RÉACTIONS DE DÉFENSE DE L’ORGANISME

Étude clinique et expérimentale de l’infection vaccinale ou variolique et de leur immunité. — Anticorps vaccinaux.

Comme suite aux recherches sur la variole-vaccine, faites avec MM. Kelsch, Camus et Tanon, et sur la variolisation animale avec M. Duvoir, j’ai entrepris, depuis plus d un an, avec mon interne M. Gastinel, une série de recherches cliniques et expérimentales, sur l’infection et l’immunité vaccinale ou variolique. Les recherches actuellement en cours, et qui feront l’objet de publications prochaines, ont donné des résultats que nous devons enregistrer dès maintenant, et autorisent des conclusions qui nous ont paru offrir quelque

Elles se peuvent grouper en trois chapitres principaux :

Nous avons recherché s’il nous serait possible de mettre en évidence cette immunité et sa durée, par l’étude des reactions humorales présentées par un sujet vacciné récemment ou depuis longtemps.

Nous avons tenté d’appliquer à la vaccine, maladie inlcclieiise conférant l’immunité, les procédés et recherches qui permettent de déceler les anticorps dans les différentes maladies infectieuses. Nous avons poursuivi surtout, à l’exemple de certains expérimentateurs, Casagrandi, Xyler, etc., mais en perfectionnant. nous semhle-t-il, leur technique, l’étude des anticorps vaccinaux fixant le complément, et comparativement l’étude du pouvoir virulent de sérum.

Nous voulions ainsi nous rendre compte si l’on pourrait différencier les réactions humorales traduisant l’infection vaccinale à courte évolution, de celles traduisant l’immunité.

Nous avons étudié les réactions humorales que pouvaient déterminer expérimentalement les différents mode.! d’introduction de l’antigène vaccinal, et successivement nous avons envisagé l’infection et l’immunitc consecutives aux inoculations, cutanée, sous-cutanée, endo-veineuse, digestive, péritonéale (inoculation directe — ou, par la méthode du sac de collodion). Dans chaque cas l’étude fut faite systématiquement et en série de la réaction de fixation et du pouvoir antivirulent du sérum. Nous travaillons présentement à préciser la répartition des anticorps vaccinaux dans l’organisme.

Nous avons recherché les réactions humorales des varioleux vis-à-vis du vaccin pris comme antigène, nous demandant si ces deux infections si voisines, quoique en apparence irréductibles jusqu’ici, ne pourraient présenter

des faits analogues à ceux décrits par le P' Widal et ses élèves sous le nom de co-fixation, et si bien étudiés par eux dans les mycoses.

Technique. — Après de très longues recherches préliminaires sur la préparation de l’antigène, nous avons constamment employé la pulpe fraîche recueillie au 4‘ et au 6* jour de l’éruption sur une génisse vaccinée; cette récolte nous fut chaque fois facilitée par l'extrême obligeance du D’Fasquelle, directeur de l’Institut vaccinal de la rue Ballu que nous ne saurions assez remercier. Cette pulpe doit servir dans les deux heures qui suivent la récolte; finement broyée, nous en faisions une suspension à 1 pour 100. Après séjour à la glacière, le liquide surnageant nous servait pour les réactions. Le titrage préliminaire était opéré à chaque expérience. Le dispositif de nos expériences de réaction fut celui de Wassermann au complet avec système hémolytique anti-mouton.

Résultats. — Voici brièvement résumés les résultats obtenus :

I. — a) Chez des sujets observés en pleine éruption vaccinale — ou à la période de dessiccation, ou quelques jours a quelques semaines après, nous n’avons trouvé que rarement la présence d’anticorps fixant le complément; h) si la réaction se produit, elle apparaît vers le 8', 10* jour, duré dix jours environ et s’atténue pour disparaître alors que le pouvoir virulent du sérum apparaît. Cette apparition après la réaction de fixation est fréquente; habituellement le pouvoir virulent persiste nettement après la disparition de la réaction de fixation. La dissociation de ces deux épreuves est un fait qui nous paraît devoir retenir l’attention, M. Gastinel poursuit actuellement des recherches sur les enfants primo-vaccinés.

II. — A) Vaccine cutanée. — Ces recherches ont été pratiquées principalement sur des lapins vaccinés par la méthode de Calmette et Guérin, sur deux chiens, sur un singe.

Par une réaction antérieure, nous nous assurions que le sérum des animaux en expérience ne déviait pas spontanément le complément.

A partir du 10“ jour de la vaccination dans une proportion notable, on peut observer pendant 5 ou 8 semaines au maximum, la réaction de déviation; elle disparait ensuite, le pouvoir virulicide du sérum subsistant.

B) Vaccine digestive. — Nous avons déjà observé avec M. Duvoir que la vaccine digestive déterminait une immunité manifeste. Nous avons suivi l’évolution complète de la vaccine digestive au point de vue des réactions humorales. La réaction apparaît environ 8 jours après l’inoculation, dure près de 3 semaines et disparaît alors que le sérum conserve ses propriétés bactéricides manifestes. Il nous a semblé que chez les animaux infectés par cette voie, le foie était particulièrement riche en anticorps.

G) Vaccine péritonéale. — Les animaux complètement immunisés par cette voie ont présenté une réaction de déviation plus précoce que la réaction anti-virulente de leur sérum.

