ANALYSE MICROSCOPIQUE DU SANG
Avec le microscope on peut apprécier le nombre et la forme des globules rouges, celui des hématoblastes et le nombre des globules blancs ou leucocytes, leur proportion à l'égard des rouges, ce qui est parfois très important.
J'ai établi le premier, en 1876, que, dans la fièvre puerpérale, dans l'infection purulente et dans la diphthérite, il y avait augmentation des leucocytes, ce qui forme la leucocythémie aiguë. Le fait a été confirmé par les
(I) Bouchut, Nouveaux éléments de pathologie générale, i' édition. Paris, 1882, article
NOSORGANIES.
compte- globules de Malassez et Hayem que j'ai employés pour donner des chiffres exacts (1).
A l'aide des mêmes instruments on a compté les globules rouges qui sont en moyenne de 5 millions par millimètre cube de sang et les leucocytes qui sont de 2500 environ, soit un rapport de 1 à 600, mais ces chiffres varient beaucoup et sont de 1 à 1064 pour Hayem et de 1 à 1880 pour Grancher.
D'après ce point de départ on a vu que, dans les anémies graves, les globules rouges tombaient de 5 millions à 1 million 1/2 à 2 millions. Mais cela est sujet à de si grandes variations dans les chiffres, qu'à moins de grandes différences il n'y a rien à en tirer.
§ 1^''. — Emploi de l'bcuiatimètrc et dosage do 1 liéinoglobino.
Il y a plusieurs hématimètres celui de Malassez qui se trouve plus loin, et celui de Hayem — récemment modifié et dont voici la description :
Ce nouvel hématimètre se distingue de l'ancien en ce que sa construction permet la suppression de l'oculaire quadrillé que nous employions d'abord; il se compose d'une lame de cuivre G G, (tig. 58) au-dessous de laquelle se visse un tube B contenant un système de lentilles destiné à former sur la surface fig. 57.
de la cellule L une image réduite du quadrillé situé en P, cette image représente un carré de 1/5 de millimètre de côté.
FiG. 58.
Les globules contenus dans l'épaisseur de la couche liquide de 1/5 de millimètre en venant se déposer sur la surface de la lame, se trouvent donc au même foyer que l'image du quadrillé.
(1) Voy. E. Bouchut, Pathologie générale, 4* édit., chap. Nosouémies. Paris, 1882.
MOYENS PHYSIQUES D EXPLORATION
Pour employer l'appareil on introduit dans l'ouverture de la platine le tube B après avoir au préalable réglé la lumière par le miroir, de façon à s'assurer que le quadrillé sera bien éclairé, on fixe la plaque de cuivre par les pinces valets quand on a amené au centre du champ l'image du quadrillé, on retire la plaque de verre portant la cellule et après avoir fait la préparation comme il est indiqué ci-dessous, on la replace sous les petits ressorts d'acier. — Tous les objectifs pouvant donner dans le champ de l'oculaire l'image du quadrillé, sont utilisables, il n'y a de limites que le trop court foyer.
i" Numération des globules rouges. — Pour faire la préparation destinée à donner le nombre des globules il faut prendre, à l'aide de la grosse pipette (fig. 59), 500 millimètres cubes de sérum artificiel, soit un demi-centimètre cube, et y ajouter, à l'aide de la petite (fig. 60), '2 millimètres <3ubes de sang. On obtient le sang chez l'homme en faisant une légère ponction avec une lancette au milieu de la pulpe du doigt. Le sang doit être aspiré immédiatement afin d'en éviter l'épaississement à l'air. Comme sérum artificiel on peut employer le liquide amniotique iodé, en ayant soin de laisser évaporer l'excès d'iode avant de s'en servir.
Agiter le mélange avec la petite palette en faisant rouler celle-ci entre les
Fig. 59 et 60. — Pipettes.
Fig. 61. — Palette.
doigts de façon à lui imprimer un mouvement rapide de va-et-vient (fig, 61).
Déposer une grosse goutte du mélange au milieu de la cellule, et placer
immédiatement la lamelle en la laissant tomber doucement et d'aplomb
sur la goutte (fig. 62). Puis humecter avec un peu de salive deux des
bords opposés de la lamelle et appuyer légèrement sur les quatre coins de cette lamelle de manière que la salive, en pénétrant par capillarité, forme une couche aussi mince que possible. Il est important dans celte opération de n'imprimer aucun mouvement de glissement à la lamelle.
