ENSEMENCEMENTS

4o Pendant que l'ose refroidit, saisir entre le pouce et la pulpe de l'index de la main droite le bouchon d'ouate du tube semence, enlever ce bouchon déjà dégagé en partie au temps 1. Conserver le bouchon entre le pouce et l'index.

Fig. 40. — Ensemencement en milieu liquide.

S° Introduire rapidement l'ose dans le tube sans qu'elle touche les bords de l'orifice ; le fil de platine prélève une goutte de la culture et est vivement retiré du tube (fig. 40).

Immédiatement l'orifice du tube est porté dans la flamme pour détruire les germes qui auraient pu s'y déposer pendant le prélèvement et le bouchon d'ouate est remis en place.

6° Enlever de même le bouchon d'ouate du tube à fertiliser; plonger l'ose chargée de la semence dans le bouillon et la retirer rapidement. Flamber et reboucher l'orifice, comme précédemment.

7° Avant de déposer l'ose sur la table, la porter au rouge pour détruire les germes qui y adhèrent (Bactéridie charbonneuse, dangereuse pour l'homme, dans le cas actuel).

8° S'assurer de la fixité des bouchons d'ouate; placer sur le tube ensemencé une étiquette indiquant la nature de la culture et la date de l'ensemencement.

Il est souvent plus commode de coiffer l'orifice du tube, par-dessus le bouchon d'ouate, avec un petit capuchon que l'on prépare extemporanément en enroulant autour de la partie terminale du tube une petite bandelette de papier dont on tortille le bord supérieur; on inscrit sur cette bandelette les indications précédentes (fig. 41). Ce capuchon a en outre l'avantage de protéger le bouchon d'ouate de toute souillure.

Fig. 41. — Tube de culture avec capuchon de papier.

Remarques. — Avoir soin de toujours tenir les tubes que l'on doit ouvrir, dan9 une position oblique, presque horizontale, pour y empêcher la chute des poussières atmosphériques. — Opérer très rapidement pour restreindre

Bhsson. — Techn. microbe 2« édit. 5

les chances de contamination. — Ne jamais poser sur la table les bouchons d'ouate dont la partie qui pénètre dans les tubes doit être préservée de tout contact. — Le manche de verre de l'use ne doit jamais toucher les railieux de culture.

B. Ensemencements en strie. — Nous décrirons comme type un ensemencement sur gélose inclinée :

1° Opérer comme il est dit en A en remplaçant le tube de bouillon stérile par un tube de gélose.