D) Vaccine soœ-cutanée et endo-veineme. — Les mêmes réactions humorales s’observent et, après une durée de 15 jours à 1 mois, on observe la disparition complète des anticorps fixant le complément alors que l’immunité subsiste intégralement.

III. — En prenant comme antigène de la pulpe fraîche du vaccin, nous avons obtenu chez un varioleux, qui n’avait jamais été vacciné, une réaction typique de déviation du complément. Par contre, il nous a été impossible de dévier le complément chez les vaccinés en prenant comme antigène le matériel ■varioleux.

Nous ne voudrions tirer encore aucune conclusion définitive de ces recherches, dans lesquelles l’emploi d’une technique particulièrement délicate imposerait à lui seul des réserves. 11 nous semble cependant que les anticorps dans la vaccine apparaissent avec les mêmes caractères que dans les autres maladies infectieuses. Nos résultats se peuvent comparer avec ce que nous savons des anticorps dans la syphilis et dans la tuberculose. De même que d’après Wassermann et Bruck, Christian et Rosenblatt. les anticorps tuberculeux fixant le complément sont uniquement formés dans les tissus tuberculeux (leur apparition dans le sérum n’étant pas l’expression d’une immunité, mais un symptôme de tuberculose), de même, nous pensons que les anticorps fixant le complément vis-à-vis d’un antigène vaccinal sont symptomatiques de l’infection vaccinale; l’immunité qu’elle confère pouvant être jugée, au contraire, par le pouvoir virulicide du sérum.

Recherches snr la réaction de Wassermann dans la Scarlatine. En collaboration avec M. Bèsaro [Comptes rendus des séances de la Société de Biologie, séance du 22 février 1910).

En mai 1908, Much el Eichelbergannonçaien t qu’ils avaient trouvé au cours de la scarlatine, dans 40 pour 100 des cas examinés, une réaction de Wassermann positive. Ils obtenaient ce résultat en mélangeant au sérum de scarlatineux de l’extrait aqueux de foie syphilitique. Ces expériences furent immédiatement contrôlées, el, en Allemagne, notamment, en moins d’un an, de nombreux travaux paraissaient sur la même question. La plupart, reposant surtout sur l’emploi de l’antigène alcoolique du foie, du cœur humain ou du cœur de cobaye, n’aboutirent guère qu’à des résultats négatifs.

Avec le sérum de sujets non syphilitiques, atteints de scarlatine, observés à l’hôpital Claude-Bernard, nous avons recherché 42 fois, à l’aide d’antigènes aqueux de foie syphilitique, la réaction de Wassermann.

11 s’agissait plus particulièrement de scarlatineux atteints de troubles ou de lésions hépatiques (95 pour 100). Trois séries d’expériences témoins furent constamment pratiquées ; a) avec le sérum de sujets reconnus, après réaction antérieure, non syphilitiques; b) avec le sérum de sujets syphilitiques; c) avec le sérum de malade sans antigène (afin de voir s’il ne fixait pas à lui seul le complément). En variant, d’autre part, la quantité d’antigène suivant les tubes, nous avons compté, comme résultats absolument positifs, ceux dans lesquels l’absence d’hémolyse existait partout; comme partiellement positifs ceux où il y avait une trace d’hémolyse dans l’un des premiers tubes.

Les résultats obtenus avec une technique comparable à celle préconisée par Much et Eichelberg ont été les suivants ;

Résultats absolument positifs.,52 pour 100

Résultats partiellement positifs.52 pour 100

Résultats négatifs.16 pour 100

soit au total une proportion de 84 pour 100 de succès chez des scarlatineux reconnus non syphilitiques.

La réaction est précoce et souvent passagère, le nombre des résultats positifs paraît attribuable à ce fait qu’il s’agissait de scarlatineux avec lésions hépatiques. Il semblerait, en effet, que la réaction de Wassermann puisse être ici considérée comme re.xpfession de réactions humorales à l’égard des substances provenant d’un foie troublé fonctionnellement ou lésé. De la nature de ces substances on ne saurait rien dire, si ce n’est qu’il ne s’agit vraisemblablement pas de sels biliaires qui, nous l’avons vérifié après MM. Bar et Daunay, peuvent à eux seuls, dans certains cas, fixer le complément. Ce travail, venant à la suite des recherches que nous avons déjà exposées, tend surtout à témoigner de la fréquence de la réaction de Wassermann, chez les scarlatineux atteints de troubles ou de lésions hépatiques.

Depuis ces recherches, j’ai eu l’occasion d’observer avec mes internes, MM. Lutenbacher et Gastinel, un fait très intéressant du même ordre. Il s’agissait d’un jeune homme de 18 ans et demi, entrant à l’hôpital Claude-Bernard, pour une scarlatine grave, avec un syndrome associé d’ictère catarrhal. La réaction de Wassermann fut négative. Pendant la convalescence de cette première scarlatine, le malade eut une réitération de scarlatine typique et, cette fois, l’infection s accompagna d une poussée de congestion hépatique, réalisant les conditions dans lesquelles j’avais obtenu avec Bénard, la réaction de Wassermann. La réaction, négative la première fois, devint nettement

Heoherches sur le streptocoque de la scarlatine.

