RECHERCHE DU BACILLE TYPHIQUE DANS L'ORGANISME

On recherche le Bacille typhique dans l'organisme des malades atteints de fièvre typhoïde et le cadavre des individus ou animaux ayant succombé à l'infection.

Fréquemment aussi on se propose de déceler le Bacille d'Eberth dans les eaux, les poussières, les matières fécales, etc. Ces deux sortes de recherches

sont très différentes; quand le Bacille typhique se trouve à l'état pur dans une humeur, un organe, la recherche en est aisée ; il en est tout autrement quand le Bacille typhique est associé à d'autres germes et particulièrement au Bacterium coli.

Nous étudierons dans un chapitre spécial les procédés de recherche du Bacille typhique dans l'eau, les fèces, etc. (Voy. p. 453); pour le moment nous n'envisagerons que le cas le plus simple, celui où le Bacille typhique est présumé existera l'état pur dans une humeur ou un organe.

1° Examen microscopique. — Porte sur la pulpe splénique recueillie sur le cadavre, les fragments de divers viscères, le pus des suppurations typhoïdiques, les exsudats de la maladie expéri- * mentale, etc. Il ne permet en aucun cas de poser un diagnostic ferme.

a. Lamelles et frottis. — Seront colorés au bleu de méthylène ou à la thionine phéniqués. Faire l'épreuve du Gram qui devra rester négative.

Les frottis de rate contiennent souvent peu de bacilles ; pour obtenir de belles préparations, on peut, après avoir lavé la rate entière avec la solution de sublimé au millième, l'envelopper dans un linge imbibé de la même solution et la placer pendant vingt-quatre heures à l'étuve à 37° (Corail) ou aspirer de la pulpe splénique dans des pipettes Pasteur qui sont également mises à l'étuve (Gasser).

Les frottis préparés avec la rate ainsi traitée sont très riches en bacilles. Gasser conseille de les colorer d'abord par le Gram, puis de faire agir la fuchsine de Ziehl diluée : les bacilles typhiques et le fond sont colorés en rouge ; s'il existe en même temps des microbes prenant le Grain, ils sont colorés en violet.

b. Coupes. — Les organes fixés à l'alcool ou au sublimé acide sont inclus dans la paraffine. Les coupes sont colorées par les procédés applicables aux microbes ne prenant pas le Gram, et de préférence par le procédé de Nicolle au tannin (Voy. p. 226).

2° Cultures. — Ensemencer en bouillon, sur gélose et sur plaques de gélatine (isolement) la pulpe splénique, les exsudats, les produits de la ponction de l'amygdale, de la rate, l'urine recueillie aseptiquement, etc. Pour la recherche dans les crachats, il est d'ordinaire indispensable de pratiquer l'isolement par un des procédés exposés au chapitre XXL

On fera subir aux cultures toutes les épreuves que nous indiquons page 460 pour identifier le Bacille typhique.

Article IL — CARACTÈRES MORPHOLOGIQUES.

§ 1", — ASPECT MICROSCOPIQUE

Le Bacille typhique se présente dans l'organisme sous l'aspect de petits bâtonnets ayant en moyenne 2 à 3 [i de longueur et 0,6 à 0,7 [x

de largeur; mais ses dimensions varient beaucoup dans les cultures.

Dans le bouillon, le bacille est plus grêle et plus court; dans les vieilles cultures sur gélatine, il s'allonge et donne des formes filamenteuses ; sur gélose et sur pomme de terre, son diamètre transversal augmente aux dépens du diamètre longitudinal et il prend un aspect trapu.

Les bâtonnets sont isolés ou réunis par deux; dans les jeunes cultures ils prennent fréquemment l'aspect de diplocoques.

