C. Pipette

2° Flamber et casser la pointe de la pipette, la plonger dans de la gélatine stérile et qu'on vient de porter à l'ébullilion. Aspirer la gélatine dans la pipette jusqu'à l'élranglemcnl (/. Sceller au chalumeau l'effilure et l'étranglement. Plonger le tube obtenu dans de l'eau froide pour le refroidir rapidement.

3° La solidification de la gélatine étant complète, flamber rapidement la pointe a, en casser l'extrémité avec une pince et, par l'orifice, ensemencer par piqûre avec un fil de platine fin; refermer l'effilure au chalumeau.

4° Pour ouvrir le tube, la culture étant terminée, il faut commencer par casser la pointe inférieure au-dessus d'un verre flambé. Si l'on ouvrait d'abord le tube à sa partie supérieure, par suite de la

pression des gaz dégagés par la culture, la gélatine pourrait être projetée à la face de l'opérateur.

D. Procédé par l'hydrogène flîoux). — 1» Un tube à essai contenant de la gélatine stérilisée et bouché à l'ouate est étranglé au-dessous du bouchon dans la flamme du chalumeau (et, 0g. 79j.

2° Relier, par un tube de caoutchouc, au générateur d'hydrogène, une pipette Pasteur B, coudée à angle droit au-dessous du tampon d'ouate et dont la pointe effilée puisse pénétrer aisément dans l'étranglement du tube de gélatine.

3° La gélatine étant liquéfiée au bain-marie, flamber et briser l'extrémité effilée de la pipette, puis plonger cette effilure dans la gélatine en l'insinuant entre la paroi du tube cl le tàTnpon d'ouate.

4° Faire barboter pendant plusieurs minutes l'hydrogène ; puis soulever le tube effilé et laisser circuler le courant d'hydrogène audessus de la gélatine pour empêcher l'introduction de l'air pendant qu'on solidifie le milieu par un refroidissement rapide.

S0 Soulever le tampon d'ouate et ensemencer par piqûre avec un til de platine lin, le courant d'hydrogène passant toujours.

6° L'ensemencement terminé, retirer le tube à hydrogène et sceller rapidement au chalumeau au niveau de l'étranglement a.