Ayant pu recueillir par hémoculture un streptocoque, chez une jeune fille atteinte de scarlatine et qui devait succomber à une péritonite purulente à streptocoques, j’ai recherché, avec mon interne Pelissier, par le procédé de déviation du complément, par le procédé des précipitines, par inoculation sur le singe, quelle était la valeur spécifique de ce streptocoque.

1° Béaction de fixation.

Technique. L’antigène utilisé fut le streptocoque récolté sur six cultures de gélose âgées de trois jours, délayé dans 15 centimètres cubes de sérum physiologique; cette émulsion fut chauffée trois quarts d heure à 56 degrés.

Par cet antigène, ont été traités 13 sérums de scarlatineux recueillis du troisième au ringt-huitième jour; pour chaque échantillon, la dose d’antigène, la quantité de sérum furent variées.

Sur ces 13 échantillons, il y eut : 3 résultats positifs (6', 8', 13'jour); 4 résultats incertains; 6 résultats négatifs. Ces faits sont à rapprocher de ceux obtenus par Besredka et Dopter, Eggers, Margoulies. Ils sont en contradiction avec les conclusions de Foix et Mallein. Ces auteurs ont eu, il est vrai, le tort d’utiliser de trop grandes quantités de sérum et, un antigène vivant recueilli sur bouillon, ce bouillon pouvant introduire des facteurs étrangers.

2* Précipitines. Sur les 13 sérums, un seul (qui était nettement hémolytique) renfermait des précipitines à l’égard de l’émulsion chauffée.

3" Inoculations au singe.

L’injection sous-cutanée à deux singes (M. Rhésus) de cultures chauffées à 56 degrés ou filtrées n’ont déterminé aucune réaction générale, aucun exanthème. Chez le singe qui reçut une culture filtrée, apparut, quelques jours après, au point inoculé, un abcès à streptocoques qui guérit rapidement.

'foutes ces recherches tendent à démontrer que le streptocoque trouvé dans la scarlatine ne présente aucune valeur spécifique à l’égard de celle-ci.

J’ai étudié également avec M. Pelissier (en raison des faits ci-dessus exposés) la réaction de fixation à l’égard d’un antigène représenté par de l’extrait de foie scarlatineux.

Technique. Le foie fut recueilli chez une enfant de sept ans, morte au dix-huitième jour de la scarlatine. Il fut lavé, broyé, séché dans le vide, additionné de 30 fois son poids d’alcool et dilué de moitié au moment de l’emploi.

Sept échantillons de sérum scarlatineux; un sérum témoin (érythème polymorphe) ont été traités par la technique de Wassermann. Les résultats ont été absoluments négatifs.

Recherches sur la cuti-réaction à la tuberculine au cours de la rougeole. En collaboration avec M. Léon Kisdberg {Comptes rendus des séances de Ut Société de Bioloaie, mai 19H.)

V. Pirquet, le premier, au cours des recherches sur son procédé de cuti-

réaction, constata, non sans surprise, qu’un enfant tuberculeux à cuti-réaction positive ne présentait plus de réaction à la tuberculine pendant toute la durée de l’infection. Le fait, vu par Preisig, fut contrôlé par d’autres observateurs. V. Pirquet rapporte, à ce propos, que la cuti-réaction est également toujours négative dans les tuberculoses très avancées ou dans les tuberculoses suraiguës.

0. Grimer, ■ récemment, se basant sur les expériences de v. Pirquet et de Lowenstem (qui montraient qu un sérum de tuberculeux avant reçu de hautes doses de tuberculine contenait de l’antituberculine et annulait ainsi l’effet de celle-ci dans la cuti-réaction), tenta de mettre en évidence cette antituberculine dans le sérum des rougeoleux. Ses deux observations furent négatives.

Au moment où une recrudescence de l’épidémie de rougeole amena, en 1909-1910, de nombreux enfants à l’hôpital Claude-Bernard, nous avons cherché à vérifier les résultats de v. Pirquet et tenté quelques expériences pour en trouver l’interprétation.

La cuti-réaction se pratiquait par scarification du bras, sur trois traits horizontaux, tracés au vaccinostyle, le trait supérieur servant de témoin. Une goutte de tuberculine au 1/10 était déposée sur les deux traits inférieurs.

Nous n’avons considéré comme positives que les réactions dans lesquelles, avec une rougeur nette, se pouvait sentir un certain degré d’induration. Les cas observés ont été au nombre de 178. Dans aucun cas, la cuti-réaction ne fut positive pendant la durée de l’éruption.

Dans 51 cas, négative pendant la rougeole, elle devint positive 5 ou 4 jours après la fin de l’éruption. Vingt fois, il s’agissait d’enfants de 1 à 10 ans, huit fois de sujets de 10 à 20 ans.

L’examen clinique témoignait en pareil cas des lésions minimes du poumon ; submatité légère du sommet, respiration rude, souffle hilaire. Dans la majorité des cas, l’examen radioscopique pratiqué par M. le D'Itist, dans le service de M. le D'Béclère, montra une ombre péribronchique caractéristique.

Trois cas sont particulièrement intéressants ;

La cuti-réaction, négative pendant la rougeole, fut positive après, chez une petite fille de 2 ans et demi, ayant une tuberculose des os du tarse, et chez une jeune fille de 23 ans atteinte de tumeur blanche du genou.

Chez une petite fille de 10 mois, entrée indemne de rougeole, avec son frère jumeau atteint de rougeole, la cuti-réaction iut positive. L’enfant prit la rougeole, la réaction devint négative, pour redevenir positive lorsqu’elle quitta l’hôpital.