Les extrémités du Bacille typhique sont arrondies ; son protoplasma est homogène ; parfois cependant, dans les cultures anciennes, on voit, après , coloration, des bacilles légèrement renflés vers le centre et présentant à ce niveau un espace clair plusou moins étendu, c'est la forme en navette décrite par Artaud. Cet espace clair dépend d'une dégénérescence partielle du bacille; il ne correspond pas à une spore, pas Fig. 202. - Bacille typhique.— Culture en pius d'ailleurs que les renfle-

ijouillon. — Thionine phéniquée (Reich. ; , , n i

Obj. 1/12 imm.; Oc. il). ments terminaux que 1 on ob-

serve dans certaines cultures (Gaffki, Chantemesse et Widal) et qui ne sont que des formes de dégénérescence.

En règle, le Bacille typhique est très mobile, il se déplace rapidement dans le champ du microscope par des mouvements rappelant ceux du poisson dans l'eau, mais il existe des races de Bacilles typhiques qui présentent une mobilité très atténuée. Les mouvements sont dus à des cils vibratiles (Voy. plus loin).

Quand on porte avec une ose une trace d'une culture sur milieux solides dans une goutte d'eau, cette culture s'y dissocie très rapidement et la goutte d'eau louchit instantanément (Chantemesse).

Coloration. — Le Bacille d'Eberth se colore aisément par les couleurs basiques d'aniline ; il ne prend pas le Gram. Pour la coloration des coupes et des frottis, tous les procédés applicables aux microbes ne prenant pas le Gram peuvent être utilisés ; nous recommandons le procédé de Nicolle au tannin.

Coloration des cils. — Les cils du Bacille d'Eberth se colorent aisément à l'aide d'une des méthodes spéciales que nous avons exposées dans la première partie de cet ouvrage (ch. IX), mais les

meilleurs résultats seront obtenus avec le procédé de Van Ermengen que nous préférons à tout autre, ou encore avec le procédé de Nicolle.

Sur les préparations colorées on se rend compte aisément du nombre et de la disposition des cils. Chaque bacille possède en général huit à douze cils, mais il n'est pas rare de rencontrer des individus porteurs de dixhuità vingt-quatre flagella; dans les préparations on voit toujours des cils isolés qui ont été séparés des bacilles pendant les manipulations.

Le mode d'implantation des flagella est régulier ; ils sont répartis sur toute la surface du bacille ; rarement ils sont disposés en bouquets, encore cet aspect dépend-il probablement d'un phénomène d'entraînement par le liquide ambiant.

Souvent les bacilles sont réunis en amas et agglutinés entre eux par une gangue qui présente la même coloration que les cils eux-mêmes ; c'est sur cette gangue que paraissent s'implanter les cils.

La longueur des cils est variable ; Remy et Sugg leur attribuent en moyenne 6 à 8 [x, mais on trouve des cils beaucoup plus longs.

Les cils sont flexueux et présentent trois à huit ondulations.

Fig.203.— Cils du Bacille d'Ebôrth.— Méthode de coloration de Nicolle (Reich. ; Obj. 1/12 imm.; Oc. IV).

Conditions de culture. — Le Bacille d'Eberth est facultativement aérobie, il cultive sur tous les milieux ordinairement employés. 11 se développe à de très basses températures : la culture commence d'après Seitz à -+- 4°. La température optima est comprise entre 30° et 37°, mais le développement se produit jusqu'à 46° (Rodet et G. Roux). Les cultures ne répandent aucune odeur.

Bouillon. — A 37°, dès la huitième ou douzième heure le bouillon présente un léger trouble qui s'accentue par la suite ; la culture prend alors un aspect caractéristique: en l'examinant par transparence on voit à l'intérieur du bouillon des ondes moirées que rend apparentes une légère agitation; puis il se forme des flocons blanchâtres qui ne tardent pas à se déposer au fond du tube en y consli-

tuant un sédiment assez abondant. A la longue le liquide s'éclaircil et prend une coloration brunâtre.

Gélatine. — Le Bacille typbique ne liquéfie pas la gélatine. Piqûre. — A 18°-20°, la culture commence dès le deuxième jour ; le long de la piqûre apparaissent de petites colonies arrondies, confluentes, blanc jaunâtre; à la surface il se forme un disque mince, transparent, à bords irisés, assez étendu, ou une tacbe épaisse, opaque, de dimensions très restreintes. La culture reste toujours grêle.

