rat blanc en vingt à trente-six heures à la dose de 0CC,20 inoculée sous la peau; à l'autopsie, les organes abdominaux étaient fortement congestionnés, le péritoine contenait un peu de sérosité à peine louche et l'intestin présentait de nombreuses plaques de Peyer en voie d'ulcération ; deux fois les animaux ont eu des hématuries ; le bacille existait dans le sang, le foie, la rate, les reins, le liquide péritonéal, le contenu intestinal, etc. ; chez les deux rats ayant présenté des hématuries, le bacille existait dans l'urine recueillie dans la vessie.

La présence du Bacille pyocyanique dans le pus est signalée par la teinte bleuâtre que prennent les linges de pansement et par l'odeur caractéristique que répandent les plaies.

Dans le pus, on cherchera le bacille au moyen de l'examen microscopique de lamelles colorées au violet de gentiane ou à la thionine ; de plus, on fera des isolements sur plaques de gélatine avec un peu de pus; les colonies du Bacille de Gessard se reconnaîtront facilement à leur aspect.

L'inoculation sera pratiquée dans le péritoine du cobaye.

Dans l'eau, Besson a isolé facilement le Bacille pyocyanique en ensemençant une certaine quantité du liquide dans le milieu gélo-pepto-sel de

U<: HACILL K DU PUS HLEU.

.Metchnikolï ; dès qu'un voile s'est formé (douzième-quinzième heure), ou fait un second passage. Une trace du deuxième voile sert à ensemencer des plaques de gélatine où l'on isole facilement le microbe.

Article 11.— CARACTÈRES MORPHOLOGIQUES, S 1 — ASPECT MICROSCOPIQUE.

Le Bacille pyocyanique se présente sous la forme d'un petit bâtonnet mince, à extrémités arrondies, de dimensions assez variables et

Fig. 172. — Forme normale dans le bouillon de bœuf.

Fig. 173. — Culture dans du bouillon additionné de 0er,02 p. 100 de naphtol, aprèsquaranle-huil heures.

Fig. 174. — Culture dans du bouilloa additionné de 4 p. 100 d'alcool, après vingt-quatre heures.

Fig. 175. — Culture dans du bouillon additionné Fig. 176. — Culture dans du bouillon 100 de bichromate de potasse, additionné de 0er,0C p. 1 00 d'acide

borique, après quarante-huit heures.

de 0sr,01o p.

après quinze heures.

Fig. 177. — Culture dans du bouillon additionné de 0sr,70 p. 100 d'acide borique, après six jours.

Fig. 172 à 178. — Formes diverses que prend le Bacille du pus bleu dans les cultures auxquelles on ajoute des antiseptiques. (D'après Guignard et Charria.)

• * • * Il

Fig. 178. — Culture âgée do quelques semaines dans du bouillon additionné de Obi-, 10 p. 100 de créosote.

mobile ; sa longueur moyenne est de 1 <x, t> environ, sa largeur de 0,5 à 0,0 [*.

GHOOL OF MFDICIN

CARACTERES ftfbfNPVEPTO J y Qp L@g;"

Coloration. — Le Bacille pyocyanique se colore aisément par les couleurs basiques d'aniline; il prend le Gram.

Variations morphologiques. — L'aspect du Bacille pyocyanique est susceptible de se modifier considérablement quand on ensemence le microbe dans des milieux additionnés de faibles doses de substances antiseptiques (Guignard et Charrin) ; c'est ainsi que dans du bouillon contenant 0,02 p. 100 d'acide phénique, le bacille prend une forme longue, filamenteuse; l'addition d'alcool, de bichromate de potasse agit de même; dans le bouillon additionné d'acide borique, le bacille prend une forme spirillaire ; dans un milieu créosoté, il a l'aspect de coccus.

Conditions de culture. — Le Bacille de Gessard est facultativement anaérobie, mais il ne fabrique de la matière colorante qu'au

Fig. 179. — Bacille pyocyanique. — Culture en bouillon, premier jour.

Fig. 180. — Bacille pyocyanique. — Culture en bouillon, troisième jour. .

Fig. 181. — Bacille pyocyanique. — Culture en bouil- • Ion, septième jour.

contact de l'air. 11 cultive entre + 15" et 43° ; la température optima est comprise entre 35° et 37°.

LE HAC1LLE DU PUS HLliU.

Bouillon. — A 37°, trouble dès la huitième heure, puis apparition d'une teinte verdàtre fluorescente. Les jours suivants il se forme un voile blanc ridé à la surface du bouillon ; ce voile épaissit, devient sec, brunâtre et tombe au fond du tube où il se forme un dépôt blanc sale ; le bouillon prend alors une teinte vert foncé, puis brunâtre. La culture est visqueuse, filante et répand une odeur caractéristique.