Il est à remarquer que ce chiffre de 17 pour 100 do cuti-réactions positives est exactement celui obtenu par Morquio, examinant au hasard les enfants dans les écoles, et immédiatement voisin du chiffre de 16 pour 100 de Grancher, établi d’après les seules données cliniques ; ceci pour répondre à l’objection qui pourrait nous être faite, que nous n’avions pu examiner les enfants avant leur rougeole.

Nous avons recherché alors :

1“ Si le sérum de rougeoleux exercerait une action anti-tuberculinique.

2” Si le sérum de rougeoleux exercerait une action d’arrêt sur la réaction de fixation.

Des cuti-réactions ont été effectuées sur un bras avec la tuberculine simple, ou diluée de 1/2 dans l’eau physiologique; sur l’autre bras, avec la tuberculine diluée de 1/2 dans du sérum de rougeoleux, recueilli à la période d’éi'uplion, ou du sérum de scarlatineux.

a) Les cuti-réactions faites, immédiatement après le mélange (10 cas avec le sérum de rougeoleux, 5 cas avec le sérum do scarlatineux), n’ont été en rien modifiées; la réaction fut équivalente des deux côtés.

b) Les cuti-réactions ont été faites avec le mélangé tuberculine-sérum. abandonné 24 heures à la température du laboratoire, 16'-18".

La cuti-réaction faite quatre fois avec le sérum de scarlatineux fut équivalente à celle obtenue avec la tuberculine simple.

Faite six fois avec le sérum de rougeoleux, elle fut deux fois négative des deux côtés. Quatre fois positive pour le côté tuberculine diluée dans l’eau physiologique, et négative pour le côté tuberculine-sérum.

c) Les ciiti-réactioiis furent faites avec le mélange tuberculine-sérum ubandoiine a l’étuve à 37" pendant 24 heures.

Le mélange avec le sérum de scarlatineux ne modifia pas la réaction.

Le mélange avec le sérum de rougeoleux donna des résultats incertains.

Trois fois la cuti-réaction fut égale des deux côtés; six fois elle fut nettement plus forte pour le côté tuberculine diluée dans l’eau physiologique, et manifestement très faible de l’autre côté.

La seule conclusion possible est que, dans certains cas, le sérum de rougeoleux parut affaiblir l’action de la tuberculine.

Les recherches sur la réaction de fixation sont restées également incertaines.

La réaction de Bordel et Gengou fut recherchée par le procédé simplifié, en utilisant le complément du sérum du malade et la sensibilisatrice naturelle du sérum humain pour les hématies de mouton.

Après avoir vérifié que le sérum de tuberculeux était spontanément hémolytique pour les hématies du mouton et qu’en présence de tuberculine (2 gouttes de tuberculine, 2 gouttes de sérum, ramenées à 20 gouttes par dilution dans le sérum physiologique) il y avait fixation du complément et absence d’bémolyse, nous avons recberché quelle serait 1 action exercée par l’addition d’un sérum de rougeoleux (5 cas), d’un sérum de scarlatineux (2 cas), d’un sérum provenant d’un cas d’oreillons, d’un érythème toxique, d’une méningite tuberculeuse, d’une éruption pempbigoïde; en tout vingtsept épreuves.

Les résultats ont été similaires; l’adjonction d’un sérum de provenance humaine empêcha la fixation. L’hémolyse, pour être moins forte que dans le tube témoin, fut égale quelle que fut l’origine du sérum.

Recherches sur la réaction de Wassermann

Les recherches précédentes qui nous avaient permis de vérifier les données de V. Pirket sans nous permettre, malgré quelques faits intéressants, d’en donner une interprétation absolue, devaient me conduire à étudier

l’influence de la rougeole sur la syphilis en évolution. 11 n’élait. pas sans intérêt d’étudier si la rougeole, qui peut modifier in vivo la cuti-réaction à la tuberculine, ne serait pas capable de modifier m vitro l’action d’autres lysines ou sensibilisatrices, en particulier les anticorps syphilitiques.

Une malade syphilitique contractant la rougeole devait nous permettre de vérifier le fait. La réaction de Wassermann, négative au premier jour de la rougeole, redevint nettement positive quatre jours après la fin de la rougeole, et resta positive dans plusieurs examens faits ultérieurement.

11 convenait dès lors de rechercher si la disparition de la reaction de Wassermann était due à l’absence d’anticorps syphilitiques au cours de la rougeole, ou à l’existence de propriétés empêchantes du sérum de- rougeoleux vis-â-vis de la réaction de Wassermann susceptibles d’être mises en évidence in vitro.

Des expériences faites dans ce sens semblèrent plutôt favorables à cette dernière hypothèse.

A des sérums syphilitiques éprouvés donnant une réaction de Wassermann franche, nous avons ajouté du sérum de rougeoleux en proportion variable, et nous avons observé que la réaction de W’assermann devenait souvent négative.

Nous avons repris ces c.xpériences dans des conditions identiques avec un grand nombre de sérums normaux, scarlatineux, etc. Dans aucun cas (sauf pour des doses élevées de sérum), la réaction de Wassermann ne fut empêchée. De plus, les sérums de rougeoleux qui, au 6“ et 8” jour de la rougeole avaient une action empêchante, perdaient cette propriété vers le 10' ou 15' jour.