Strie sur gélatine inclinée. — Le long de la slrie apparaît un voile mince, transparent, à reflets irisés, à bords irréguliers, restant grêle et cessant de s'accroître dès la fin de la première semaine. C'est là la culture classique, mais parfois il se produit le long de la strie une bandelette étroite, opaque, blanc jaunâtre et épaisse. Il apparaît parfois dans la gélatine des cristaux allongés, simulant

des arborescences et dus à la précipitation des phosphates.

Colonies isolées. — Les colonies isolées sur plaque de gélatine présentent souvent, mais non constamment, un aspect caractéristique. Vers la quarante-huitième heure, à 20°, apparaissent de petites colonies circulaires qui ne tardent pas à acquérir le diamètre d'une tête d'épingle, mais restent toujours minces, de teinte blanc bleuâtre, nacrées, transparentes; bientôt les bords de chaque colonie se découpent, deviennent sinueux, en même temps qu'apparaissent des sillons et des crêtes qui parcourent la colonie de la périphérie au centre, lequel devient plus épais que les bords. Ces détails sont bien apparents quand on examine la colonie à la loupe, on a alors un aspect tout spécial que les auteurs allemands ont comparé à celui d'une montagne de glace. Les colonies atteignent au maximum les dimensions d'une lentille.

Les colonies développées dans la profondeur de la gélatine, et même parfois celles de la surface, ont un aspect tout autre ; elles restent régulièrement arrondies, deviennent opaques, transparentes et conservent les dimensions d'une tète d'épingle.

Gélose. Sérum solidifié. — La culture n'a rien de caractéristique; dès le premier jour, à 37°, apparaît une strie blanchâtre qui s'épaissit par la suite et prend un aspect crémeux. La culture est plus abondante sur gélose glycérinée.

Fig. 204. — Aspect d'une colonie du Bacille typhique en culture sur plaque après cinq jours. D'après une photographie 60/1.

PROPRIÉTÉS BIOLOGIQUES. 42b

Pomme de terre. — Le plus souvent le Bacille typhique donne sur pomme de terre une culture caractéristique: il ne se produit à première vue aucun développement apparent, mais en regardant à jour frisant la surface de la pomme de terre, on aperçoit le long de la strie un léger enduit humide, vernissé, rappelant le glacis de sucre que Ton met sur certains gâteaux; quelquefois la culture prend par la suite une légère teinte bistre.

Dans certains cas, au contraire, il se produit à la surface de la pomme de terre une couche bien visible d'aspect jaunâtre et quelquefois même franchement brunâtre. D'après Buchner, cet aspect des cultures s'obtiendrait à volonté en alcalinisant au préalable les pommes de terre dans une solution de carbonate de soude.

Milieu de Remy et Sugg. — Pour obvier aux inconvénients liés aux variations de la composition chimique de la pomme de terre, Remy et Sugg ont proposé un milieu artificiel dans lequel entrent les substances constituant la pomme de terre. Sur ce milieu le Bacille d'Eberth donne constamment, d'après ces auteurs, une culture caractéristique : « un enduit limité, festonné, absolument incolore ».

On obtient de la manière suivante le milieu de Remy et Sugg : 1° Préparer une solution :

Eau i 000 centimètres cubes.

Glycose 20 grammes.

Peptone 5 —

Asparagine 5 —

Acide citrique 0sr,75

Phosphate neutre de potassium. 5 grammes.

Sulfate de magnésium 2sr,50

Sulfate de potassium 2sr,50

Chlorure de sodium i«r,25

Carbonate de sodium C\S. pour alcalinité légère.

2° A 100 centimètres cubes de la solution obtenue, ajouter :

Gélatine extra 10 grammes.

Magnésie calcinée 2

Répartir en tubes, stériliser, incliner les tubes pendant le refroidissement ; pratiquer les ensemencements en strie.

Lait. — Le Bacille typhique se développe dans le lait sans jamais le coaguler.

Article 111. — PROPRIÉTÉS RIOLOGIQUES.

