CHAPITRE VU

ANALYSE BACTÉRIOLOGIQUE DU SANG

Importance de l'infection sanguine. — Jusqu'à ces toutes dernières années, il était, de tradition en pathologie humaine, de considérer comme exceptionnelle la présence des microbes dans le sang au cours des diverses maladies infectieuses. On opposait même volontiers la rareté de Tinfection sanguine dans les infections hvnnaines au rôle prépondérant que joue la septicémie dans un grand nombre d'infections animales, spontanées ou expérimentales.

L'emploi d'une technique nouvelle a tout récemment modifié sur ce point les conceptions anciennes, en nous montrant la présence de bactéries dans la circulation générale au cours de maladies, la fièvre typhoïde pour ne citer que cet exemple, où l'infection sanguine avait jusqu'ici passé inaperçue.

Dans le domaine de la parasitologie, la mise en évidence du rôle du piroplasma bigeminum, du trypanosome, venant après celle de la filaire, de l'hématozoaire, montre assez quel intérêt pratique s'attache à l'examen bactériologique du sang.

Ces quelques considérations expliquent l'importance que nous avons cru devoir assigner à ce chapitre.

TECHNIQUE GÉNÉRALE

L'analyse bactériologique du sang comporte quatre opérations :

1" L'examen microscopicjue du sang à l'état frais ;

2" L'examen microscopique du sang après fixation et coloration ;

3° La culture du sang ;

4° L'inoculation aux animaux .

ANALYSE BACTÉRIOLOGIQUE DU SANG

§ I". — Exanien microscopique du sang- à l'état frais.

La technique est identique à celle que nous décrivons au chapitre de l'examen microscopique du sang à letat frais : piquer l'extrémité d'un doigt et recueillir directement la goutte de sang qui sourd sur une cellule à rigole ou sur une simple lame que l'on recouvrira d'une lamelle ; examen avec un objectif à sec de fort grossissement.

§ II. — Examen après dessication, fixation et coloration.

On recueille sur une lame une goutte de sang, on l'étalé avec le bord d'une lame rodée, on sèche en agitant la lame rapidement dans l'air.

Fixation. — Le meilleur fixateur est le mélange à parties égales d'alcool absolu et d'éther ; on trempe la lame 5 minutes dans ce mélange, on laisse évaporer. Laveran conseille de maintenir les lames dans l'alcool absolu pendant 20 minutes.

Gunther a conseillé, pour faciliter la recherche des spirochœtes de la fièvre récurrente une méthode qui pourrait être susceptible de généralisation : faire agir pendant 10 secondes une solution d'acide acétique à 5 p. 100 sur une préparation de sang sec fixé par la chaleur, dessécher, neutraliser en exposant la lamelle aux vapeurs d'ammoniaque ; les hématies dont l'hémoglobine a été dissoute ne se colorent pas et les microbes sont plus facilement mis en évidence.

Coloration. — Les meilleurs colorants sont les colorants basiques qui, comme le bleu de méthylène, ont une affinité presque élective pour les bactéries et les noyaux des leucocytes, et ne colorent pas les hématies ou ne les colorent que faiblement, en teinte métachromatique verdàtre.

Le colorant le plus usité est la solution aqueuse saturée de bleu de méthylène ou le bleu de méthylène phéniqué (bleu deKûhne). On colore 5 minutes ; on lave soigneusement à l'eau.

Pour les bactéries qui prennent le Gram, la recherche est très simplifiée par l'emploi de la méthode de Gram modifiée par NicoUe : on colore 1/4 de minute par la solution de violet phéniqué :

On égoutte, on verse sur la préparation quelques gouttes de la solution iodoiodurée de Lugol modifiée, qu'on chasse aussitôt pour la remplacer à nouveau par quelques gouttes de la même solution qu'on laisse 1/4 de minute.

Violet de gentiane

Alcool absolu

Eau phéniquée à 1 "/„

1 gr.

10 ce.

90 ce.

Iode

lodure de potassium Eau distillée

1 gr.

2 gr.

200 gr.