Le chauffage des sérums employés fut toujours soigneusement vérifié; des tubes témoins renfermant les plus fortes doses emplovees. ne contenaient pas traces d’alexine.

Le sérum de la syphilitique atteinte de rougeole n’a possédé à aucun moment d’hémolysine anti-mouton se rapprochant ainsi de ce que l’un de nous a observé souvent pour les sérums de syphilitiques.

Le titrage des sensibilisatrices anti-mouton nous a montré, par contre, que dans la rougeole, les hémolysines semblent augmentées. Mais ce fait ne peut en rien expliquer les propriétés empêchantes du sérum des rougeoleux, car nos sérums chauffés ne renfermaient pas traces d’alexine.

D’ailleurs, quelques jours après, ces mêmes sérums rougeoleux n’étaient

plus empêchants et gardaient cependant leur même activité hémolytique.

Nous avons recherché si l’addition de sérum normal chauffé, au sérum de rougeoleux syphilitiques empêchant la réaction, ne pouvait faire réapparaître la réaction ; il n’en fut rien.

De ces recherches, il résultait en définilive que le sérum d’un malade en pleine évolution de syphilis secondaire, ayant contracté la rougeole, ne donne plus la reaction de Wassermann; que cette réaction réapparaît après la fin de la rougeole — et que le sérum de raugeoleux plus que d’autres sérums semble posséder des propriétés empêchant in vitro la réaction de Wassermann

J’ai, depuis, avec mon interne M. Roux, observé un second cas de rougeole survenue chez un syphilitique. Dans ce cas, comme dans le premier, la réaction de Wassermann fut négative. Elle était encore négative à un second examen pratiqné à la fin de l’éruption.

Sur la précipito-réaction dans la méningite cérébro-spinale aiguë à méningocoques.

(Bnlletim et Mémoires de la Société Médicale des hôpitaux de Paris, 21 mai 1909.)

I.a recherche de la précipito-réaction fut faite dans 18 cas; 15 fois le résultat fut conforme au diagnostic. Le précipito-diagnostic fnt positif dans un cas de méningite à pneumocoques; il fut négatif dans deux cas de méningite à méningocoques. Un cas fut particulièrement intéressant, il s’agissait d’une méningite cérébro-spinale, due à un streptocoque offrant les caractères du streptocoque de Bonome; la précipito-réaction fut nulle avec le sérum antiméningococcique; très fortement positive avec le sérum antistreptococcique; faiblement positive avec le sérum antipneumococcique.

La proportion des faits positifs obtenus témoigne en faveur de l’intérêt diagnostique que semble devoir présenter la méthode préconisée par MM. Vincent et Bellot.

Étude des propriétés bactéricides de royo-albumine normale. (Archives de Médecine

Au cours des expériences, déjà citées, relatives à l’ovo-albumine comme

milieu de culture, il nous fut donné de constater que l’albumine de l’œuf, au même titre que les toxalbumines. a son pouvoir bactéricide supprimé ou détruit par certaines températures.

Le pouvoir bactéricide du blanc d’œuf, résultant des diverses variétés d’albumines qui le constituent, disparait progressivement et d’une façon pour ainsi dire proportionnelle au degré de température appliquée. C’est ainsi que l’ovo-albumine à 55“ est plus bactéricide que l’ovo-albumine exposée à 70",qui l’est à son tour plus que l’albumine durcie par la cuisson, celle-ci constiiuant le milieu de culture le plus satisfaisant.

Recherches sur l’action hactéricide in vitro du glycogène hépatique. (Comptes rendus des séances de la Société de biologie, août 1900.)

De l'action in vitro du glycogène hépatique à l’égard des agents habituels de l’infection du loie (staphylocoque doré, streptocoque,bacterium coli, bacille d’Eberth), action empêchante, action bactéricide. (In .tournai de physiologie et de pathologie

Au cours d’expériences poursuivies dans le laboratoire du professeur Bouchard sur la transformation possible, par culture microbienne, du glycogène en glycose, j’ai été conduit a rechercher quelle pouvait être m vitro l’action du glycogène extrait du foie normal de chien sur les microorganismes qui comme le staphylocoque doré, le bacterium coli, le bacille d’Eberth, le streptocoque ont été le plus souvent incriminés dans les infections hépatiques.

Sans entrer dans le détail de la technique des expériences, trois séries furent faites, dans les conditions habituelles à la recherche de l’action antiseptique d’un produit, à savoir : a) addition de proportions variables de solutions de glycogène au milieu de culture ensemencé de microbes; b) addition successive à des solutions de glycogène ensemencées de microbes, de milieu de culture; g) fdsde soie trempés dans une culture, séchés, mis dans des solutions de glycogène (dose minimum de a milligramme.s ou maximum de 20 centigrammes) puis réensemencés, après un délai variable, dans un milieu de culture et placés à l’étuve.

Les expériences que je viens de relater me paraissent démontrer de façon suffisamment précise, l’action empêchante, et, à certaines doses, nettement

bactéricide, in vitro, du glycogène hépatique sur le st. doré, le b. coli, le b. d’Eberth, le streptocoque.