Les difficultés que présente la différenciation du Bacille d'Eberth et du Bacterium co/i ont rendu nécessaire l'étude approfondie de leurs propriétés biologiques, les caractères morphologiques ne pouvant fournir à eux seuls des bases solides pour la détermination.

S 1er. —

RÉACTIONS BIOCHIMIQUES.

Action sur les sucres. — Le Bacille typhique attaque sensiblement la glycose, a une faible action sur la lévulose et la galactose, mais ne fait pas fermenter la saccharose ni la lactose. Il n'exerce également aucune action fermentative vis-à-vis de la mannite.

Ces propriétés du Bacille typhique, mises en lumière de la manière suivante, fournissent des données précieuses pour le diagnostic :

a. Ensemencement dans un tube de bouillon lactose additionné d'un peu de carbonate de chaux (Voy. p. 33) : il ne se dégage jamais de bulles de gaz, quelle que soit la durée du séjour à l'étuve.

b. Ensemencement sur gélatine lactoséc ou mannitée additionnée de tournesol (Voy. p. 59) : le Bacille d'Eberth n'attaquant pas la lactose, il n'y a pas production d'acides et la gélatine garde sa teinte bleue (Voy. aussi Baclerium coli).

c. Ensemencement dans le lait : il ne se produit pas de coagulation; si l'on a ajouté au lait de la teinture de tournesol, celle-ci garde sa teinte bleue.

d. Ensemencement dans le petit-lait : la lactose n'est pas attaquée ; il peut se produire une légère acidité du milieu ; en aucun cas cette acidité ne dépasse 3 p. 100 de solution décinormale de soude.

Nous verrons que dans les mêmes conditions le Colibacille produit des réactions tout autres ; il est important de remarquer que, pour l'établissement du diagnostic, les milieux lermentescibles ne doivent jamais être à base de glycose, cette substance fermentant légèrement sous îïnfluence du Bacille d'Eberth.

Absence de production d'indol. — Le Bacille typhique ne produit jamais d'indol dans les cultures.

Recherche de l'indol. — Pour rechercher l'indol, il faut ensemencer le microbe à étudier dans une solution de peptone, et non dans le bouillon ordinaire; on utilise la solution suivante :

Répartir en tubes à raison d'environ 15 centimètres cubes par tube et stériliser à l'autoclave.

Au bout de deux à huit jours, la culture devra être soumise à une des épreuves suivantes :

a. Ajouter à un tube de culture en solution de peptone, un centimètre cube d'une solution de nitrite de potassium à 0,02 p. 100, puis lentement, un centimètre cube d'acide sulfurique chimiquement pur

Eau

Peptone Witlc ou Chapoteau . .

Chlorure de sodium

100 centimètres cubes.

3 grammes.

0sr,5 à 1 gramme.

PROPRIÉTÉS RIOLOGIQUES. 427

dilué au quart. Si la culture contient de l'indol, il se produit une teinte rose (Réaction de Salkowski) .

b. Ajouter au tube de culture 5 à 10 gouttes d'une solution de nitro-prussiate de soude à 5 p. 100, puis quelques gouttes de lessive de soude à 30 p. 100 : il se produit une coloration brune; au bout de quelques instants, faire tomber dans le tube 10 à 15 gouttes d'acide acétique cristallisable : si la culture contient de l'indol, il se développe une teinte bleue caractéristique; la teinte bleue n'apparaît souvent qu'au bout d'un certain temps (Réaction de Weyl-Legal).

c. Ajouter au tube de culture quelques gouttes d'acide acétique cristallisable, puis 2 à 3 centimètres cubes d'alcool-éther ; agiter, puis laisser reposer et décanter l'éther que l'on fait évaporer dans une petite capsule de porcelaine. Après évaporation ajouter au résidu 1 à 2 gouttes de la solution de nitrite de potassium à 0,02 p. 100 et quelques gouttes d'acide sulfurique pur. Ce procédé est très sensible, la moindre trace d'indol se révèle par une teinte rosée (Réaction de Nencki).

