RÉACTION DE FIXATION

§ III. — Réaction de fixation.

La connaissance des propriétés bactéricides ou cytolytiques des sérums, et la théorie de l'unité de Talexine soutenue par Bordet et Gengou ont semblé susceptibles d'une application au diagnostic delà fièvre typhoïde et de la tuberculose. La réaction peut être appelée^, comme Ta proposé Widal, réaction de fixation ou réaction de Bordet.

Fièvre typhoïde. — Nous avons vu que des microbes ou des cellules sensibilisés (c'est-à-dire mis au contact de sérum d'animal vacciné chauffé à 56 degrés, une demi-heure au bain-marie) absorbent l'alexine du sérum normal. Bordet et Gengou ont eu l'idée d'utiliser cette propriété pour déceler l'existence d'une sensibilisatrice dans un sérum anti-microbien. Si l'on mélange, par exemple, un sérum normal non chauffé à une émulsion de bacilles d'Eberth dans l'eau physiologique et à du sang de cobayes vaccinés contre le bacille d'Eberth, préalablement chauffé à 56 degrés, les bacilles ainsi sensibilisés absorbent l'alexine ou matière destructive qui disparaît du milieu.

Si à ce mélange, ainsi préparé depuis cinq heures, on ajoute une certaine quantité de globules rouges sensibilisés (par la mise en contact de sérum d'animal préparé par une série d'inoculations de globules rouges et chauffé à 56 degrés), l'hémolyse ne se produira pas, puisque l'alexine du sérum non chauffé qui aurait pu l'occasionner a été déjà absorbée dans le premier mélange par les bacilles d'Eberth sensibilisés.

Si, au contraire, les bacilles d'Eberth n'avaient pas été sensibilisés, autrement dit, si le sérum chauffé n'avait pas été du sérum typhique, comme il ne se serait pas fait de fixation de l'alexine sur les bacilles sensibilisés, l'alexine aurait persisté dans le second mélange, et, par suite, elle aurait manifesté son action en hémolysant les globules rouges sensibilisés. Bordet et Gengou ont constaté par ce procédé, la présence d'une sensibilisatrice dans le sérum de deux convalescents de fièvre typhoïde.

F. Widal et L. Le Sourd ' ont recherché si le phénomène pouvait

1 F. Widal et L. Le Sourd. Existence de la sensibilisatrice dans le sérum des typhiques. Bull, de la Soc, méd. des hôp., 14 juin 1901.

MÉCANISME DK LA BACTÉRIOLYSE ET DE LA CYTOLYSE.

apparaître au cours et même au début de la maladie et si cette réaction de fixation ne pourrait pas doubler pour ainsi dire le sérodiagnostic et le suppléer dans quelques cas de réaction retardée.

La technique suivie a été à peu de chose près celle indiquée par Bordet.

On fait un premier mélange composé de : 2 gouttes de sérum neuf non chauffé contenant donc encore son alexine^ 5 gouttes d'une émulsion très trouble de bacilles d'Eberth, faite en délayant une culture sur gélose âgée de 24 heures, dans une solution de chlorure de sodium à 7 p. 1 000 ; 9 gouttes du sérum du malade chez lequel on veut chercher la présence d'une sensibilisatrice typhique, préalablement chauffé pendant vme demi-heure à 56°.

Sérums et culture restent en contact pendant 5 heures.

Après ce temps, on additionne le mélange de 2 gouttes d'un second mélange composé de : 1 partie de globules rouges de lapin (ces globules, après défibrination, ont été lavés 3 fois de suite dans de l'eau salée à 7 p. 1 000, par centrifugation et décantage successif; 2 parties de sérum de cobaye, ayant subi depuis plusieurs semaines des inoculations successives de sang de lapin. Ce sérum a été chauffé à o6«.

Ce second mélange représente, en un mot, des globules rouges sensibilisés par un sérum spécifique, tout prêts à se laisser imprégner et hémolyser par l'alexine, s'ils la trouvent encore libre dans le premier mélange.

On peut aussi utiliser des globules rouges de poule, sensibilisés par un sérum de lapin vacciné avec du sang de poule. Ces globules sont faiblement agglutinés par le sérum qui les sensibilise et l'hémolyse est plus facile à constater que sur les globules rouges des mammifères.

La valeur de l'alexine du sérum normal non chauffé commande tout le phénomène : le sérum doit être recueilli, autant que possible, le jour de l'expérience ; comme le sérum humain peut être pauvre en alexine, il vaut mieux employer du sérum frais de cobaye.

Dans tous les cas, on doit opérer comparativement avec un sérum témoin non typhique et s'assurer que dans ce cas l'alexine non fixée sur les bacilles produit bien l'hémolyse des globules rouges.