Il faut assurément se montrer réservé dans l’application à la physiologie des résultats obtenus par des procédés un peu simplistes et qui sont loin de reproduire non seulement les conditions physiologiques, mais encore l’état de statique chimique du glycogène hépatique, que celui-ci soit ou non combiné, comme le pense Pllüger, aux nucléo-albumines. 11 est permis toutefois de penser que les conditions expérimentales dans lesquelles ces résultats ont été obtenus sont moins favorables que celles qui peuvent être réalisées dans l’organisme, où le glycogène, en proportions plus considérables, incessamment renouvelé dans la cellule normale, persi tant même dans la cellule altérée (faits expérimentaux de d’Amato, faits cliniques de Brault),jouit sans doute d’une activité plus grande. J’ajoute que cette action peut être facilitée d’autre part, réserve faite de l’état de septicémie où tous les processus sont paralysés, en ce qu’elle s’exerce sur des microorganismes dont le plus souvent la germination est très atténuée par le milieu sanguin ou légèrement atténuée par le séjour dans la bile. Toutes ces raisons, ajoutées aux résultats expérimentaux, me semblent plaider en faveur de l’influence du glycogène dans le processus de défense hépatique à l’égard des infections; le glycogène ne serait pas seulement, comme Ta pensé Roger, le témoin du rôle protecteur du foie, il semble être partie active.

La notion de cette action glycogénique trouve dans une certaine mesure une confirmation dans des faits d’observation déjà ancienne, auxquels, d’autre part, elle peut apporter une interprétation rationnelle, aussi rationnelle tout au moins que les hypothèses antérieurement faites à ce sujet. Je veux parler de la stérilité des abcès du foie, de ceux qui, dénommés « grands abcès », relèvent le plus habituellement, exception faite des cas où l'amibe a pu être considéré comme l’agent causal d’infections pyogènes pénétrant par la voie sanguine, la voie portale principalement. Cette stérilité est parfois, il est vrai, apparente, et la culture est venue daus certains cas infirmer les résultats de l’examen microscopique ; mais, le plus souvent, cultures et examens sont restés négatifs. Les faits de Talamon, Petit, Peyrot, Lauenstein, Tuffier, Zancarol, Calmette, Rendu, Le Dantec, Arnaud et d’Astros, etc., etc., sont là pour en témoigner. Cette stérilisation progressive est suffisamment fréquente pour que Planté établisse

comme règle que l’élément pyogène, formant d’abord un abcès hépatique à pus fertile, perd dans une première phase sa végétabilité, et finit par disparaître dans un délai beaucoup plus rapide que pour toute autre collection purulente vieillie. On a cherché à ce phénomène des explications variées. Pour Calmetle, les agents pyogènes sont le plus souvent sans action dans la détermination des abcès du foie, parce que la phagocytose empêche leur développement. Pour Bertrand et Fontan, les microbes, agents de l’abcès, sont tués par les toxines microbiennes qu’ils secrétent. Pour Laveran et Netter, la bile exerce une action bactéricide, action qui a été reconnue comme très faible. Chacune de ces hypothèses peut contenir sa part de vérité ; il se peut que ces divers éléments contribuent à cette stérilisation progressive des grands abcès du foie; ce n’est pas émettre une opinion moins vraisemblable que d’imaginer pour le glycogène un rôle analogue sinon plus important.

De telles recherches soulèvent bien des inconnues. Comment et pourquoi agit le glycogène? Agit-il comme le dit Roger pour les poisons, parce qu'il se combine sous forme de glucoses aux alcaloïdes? Dans mes recherches à aucun moment je n’ai pu, par les réactifs habituels déceler traces de glucose dans la solution de glycogène ensemencée de l’élément microbien. Peut-être se fait-il des transformations intermédiaires? Quoi qu’il en soit, les faits énoncés plus haut gardent leur intérêt.

Ils devaient être confirmés notamment par G. A. Petrone (La Pediatria, ■1902!) qui sans connaître ces recherches pense également qu’on peut rapporter la stérilité fréquente du pus des abcès du foie au pouvoir bactéricide du glyco-

sur l’action antitoxique in vitro la cicntine. {Comptes rendus des

du glycogène hépatique sur la

11. Recherches sur l'action antitoxique in vitro du glycogène hépatique sur le sulfate neutre de strychnine et la toxine diphtérique. {Comptes rendus des séances de la Société de Biologie, décembre 1900.)

Le glycogène hépatique était le même que celui qui nous servit pour nos premières expériences.

Des solutions aqneuses stérilisées de proportions variables de ce glycogène étaient réparties à la dose de 5 centimètres cubes dans des tubes à essai (ce qui correspondait à des doses de glycogène de 25 milligrammes à 20 centigrammes.

La substance toxique était incorporée soit aux solutions de glycogène, soit à de l’eau distillée stérilisée (solutions témoins).

Le contact durait de quelques heures à quelques mois.

La dose toxique du mélange, évaluée préalablement, était injectée à des cobayes ou à des lapins.

Pour la cicutine les résultats restent incertains; la cicutinc en solution glycogénique semblait déterminer des effets plus rapidement mortels. Pour la nicotine l’action neutralisante fut des plus nettes. Les effets convulsifs étaient retardés, moins durables, plus espacés. Alors que pour les animaux témoins la mort était très rapide et à peu près constante (8 sur 10), les animaux inoculés avec la substance toxique en solution glycogénique survécurent (12 sur 16) : quatre seulement succombèrent dans un délai de 45 minutes, de 55 minutes, de 24 heures.