Cultures en milieux minéraux. — Nœgeli, Laurent, Beyerinck,Péré,Maasse,etc.,ont donné la formule d'un certain nombre de milieux minéraux sur lesquels le développement du Bacille d'Eberth est tardif et insignifiant, tandis que les bactéries voisines avec lesquelles on est exposé à le confondre y cultivent abondamment.

Il ne convient pas d'attacher une trop grande importance à ce caractère, mais il a cependant une constance suffisante pour que le développement nul ou tardif dans un des milieux indiqués par Nœgeli, Maasse, etc., constitue un bon signe d'identification du Bacille d'Eberth. On utilisera de préférence le milieu suivant (Remy et Sugg) :

Eau distillée 1 000 grammes.

Glycose 20 —

Nitrate de sodium 10 —

Phosphate neutre de potassium 1 gramme.

Sulfate de magnésium , 2 grammes.

Chlorure de calcium 1 gramme.

Inaptitude au développement sur les milieux vaccinés.

— Chantemesse et Widal ont mis en lumière une propriété curieuse du Bacille typhique : si on racle avec une ose la surface d'une culture de ce bacille sur gélatine ou gélose, de manière à débarrasser le milieu de culture des colonies qui le recouvraient, les ensemencements pratiqués sur ce milieu avec du bacille nouveau ne donnent lieu à aucun développement, la gélatine ou la gélose restent stériles, elles ont été comme vaccinées par la première culture. Malheureusement ce phénomène manque parfois et ne saurait constituer à lui seul un élément certain de diagnostic.

Cultures sur milieux coloré». — D'Abundo, Nœggerath, Casser ont insisté sur la propriété que possède le Bacille typhique de décolorer en se développant les milieux additionnés de certaines matières colorantes.

Le milieu de Nœggerath (Voy. p. 5'.)) a été recommandé par son auteur, puis par Deschamps et Grancher, pour la diagnose du Bacille typhique : sur les plaques de gélatine colorée par le liquide de Nœggerath, le Bacille typhique ensemencé en strie donne une culture violet-évêque, tandis que le milieu se décolore aux alentours.

Gasser a reconnu que le milieu de Nœggerath donne des résultats incertains et a proposé de le remplacer par la gélose fuchsinée (Voy. p. 59): sur cette gélose à 37°-39°, au bout de deux jours, la culture du Bacille d'Eherth a pris une teinte rouge, tandis que le milieu s est décoloré.

Ainsi que l'ont montré flolz, Dunbar, Remy et Sugg, etc., les résultats fournis par ces cultures ne sont pas constants et ne peuvent servir à caractériser le Bacille typhique.

Culture en bouillon arsenical. — Thoinot et G. Brouardel voient que le Bacille typhique ne se développe pas dans le bouillon contenant 0?r,02 d'acide arsénieux par litre ; au contraire, le Bacterium coli pousse dans ces conditions et même quand le bouillon contient 1 à 2 grammes d'acide arsénieux par litre.

Culture sur artichaut. — D'après Roger, le Bacille d'Eberlh ne donne, sur artichaut, aucune culture apparente et n'entraîne aucun changement de coloration du milieu; dans les mêmes conditions, le Bacterium coli donne une culture jaunâtre épaisse et colore l'artichaut en vert intense.

Technique. — Enlever les feuilles de l'artichaut, laisser le foin adhérer au fond et couper celui-ci en petits cubes à l'aide d'un couteau à lame d'argent. Introduire les cubes, le foin en haut, dans des tubes à pomme de terre dont l'ampoule inférieure contient quelques gouttes d'eau ; boucher à l'ouate. Stériliser à 115°. Ensemencer à l'union du foin et du fond.

g 2. — VARIABILITÉ DES CILS.

Remy et Sugg ont montré que l'action de la lumière solaire, des antiseptiques à petites doses, et des températures dysgénésiques était à peu près sans influence sur le nombre et la forme des cils. Quand le Bacille typhique a été cultivé pendant plusieurs semaines au contact du Bacterium coli, ses cils sont parfois difficiles à colorer (Remy).

