EXAMENS MICROSCOPIQUES

goutte de violet de gentiane phéniqiié et laisser en contact une minute.

Violet (le gentiane phéniqué.

Violet de gentiane. 1 gramme.

Acide phéniqué neigeux ....'. 2 —

Alcool absolu 10 cent, cubes.

Eau distillée 100 —

Préparer comme la thionine phéniquée (Voy . p. 70).

•2° Remplacer, sans lavage préalable, la solution colorante par le liquide iodé de Gram ; laisser en contact 1 à 2 minutes, en remplaçant plusieurs fois le réactif.

Liquide de Grain .

Iode sublimé l gramme .

lodure de potassium 2 grammes .

Eau distillée 300 cent, cubes .

3° Laver à Teau distillée.

4° Décolorer par lalcool absolu en versant le réactif goutte à goutte sur la préparation pendant 20 à 60 secondes, suivant les cas (intensité, durée d'action de la matière colorante, épaisseur du frottis).

Ce temps, d'exécution délicate, demande une certaine habitude • il faut décolorer assez et pas trop.

5" Laver à l'eau distillée.

6° Colorer le fond de la préparation en déposant sur le frottis, pendant 1 à 2 minutes, une goutte de solution aqueuse d'éosine.

Solution atfueuse d'éosine.

Eosine soluble à Teau 1 gramme .

Eau distillée 200 cent, cubes.

7" Laver, sécher, monter et examiner comme nous l'avons dit plus haut.

Coloration de Ziehl. — Cette méthode s'applique à la recherche et à la détermination du Bacille de la tuberculose.

Le Bacille de Koch se coloredifficilementpar les couleurs basiques d'aniline, mais, une fois coloré, il retient énergiquement la matière colorante, même quand on l'expose à l'action de décolorants puissants, tels que les acides minéraux dilués.

Cette propriété permet de mettre en évidence le Bacille de Ivoch dans les tumeurs et les lésions et de le caractériser (1).

Procédé recomiiKindé. — 1" Sur le frottis, séché et fixé comme d'ordinaire, déposer une grosse goutte de fuchsine pluMiiquéc de Ziehl.

(1) En réalité quelques autres microbes jouissent de propriétés colorantes électives analogues <i celles du Hacille de Koch, mais ces cas sont peu importants au point (le vue qui nous occupe; on trouvera ;\ ce sujet tous les renseignements nécessaires dans 15esso.\, loc. cit., p. 67 i et suivantes.

n A. BESSOX. — BACTÉRIOLOGIE DE LA BOUCHE.

Fuchsine phéniquée de Ziehl.

Fuchsine l'ubine 1 gramme.

Acide phénique neigeux 5 grammes.

Alcool absolu 10 cent, cubes .

Eau distillée ■ 100 —

Préparer comme il a été dit p. 70.

'2° Porter la lame .sur une très petite flamme et chaufler doucement jusqu'à production de vapeurs pendant environ deux minutes, en évitant d'atteindre l'ébullition et en veillant à ce que la solution colorante ne se dessèche pas.

3° Rejeter la solution colorante et la remplacer par quelques gouttes d'acide azotique au tiers.

Acide azoti({ue pur 1 volume.

Eau distillée 2 volumes.

Laisser en contact pendant quelques secondes : la préparation devient jaunâtre.

i" Laver à grande eau ; une légère teinte rose reparaît. Le frottis doit être coloré en rose pâle; si la décoloration n'était pas suffisante, on ferait agir de nouveau la solution acide.

5° Après lavage à l'eau, verser sur la préparation quelques gouttes dalcool absolu pour achever la décoloration ; après action de l'alcool, la teinte rose doit être très faible, à peine visible.

6" Laver à grande eau et déposer sur la préparation, pendant quelques secondes, une grosse goutte de solution aqueuse de bleu de méthylène.

Soluliun aqueuse de bleu de mélhylène.

Bleu de méthylène 25 centigrammes.

Eau distillée 25 cent, cubes.

Placer dans un petit flacon; agiter; laisser en contact un ou deux jours; liltrer au moment de l'emploi. Se conserve mal.

1° Laver, sécher, monter et examiner comme il a été dit plus haut.

CoLOR.vTiON DU spmocHÈTE DE LA SYPuiLis. — Le Spirochètc de Schaudinn fixe très difficilement les couleurs; il reste pâle {Sp. pallida) et exige des procédés de coloration spéciaux. Parmi les innombrables procédés de coloration qui ont été recommandés, nous en décrirons deux qui donnent, à notre avis, les meilleurs résultats, renvoyant le lecteur, pour les autres, aux traités récents de Technique bactériologique.

Le Spirochète est très irrégulièrement réparti dans les produits syphilitiques : dans les mêmes lésions, les parasites sont tantôt nombreux, tantôt rares; on doit multiplier les examens au cas où les premiers de ceux-ci resteraient négatifs. Pour la recherche, il faut délerger soigneusement la surface delà lésion syphilitique, puis, par des grattages légers et répétés provoquer une exsudation de sérosité {rosée séreuse) avec laquelle on préparera les frottis.