Pour le sulfate neutre de strychnine, 56 cobayes furent inoculés : pour la toxine diphtérique 30.

De cette seconde série d’expériences, il résulte que le glycogène hépatique a été inactif vis-à-vis du sulfate neutre de strychnine, et a renforcé dans une certaine mesure la toxine diphtérique. Ces faits ne sont nullement en désaccord avec les notions classiques. Nous savons que le foie n’arrête pas tous les poisons.

D'autre part, les expériences de MM. ïeissier et Guinard, de MM. Roger et ■losué, de MM. Thoinot et G. Brouardel,ont montré que l’action du suc retiré de certains organes pouvait être empêchante, nulle ou renforçante à l’égard de certains poisons (alcool, toxine diphtérique, etc.).

11 est démontré que les inflammations du foie (avec ou sans degenerescence) sont le plus généralement d’ordre toxique. Pour ne parler que de l’alcool sur lequel le foie n’agit guère, il semble qu’il soit un des facteurs les plus puissants de lésions hépatiques. Il est permis de penser que les poisons sur lesquels le foie ou le glycogène n'agit point jieuvent etre parmi les plus nocifs pour cet organe.

Rôle des lésions du foie dans |les hémorragies des maladies infeotieuses ou dans les formes hémorragiques des infections.

C’est une notion classique que les hémorragies sont fréquentes au cours des affections du foie, et aussi dans les processus infectieux ou toxiques qui lèsent le foie, k ce titre, la variole, qui s’affirme par des lésions hépatiques rappelant souvent celles de l’atrophie jaune aiguë, revêt pour cette raison, nous semble-t-il, le type hémorragique' plus fréquemment que la rougeole et la scarlatine. C’est là un fait d observation que nous avons mentionné avec M. Tanon dans notre travail sur le myocarde dans la variole hémorragique et que j’ai communiqué à M. Doyon pour son mémoire sur le rôle du foie dans la coagulation du sang et sur la pathogénie des hémorragies symptomatiques des affections du foie. (In Journal de Physiologie el de Pathologie générales, à'ii, 658-649, 1905.)

C’est également à propos des varioles hémorragiques et des données sur le rôle du foie dans la coagulation du sang, que devant l’insuccès du chlorure de calcium pour combattre celte tendance hémorragique. J’ai fait, avec mon interne M. Tanon, des injections intra-veineuses de 100 à 200 centimètres cubes d’une solution de glycogène, sans d’ailleurs obtenir aucun résultat réel, et en tous cas en obtenant des résultats très inférieurs à ceux que m’a donnés la méthode de P.-E. Weill ; emploi de sérum animal ou de sérum antidiphtérique récemment préparé, utilisé à titre de sérum.

Difficultés de constatation et de recherche du bacille tuberculeux dans les lésions tuberculeuses du foie; rôle possible du glycogène, tfiongrès international de la tuberculose, Washington, 1908.)

Poursuivant les recherches entreprises dès 1899 sur le glycogène hépatique, j’ai voulu me rendre compte si cette substance ne serait pas cause de la difficulté de coloration ou de constatation du bacille tuberculeux dans un grand nombre de lésions tuberculeuses hépatiques. S’il est vrai que dans les tuber-

Injections tntra^veineuses de glycogène animal chez le lapin. Action snr la nutrition ' , et spécialement sur l'activité dé la, cellule hépatique. En collahoraüon avecM. Ah ' ■ 2s^^\\{Comples4mâm(ksséanm,le'la Société de Biologie, 26 juillet 1902.) ' ,

Il résulte de nombreuses expériences, faites en vue de ces recherches, que les injections intra-teineuses plus ou moins répétées de doses moyennes de glycogène .animal, peuvent, chez , le lapin, apporter quelque trouble à l’activité cellulaire en général et en particulier à l’activité de la cellule hépatique et provoquer ainsi des modifications transitoires dé la nutrition préjudiciables à l’organisme. 1,’abaissemcnl du rapport azoturique, du taux de l’urée d’une jiart, l’hypertrophie,.la congèstioji du foie, la présence d’acidés biliaires dans les urines témoignent de ços divers troubles. Le foie mis en'présence d’une auanlité. anormale sinon excessive de glycogène animal; fait effort jiour rémmagasiner ou le transformer. Mais cet excès de travail, cet hyperfonctioniiement est rapidcqient suivi/d’une déviation fonctioitnellc transitoire et anormale.

ACTIONS TOXI-MICROBIENNES

Modifications de la pression artérielle sons l’influence des toxines • pyocyaniques..

En collaboration avec le lyCiiABius. (Comjtlesrenim dei’dcoddmiedesSdencesjjanvieriSOS.)

Les sécrétions du bacille pyocyanique agissent sur les vaso-moteurs; elles paralysent les centres vaso-dilatateurs, Gley et Charrin l’ont établi; Doyon et .Moral, lluffer et Scherringtoil, etc., l’ont confirmé. • ' ■

En se basant sur ces données, on a pu concevoir des espérances au point de vue thérapeutique. Le profesèeür-.Bouchard a ouvert la voie. .Au cours de recherches spéciales, entreprises-dans son service, il nous a été possible de relever les ehângements siibis-par la pression artérielle.'Nous: avons poursuivi eetfe éfude, en: utilisant le sphygmomanomètre, du professeiir Potain, instrument sûr, si" j’on observe les règles voulues; Bien: entendit, les eyplpratipns, oHt'eu'lieii dans des conditionh identiques’, absolument comparables. Elles ont

élé faites sua des luben le \ i o I I f i t 11 d

malades chez lesquels la pression était très basse.