La variabilité morphologique en ce qui concerne les cils est donc au moins très limitée ; c'est là une constatation importante en raison de ses applications au diagnostic du Bacille typhique.

PROPRIÉTÉS BIOLOGIQUES

Vitalité. — Le Bacille typhique, pris dans les cultures, succombe quand on l'expose à une température de + 60° pendant dix à vingt minutes; il résiste à des températures très basses; Prudden l'a retrouvé vivant dans un bloc de glace maintenu pendant trois mois entre — \ 0 et — \ 1° ; mais les alternatives de congélation et de liquéfaction le tuent rapidement.

. Dans l'eau le Bacille typhique conserve longtemps sa vitalité (Strauset Dubarry, Chantemesse et Widal) ; dans l'eau stérile on peut le retrouver vivant au bout de trois mois ; quand l'eau contient des microbes saprophytes, la disparition du Bacille typhique est plus rapide, mais on peut encore le retrouver après un mois (Hueppe).

Dans le sol le bacille peut rester vivant pendant cinq mois et demi (Grancher et Deschamps); la dessiccation ne le fait périr qu'après un ou deux mois (Uffelmann).

L'action de la lumière tue rapidement le Bacille typhique (Gaillard, Janowsky) : des cultures exposées au soleil, au mois de mai, ont été trouvées stériles au bout de quatre à huit heures; les rayons bleus, violets, ultra-violets agissent plus énergiquement que les rayons rouges ou infra- rouges (Vincent). Étendues et desséchées sur des morceaux de toile, les cultures sont stérilisées par une exposition de neuf à vingt-six heures aux rayons solaires (Vfncent).

Le Bacille typhique est très sensible aux antiseptiques; les solutions usuelles de sublimé, de phénol, etc., le tuent en quelques minutes.

Virulence. — A propos de la fièvre typhoïde expérimentale nous avons insisté sur la grande variabilité de la virulence du Bacille d'Kberlh et nous avons exposé les moyens qui permettent d'exalter celte virulence.

§ 4. — LA TOXINE TYPHIQUE.

Brieger a recherché le premier la présence de substances toxiques dans les cultures du Bacille d'Eberth ; il en a extrait une ptomaïnc (typhotoxine) possédant des propriétés toxiques énergiques. On sait aujourd'hui que les ptomaïncs de Brieger ne sont que les produits de décomposition des substances albuminoïdes sous l'influence des traitements chimiques que cet auteur faisait subir aux cultures.

Brieger et Fraenkel filtrent des cultures de Bacille typhique, les concentrent dans le vide au tiers de leur volume, puis les précipitent par dix fois leur volume d'alcool acidulé par quelques gouttes d'acide acétique. Le précipité obtenu est dissous dans l'eau ; la dissolution est saturée de sulfate

«W LE ItACILLE 012 LA FIÈVRE TYPHOÏDE.

d'ammoniaque et soumise à la dialyse ; il reste .sur le dialyseur une substance albuminoïde assez faiblement toxique, ac'ive surtout vis a-vis du lapin qu'elle tue eu quélques jours sans lésions appréciables.

Dans les recherches récentes on a renoncé à isoler des cultures typhjques un produit chimiquement déterminé et on a étudié la toxine brute telle qu'on la rencontre dans les bouillons où a cultivé le Bacille d'Eberth (Sanarelli, Chantemesse, Lépine et Lyonnct).

[. Toxine de Sanarelli. — Préparation. — Sanarelli utilise le virus exalté par les passages successifs dans le péritoine des cobayes (Voy. p. 418). Le bacille est ensemencé dans du bouillon glycériné à 2 p. 100; La culture est maintenue à l'étuve à 37° pendant un mois, puis on la stérilise par le chauffage et on la laisse en repos pendant huit mois à la température ordinaire; au bout de ce temps le ballon qui contient la culture est scellé à la lampe et porté pendant quelques jours à 00°. Pendant ces longues macérations la toxine contenue dans le corps des microbes diffuse dans le liquide de culture ; ce liquide décanté avec soin constitue la toxine de Sanarelli.

