‹ Technique microbiologie et sérothérapique (microbes pathogènes de l'homme et des animaux)Chapitre 291 sur 350 · CUI · texte numérisé non relu

CUI

donne fréquemment des cultures abondantes, humides et grasses

CARACTÈRES MORPHOLOGIQUES. 54d de son côté le Bacille aviaire produit parfois un enduit écailleux et sec (Nocard, Grancher, Fischel).

Bouillon glycériné. - Le bouillon glycériné ou mieux glucoseglycériné est un milieu très favorable à la culture du Bacille tuberculeux. On pratiquera les ensemencements avec les précautions suivantes : prélever avec l'use des parcelles de cultures développées sur un milieu solide, et, de préférence, au niveau de la goutte de liquide qui se trouve au fond des tubes de gélose glycérinée ; déposer ces fragments avec précaution de manière à les faire flotter à la surface du bouillon contenu dans de petits matras.

La culture se produit d'ordinaire en voile : dès le quinzième jour une auréole blanchâtre apparaît autour des fragments ensemencés; cette auréole s'étend et forme un voile mince qui recouvre toute la surface du bouillon. Ce voile, d'abord sec et fragile, s'épaissit; tantôt il reste sec, écailleux, tantôt il devient gras, plissé, humide ; il grimpe fréquemment le long des parois du matras, sur une hauteur qui peut atteindre un centimètre. Barement, le voile manque et la culture se fait sous forme d'un sédiment floconneux. Dans tous les cas le bouillon reste clair.

Bouillon de poisson glycériné. — Ce milieu a été recommandé par Martin, il se prépare de la façon suivante :

Hacher de la chair de hareng, y ajouter une fois et demie son poids d'eau, chauffer lentement et maintenir l'ébullition pendant trois quarts d'heure. Filtrer à chaud plusieurs fois sur papier Chardin; le bouillon obtenu doit être clair, y ajouter 6 p. 100 de glycérine et s assurer qu'il est neutre. Répartir et stériliser à l'autoclave.

Les caractères de la culture sont les mêmes qu'en bouillon ordinaire glycériné.

Pomme déterre. — Le Bacille de la tuberculose pousse sur pomme de terre; pour obtenir de belles cultures il faut glycériner les pommes de terre suivant le procédé de Nocard:

La pomme de terre étant découpée en fragments, placer ceux-ci dans un cristallisoir et les couvrir d'eau additionnée de 15 p. 100 de glycérine; laisser en contact deux jours à la glacière, puis placer les fragments dans des tubes de Roux et stériliser comme d'ordinaire.

Sur ce milieu, la culture apparaît vers le douzième jour; elle forme d'ordinaire un voile épais, plissé, mou, rarement sec et rugueux. Souvent la culture gagne le liquide qui s'est égoutté dans la partie inférieure du tube et elle y forme un voile : ce voile est excellent pour pratiquer les ensemencements en milieux liquides.

Article 111. — recherche du racille de KOCH.

La recherche du Bacille tuberculeux varie, quant aux détails, avec les différents tissus ou exsudats, mais dans tous les cas on dispose de deux méthodes d'investigation :

1° Examen microscopique. — Les humeurs, tissus, etc., sont soumis à la coloration par les procédés de Ziehl ou d'Ehrlich : les Bacilles tuberculeux seuls restent colorés ; en réalité deux autres microbes pourraient être confondus avec le Bacille de Koch, ce sont le Bacille de la lèpre et le Bacille du smegma. Pour le premier, nous apprendrons à le différencier au chapitre suivant. Pour le Bacille du smegma, l'erreur n'est guère à redouter, étant donné le siège spécial de cette bactérie ; en outre, le Bacille du smegma, qui résiste comme le Bacille tuberculeux à l'action des acides minéraux, se décolore rapidement quand on le soumet à l'action de l'alcool (probablement parce que l'alcool dissout les matières grasses qui l'imprègnent) ; en employant le procédé de Ziehl-Nelsen tel que nous l'avons décrit, on est à l'abri de toute confusion.

On prépare les frottis selon les méthodes ordinaires : les tissus à couper sont de préférence durcis par l'alcool absolu, le sublimé acide, ou le Flemming (Voy. p. 210).

2° Inoculations. — L'inoculation tranche en dernier ressort dans les cas fréquents où l'examen microscopique demeure négatif. On s'adresse toujours au cobaye, animal le plus réceptif. Quand il s'agit d'un produit pur (tel que : tubercule recueilli aseptiquement, pus, sérosité pleurale ou ascitique), l'inoculation peut êlre pratiquée dans le péritoine; mais quand le produit a été exposé à une cause de souillure (crachats, pus s'écoulant par une fistule, etc.), l'inoculation doit être faite sous la peau, l'inoculation intrapéritonéale entraînant dans ce cas la production d'une péritonite banale qui emporte l'animal avant le développement de l'infection tuberculeuse.

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