Le liquide employé n'est aulre que les pfoduits;solubles du microbe de la suppuration bleue. Ces produits ont été fabriqués par ce microbe soil dans du bouillon de bœuf, soit dans un milieu spécial.

On a usé, tour à tour, de cultures jeunes et de cultures plus âgées, de cultures fdtrées et de cultures stérilisées sans fdtration préalable. Des Injections d'eau distillée ont permis de contrôler les résultats.

Iæs élévations de la pression artérielle ont été de 2 à ô centimètres de mercure, sous l’influence de l’injeciion des toxines pyocyaniques; après les injections d’eau distillée, les modilications ont été nulles ou se sont traduites par une diminution de i centimètre. Sans aucune injection, la pression artérielle des tuberculeux a présenté également des variations en moins.

Ces données autorisent les conclusions suivantes :

L’injection sous-ciitanée dc toxines pyocyaniques élève la pression artérielle. Cette élévation est directement proportionnelle à l’âge de la culture, à la richesse du bouillon en albuminoïdes, à la quantité introduite sous la peau ; elle est également plus marquée, si le liquide contient le protoplasma microbien.

Remarquons que ces augmentations de pression sont passagères, donnée qui concilie nos résultats avec les notions que nous possédons sur la fièvre. Notons encore que des expériences, poursuivies par Gley et Cliarrin, confirment nos conclusions.

Influence de la tuberculine sur la pression artérielle. {Congrès français fonr fétwle

.\u couiï de rccliercbes sur l’usage de la tuberculine comme agent révélateur de la syphilis, j’ai étudié l’action du poison tuberculeux sur la pression artérielle. Il était à prévoir que cette influence serait nettement hypOlensife. Le professeur Bouchard venait de démontrer l’action vaso-dilatatrice de la tiibevculinc et. venait d’isoler de la tuberculine dé Koch uu poison qu’il dénomma ectasine en raison de son action excitatrice sur le centre vasb-dilatateür.,Getlo

action sc traduisait sur les points irrités par uj lo t i flove ec exsudation séreuse et diapédèse, rendant compte ainsi de la réaction inflam.matoire peri-tuberculeuse. Chez les lapins, le poison détei-minait la dilatation des vaisseaux de la papille. •

Par ailleurs, cliniquement, Marfan et Potain avaient mis en lumière la diminution de la pression artérielle chez les tuberculeux.

.Mes recherches m’ont permis de constater que la diminution de la pression artérielle est fonction de l’intoxication tuberculeuse.

Des injections de tuberculine de Koch (à la dose de 2 milli»-. 1/2, faites à des syphilitiques, à une malade atteinte de lésion hépatique, à une chlorotique, etc. ont donné une diminution notable de la pression artérielle, diminution qui coïncidait le plus habituellement avec la réaction générale et cessait avec elle. Cette diminution a été en moyenne de 5 à 4 centimètres.

Des injections comparatives, — de bouillon glycériné réduit par l’ébullition — conformément au mode de préparation de la tuberculine de Koch — faites comme expériences de contrôle n’ont, par contre, déterminé aucune modification de la pression artérielle.

Le professeur Arloing devait, dans des recherches ultérieures, confirmer Ma réalité de cette action hypotensive.

Sans vouloir prétendre que l’hypotension des tuberculeux relève exclusivevement du poison tuberculeux, il reste que ce dernier en est l’agent le plus important. 1, examen de la pression artérielle dans les diverses formes de tuberculose en est un nouveau témoignage comme nous le montrons par ailleui-s.

De l'emploi de la tuberculine comme agent révélateur de la syphilis. En collaboralion avec le professeur Sraios. {Congrès pour l'èlude de la tubercuhse chez l'honime et les animaux, 18<J4.),

Delà tuberculine, préparée par nous selon le procédé indiqué par Koch, fut injectée sous la peau du dos et à la dosé de 2 millig. i/2 à quatre malades de l’hôpital de la Charité atteints de syphilis secondaire, complètement apyrétiques et sans indices de tuberculose. Nous avons pu observer une réaction générale et une réaction locale tout à fait comparables à celle que l’on peut

Récemment MM. J. Nicolas, M. Favre et A, Augagncui’ rappelant nos recherches et considérant que leurs conséquences pratiques ne frappèrent pas à l’époque l’attention autant qu’il était nécessaire, reprirent l’étude de la réaction des syphilitiques aux injections sous-cutaiiees de tuberculine (Comptes rendus des séances de la Sodétéde biologie, 28 janv. 1911). Leurs résultats furent conformes à ceux que nous avons obtenus et leurs conclusions tendent a prouver que les syphilitiques à iiilection generalisee, recente ou ancienne, en phase d’évolution, réagissent d’une façon à peu près constante (une seule exception sur 10 cas) par une élévation thermique considérable à l’injection sous-cutanée de tuberculine, tout aussi bien que les tuberculeux, et qu’il faut se garder de tabler sur l’existence de cette réaction thermique pour rattacher à la tuberculose des lésions qui peuvent d’après cela tout aussi bien dépendre de la syphilis.