Action sur les animaux. — Lapin. — Cette toxine, injectée sous la peau, tue le lapin de 700 à 1 000 grammes à la dose de 10 centimètres cubes par kilogramme d'animal.

Peu après l'injection, la respiration devient plus fréquente, puis l'animal chancelle, une parésie générale se manifeste progressivement et vers la sixième ou douzième heure surviennent des accès convulsifs qui aboutissent à la mort,.

La température, qui au début s'était élevée d'un dixième de degré environ, ne tarde pas à s'abaisser au-dessous de la normale ; la mort survient en hypothermie. Les effets de la toxine varient d'un animal à l'autre, souvent la mort ne survient qu'au bout de quelques jours et est précédée d'une période cachectique (amaigrissement, diarrhée, etc.). — A l'autopsie on trouve de l'anémie des organes abdominaux; il n'existe ni congestion delà muqueuse intestinale, ni tuméfaction des plaques de Peyer.

Souris. — Elle succombe d'ordinaire à l'injection sous-cutanée de un centimètre cube de toxine; la mort arrive en quelques heure- ; à l'autopsie on constate une légère hyperémie des viscères abdominaux, de la tuméfaction de la rate et un léger épanchement stérile dans le péritoine. — L'inoculation intrapéritonéale est plus sévère ; la dose mortelle minima est alors de 0,2 centimètre cube.

Cobaye. — Le cobaye est un excellent réactif pour la toxine typhique; la dose mortelle minima est de 1,5 centimètre cube par 100 grammes du poids du corps, par la voie sous-cutanée. L'inoculation intrapéritonéale est moins sûre.

L'inoculation sous-cutanée de 4 à ;i centimètres cubes de toxine par 100 grammes du poids del'animal amène la mort en iS à 20 heures.

PROPRIÉTÉS BIOLOGIQUES

Dès le moment de l'injection, la température s'abaisse progressivement jusqu'à la mort; environ une heure après l'injection apparaît une forte mémorisation abdominale accompagnée d'une vive sensibilité douloureuse : l'animal se tient immobile, ramassé sur lui-même, il pousse des cris dès qu'on le touche; au bout de quatre à cinq heures, il est accablé, tient les yeux mi-clos et est en proie à un tremblement presque continuel; le ventre est métèorisé, très sensible ; il peut se produire de la diarrhée parfois hémorragique; enfin apparaît la paralysie, le météorisme disparaît et la mort survient.

A l'autopsie, on trouve dans la cavité péritonéale une quantité plus ou moins grande d'un exsudât riche en leucocytes et souvent trouble ; la rate est tuméfiée, congestionnée, friable ; les parois de l'intestin grêle sont dilatées, amincies et complètement infiltrées de sang; la surface de la muqueuse est rouge et les plaques lymphatiques sont infiltrées et congestionnées. L'estomac, les capsules surrénales sont le siège de congestions intenses et de taches ecchymotiques ; l'intestin est rempli par un liquide diarrhéique contenant en culture pure du Bâcler ium coli très virulent.

Singe. — Est très sensible à la toxine typhique; la marche et les lésions de l'intoxication sont les mêmes que chez le cobaye.

II. Toxine de Chantemesse. — Préparation. — Chantemesse cultive son bacille exalté dans une macération de moelle osseuse ou une solution de peptone de rate (1). Le maximum de toxicité des cultures est atteint le cinquième ou sixième jour à 37<> ; c'est à ce moment que les cultures doivent être filtrées sur porcelaine.

Propriétés. — La toxine de Chantemesse est plus active que celle de Sanarelli. Elle est très fragile; sa toxicité est diminuée par le chauffage à 100° pendant quelques minutes. L'air et la lumière l'altèrent rapidement : on ne peut la conserver qu'en tubes exactement remplis, scellés à la lampe et placés dans l'obscurité.

Un centimètre cube de toxine injecté dans le péritoine tue en douze à vingt-quatre heures 80 grammes de cobaye (6 centimètres cubes environ pour un cobaye de 500 grammes). La souris est très sensible, le lapin un peu moins que le cobaye.