III. — Conduite pratique du dosage

a) Le matériel nécessaire est le suivant :

— Tubes à centrifuger munis d’un trait de jauge à 5 ou à 10 cm? pour prélèvement.

— Récipient-glacière pour transport.

— Solutions :

-- d’oxalate de. soude M/10 {1,34 g./100 cm3 H,0 dist.); — de chlorure de calcium M/40 [1,11 g. de CaCl, fondu, pour 400 cmë d’eau distillée |].

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-— Bain-marie thermostatique réglé à 40 degrés.

— Tubes à hémolyse de calibre identique à 1/10 de mm. près, nettoyés au mélange sulfo-chromique, rincés à l’eau ordinaire puis à l’eau bidistillée, séchés à l’étuve.

—— Quatre pipettes terminales de contenance 0,2 cmÿ, avec oraduations intermédiaires. |

— Chronomètre à déclenchement.

b) Le prélèvement . Du sang veineux est prélevé à la seringue et rejeté aussi dans un tube à centrifuger, jaugé, contenant la solution d’oxalate (proportion : 9 volumes de sang sur 1 volume de solution d’oxalate). Le tube est placé et transporté dans le récipient-glacière.

c) La mesure au laboratoire

Le sang à étudier est centrifugé, le plasma recueilli. Dans un tube à hémolyse, verser avec la première pipette 0,2 cm3 de plasma; avec la deuxième pipette, ajouter un volume égal de solution thromboplastique, agiter, porter au bain-marie.

Prélever 0,2 cm3 de solution calcique chaude et la rejeter rapidement en soufflant dans le tube de mesure, mais sans plonger la pipette au fond du tube ni faire de bulle. En même temps l’on déclenche le chronomètre tenu de la main gauche.

Le tube est sorti du bain-marie, agité en deux ou trois secondes pour homogénéiser, puis aussitôt replongé dans le bain-marie; il n’en sera sorti que deux ou trois secondes avant le moment de coagulation (évalué dans une mesure d'essai précédente) et manipulé exactement comme il a été décrit dans la méthode de Smith (voir page 34, mais ici la prise én miasse est encore mieux observable), le chronomètre étant stoppé-au « moment » de coagulation.

Une mesure sera faite ensuite en versant 0,05 cm3 de plasma à étudier dans un tube, puis, avec la quatrième pipette, 0,15 cm3 de plasma déprothrombiné pour compléter à 0,2. La suite est effectuée comme ci-dessus. L'on obtient le temps de dilution au 1/4,