Gélatine. — Piqûre. — Dès le deuxième jour' à 20°, il se forme de petites colonies le long de la piqûre ; ces colonies confluent, donnent une strie blanche et, vers le troisième jour, apparaît une cupule de liquéfaction (liquéfaction en verre à Champagne) ; la liquéfaction s'étend rapidement jusqu'aux parois du tube ; le milieu se colore en vert .

Colonies isolées. — Dès le deuxième jour apparaissent sur les plaques de petites colonies jaunâtres, granuleuses ; ces colonies liquéfient rapidement autour d'elles, et la liquéfaction envahit la totalité de la plaque. La gélatine prend une teinte verte.

Gélose. — Dès le premier jour à 37°, apparition d'une strie verdàtre qui envahit rapidement la surface de la gélose ; la gélose prend une teinte verte fluorescente.

Pomme de terre. — Le long de la strie d'inoculation, se développe un enduit épais, coloré en brun ; si on racle cet enduit, la partie de la pomme de terre sous-jacente verdit au contact de l'air.

Article III. — PROPRIÉTÉS RIOLOGIQUES.

§ PIGMENTS (Gessard).

Quand on agite une culture en bouillon avec du chloroforme et qu'on abandonne un instant le tube au repos, il se forme à la partie inférieure une couche chloroformique teintée en bleu pur, tandis qu'il surnage un liquide aqueux d'un beau vert fluorescent.

Le Bacille pyocyanique sécrète en effet deux pigments, Tun bleu, la pyocyanine ; l'autre vert fluorescent. Au contact de l'air, la pyocyanine s'oxyde et donne une matière brune, \a,pyoxanthose.

On peut faire varier à volonté la production de la pyocyanine et de la matière verte en ensemençant le bacille sur différents milieux de culture.

Nous venons de dire qu'en bouillon le bacille sécrète de la pyocyanine et de Ja matière verte. Dans une-solution de peptone, Gessard a vu le bacille se développer sans produire de matière verte, la culture avait une belle teinte bleue : ce phénomène ne se produit pas avec toutes les peptones ; de même, sur gélose pepto-glycérinée, la production de pyocyanine est consi-

PROPRIÉTÉS BIOLOGIQUES

dérablement accrue. La pyocyanine se produit seule dans une solution de gélatine à 10 p. 100 additionnée d'un peu de glycérine et maintenue à 35°. ° Au contraire, dans un milieu contenant 2 p. 100 de glucose, la matière verte se produit seule; il en est de même sur l'albumine de l'œuf. L'addition au bouillon de 5 à 6 p. 100 de glucose fait cesser la production de matière colorante. La culture en sérum d'animauximmunisés a le même effet.

Gessard est arrivé à créer des bacilles donnant, les uns de la matière verte, les autres de la pyocyanine. Wasserzug, en cultivant le bacille sur des milieux légèrement acides, lui a fait perdre, d'une façon définitive, la propriété de fabriquer des pigments ; Charrin est -arrivé au même résultat par des cultures en série dans du bouillon à 42°.

La pyocyanine s'obtient facilement en épuisant par le chloroforme une culture en bouillon ou sur gélose ; dans ce dernier cas, il suffit de laisser le chloroforme en contact avec la culture pendant quelques heures sans agitation. Le chloroforme prend une teinte bleue et par évaporation abandonne la pyocyanine sous forme de longues aiguilles bleues. Les solutions de pyocyanine sont virées au rouge par les acides faibles et se recolorent en bleu sous l'influence des alcalis. Les cultures en bouillon et en solution de peptone filtrées sur la bougie Chamberland gardent leur coloration. La pyocyanine n'est pas toxique.

Les cultures filtrées du Bacille pyocyanique injectées au lapin en quantité suffisante amènent la mort de cet animal avec tous les symptômes de la maladie pyocyanique expérimentale aiguë, ou déterminent une cachexie s'accompagnant de paralysies et aboutissant parfois à la mort. En stérilisant par le toluol des cultures ayant séjourné quarante jours à l'étuve, Wassermann a obtenu une toxine tuant le cobaye à la dose de 0ccm,5 injecté dans le péritoine.

La toxicité des cultures n'est pas due à la pyocyanine, mais à un certain nombre d'autres substances. De ces substances, les unes sont volatiles, facilement altérables et n'ont qu'une action passagère. Les autres, non volatiles , se divisent en deux groupes : celles du premier groupe, les plus actives, sont précipitables par l'alcool, celles du second groupe sont solubles dans l'alcool (Arnaud et Charrin).