La préparation est réussie : 1" lorsque la goutte de sang dilué, transformée ainsi en une nappe de liquide à surfaces parallèles, est entourée
FiG. 62.
d'un anneau d'air complet, et 2» quand il n'existe aucune parcelle importante de poussière entre les deux plaques de verre dans l'espace humecté de salive. Le tube rentrant du microscope ayant été enfoncé jusqu'au trait d'affleurement (c'est-à-dire jusqu'au point, déterminé d'avance, où le côté du carré gravé dans l'oculaire couvre 20 centimètres du micromètre objectif), on compte dans cinq ou six endroits différents de la préparation tous
les globules rouges circonscrits par le grand carré (soit pour les 16 petits), en ayant soin de ne tenir compte que de la moitié des globules à cheval snr la ligne extérieure du grand carré (fig. 63).
On prend la moyenne des chillVes trouvés et, en multipliant cette moyenne par 31 000, on obtient le nombre des globules rouges contenus dans 1 millimètre cube de sang pur.
Voici l'explication du numéroteur 31 000.
La grosse pipette ayant en général G millimètres cubes de mouilla"-e les
Diagnostic.
MOYENS PHYSIQUES D EXPLORATION
500 millimètres cubes de liquide pris avec cette pipette n'en fournissent que iO^, auxquels on ajoute 2 millimètres cubes de sang. Le volume total étant de 496 millimètres cubes dont 2 de sang, la dilution est au 248^ Or, comme il y a 125 cubes de 1/5 dans 1 millimètre cube, le numérateur
doit être :
Si l'on prenait 4 millimètres cubes de sang au lieu de 2, le numérateur deviendrait 15562,5.
Pour faire la numération des globules blancs on note tous ceux qu'on trouve dans l'étendue de deux bandes réciproquement perpendiculaires et occupant toute l'étendue de la goutte.
Pour exécuter cette partie de l'opération, on place la préparation de façon que un des bords de la goutte de sang soit sous-tendu par le grand carré, par le bord gauche, par exemple, du grand carré ; puis, après avoir noté l'absence ou la présence de globules blancs, on déplace la préparation de façon que les globules rouges à cheval sur le bord droit du grand carré soient vus à cheval sur le bord opposé, c'est-à-dire sur le gauche. On a fait ainsi parcourir à la préparation l'étendue d'un carré.
On examine de la sorte tous les carrés successifs contenus dans une bande transversale et on répète la même manœuvre, d'ailleurs facile à exécuter, pour une bande perpendiculaire à la première. On obtient ainsi le nombre des globules blancs contenus dans une soixantaine de carrés, ce qui donne, par un calcul analogue au précédent, le nombre des globules blancs par millimètre cube.
Exemple : soit 165 la moyenne trouvée pour les globules rouges, le nombre des rouges sera de :
Soit 9 le nombre des globules blancs renfermés dans 58 carrés, la moyenne sera 9/58, soit 0,155 qui, multiplié par 31000, donne 4805 globules blancs soit un blanc pour 1064 rouges, mais ce chiffre est variable et trop élevé. J'ai trouvé 1 pour 600 tandis que d'autres au contraire ont indiqué la proportion de 1 blanc pour 1880 rouges (1). Pour faciliter le calcul des rouges, on peut se servir de la table suivante :
Globules Nombre
contenus des globules
dans par milliniclre le carré. cube.
43 1 333 OOL)
Globules Nombre
contenus des globules
dyns par millimètro
le carré. cube.
(1) La pipette qui sert à prendre le sérum arlificiel doit être nettoyée avec de l'eau distillée. Celle avec laquelle on recueille le sang doit être nettoyée successivement avec une solution de soude ou de potasse, de l'eau distillée, puis de l'alcool et séchée avec soin.
Globules Nombre
contenus clos globulns
dans par millinictre
le carré. cube.
64 1 984 OOO
70 2 170 OOO
81 2 511 OÛO
Globules contenus
dans le carré.
Nombre
des globules
par millimètre
cube.
Globules Nombre
contenus des globules
(j^fis V^^ millimèlic le carré. cube.
