Une pipette graduée de la même manière

4. Une lampe à pétrole donnant une tlamme claire et homogène (source lumineuse d’intensité constante).

5. Une solution d'hémoglobine préparée avec de l’hémoglobine humide recristallisée; avec le même spectroscope, la même source lumineuse et la même couche liquide d’une épaisseur invariable de 1 centimètre, la distance entre le liquide et le spectroscope et la fente de ce dernier étant toujours les mêmes, la solution doit laisser passer le vert (entre les raies E et F de Frauenhofer dans le voisinage de b), et de telle sorte que la moindre augmentation de la concentration du liquide éteigne ce vert, et que la moindre diminution de celle-ci rende la bande verte plus intense et plus large.

Pour la préparation de l’hémoglobine cristallisée, il est convenable de se servir de sang de chien défibriné.

On procède comme il suit :

Pratique de l’analyse.

Après avoir convenablement disposé le spectroscope, on place devant la fente de l’instrument, à une distance aussi faible que possible, mais en tout cas exactement mesurée, l’hèmalinomètre représenté par la figure 30 et décrit page 58 (ses parois de verre, planes et parallèles, offrant entre elles un écartement exactement égal à 1 centimètre), et derrière, à une distance exacte-

ANALYSE DU SANG

mont, mesurée, on pose la lampe à pétrole munie d’une cheminée noircie avec ajutage latéral. Lorsque la lampe est allumée, on introduit dans l'hémalmomôtre environ 1 c. c. de la solution concentrée d’hémoglobine, on assombrit le local aussi complètement que possible, si l’on n’opère pas le soir, et à travers le spectroscope on regarde lu flamme, dont la lumière, si la solution d’hémoglobine est suffisamment concentrée, doit être complètement éteinte : puis, en agitant continuellement avec une baguette de verre ou de baleine, on ajoute de 1 eau à la solution d’hémoglobine avec beaucoup de pi ét.aulion et goutte a goutte (en se servant d’une pipette graduée en centièmes de centimètres cubes), jusqu à ce que, indépendamment du rouge qui devient visible très-promptement après la dilution, on commencé°à apercevoir le vert. Gela fait, on verse la solution dans une capsule de porcelaine exactement pesée, on pèse, on évapore dans le vide en présence d’acide sulfurique, on dessèche le résidu à 1 00°, jusqu’à poids constant, et l’on pèse de nouveau. On connaît ainsi la richesse en hémoglobine de la solution étendue, et on la calcule pour 100 parties de cette dissolution. Dans toutes les déterminations on se sert du chiflre obtenu comme facteur constant ( k ).

Si maintenant il s’agit de déterminer la teneur d’un sang en hémoglobine, on dispose le spectroscope avec tous ses accessoires exactement comme on l’a dit précédemment, en faisant surtout attention à ce que les distances de l’hématinomètre et de la flamme soient exactement les mêmes, et à l’aide d’une pipette graduée en centièmes de centimètres cubes, on introduit dans 1 hémalinomètre une petite quantité (environ 0,5 à 0,8 c. c.) très-exactement mesurée du sang frais défibriné, mais non filtré, et bien agité avec de l’air atmosphérique; au moyen de la pipette divisée en dixièmes de centimètres cubes (fig. 120), on fait tomber goulte à goutte, en agitant avec une baguette de verre ou de baleine, de l’eau distillée, jusqu’à ce qu’on obtienne la réaction finale, c’est-à-dire l’apparition du vert dans le spectre. On lit ensuite le volume d’eau employé, et, comme on l’a dit plus haut, on trouve avec le facteur constant k, déterminé une fois pour toutes, et le volume mesuré du sang introduit dans l’hématinomètre, la richesse centésimale en hémoglobine.

Il faut naturellement dans ce cas, comme lors du titrage de la solution d’hémoglobine, avoir soin d’éloigner toute lumière étrangère.

Exemple du calcul.

Richesse centésimale de la solution d’hémoglobine (facteur constant k) — 0,8

Quantité de sang employé = 0.551 c. c.

Volume d’eau ajouté = 8.54 c. c.