EXAMEN COMPARATIF DES DIVERS PROCÉDÉS DE DOSAGE

Si après avoir étudié en détîiil chacun des procédés usités pour les analyses qualitative et quantitative du sucre, contenu dans les urines, on jellc un coup d'œil d'ensemble sur ces différents procédés on arrivera en comparant leur deg:ré de précision, les difficultés que présente leur emploi, à se persuader que les procédés d'ordre chimique sont bien supérieurs aux procédés d'ordre physique, et, que parmi les procédés chimiques celui de rehlinj? est de tous celui qui, dans la pratique, est destiné à rendre le plus de services. Il nous suffira pour le démontrer de rappeler brièvement quelquesuns des avantajçes et des inconvénients que nous avons à dessein étudiés en détail, à propos de chacun de ces procédés. Et d'abord parlons des procédés d'ordre physique que nous croyons ou peu pratiques, ou peu exacts, et que pour ces raisons nous n'hésitons pas à délaisser, leur préférant de beaucoup les procédés d'ordre chimique.

Le plus infidèle assurément est celui qui repose sur la pe-

(1) Becquerel, Deâ réactifs à employer pour déceler la présence du svcre rffju rurme (Gax. Hdpit., 1857^

santeur spcMMficiiie de Turine qu'on a à examiner. Lorsqu'on ne tient compte que des modifications que présente la densité de l'urine, ce procédé, nous le savons, ne peut rendre aucun service, puisqu'il est actuellement démontré que cette augmentation de densité de l'urine peut tenir à toute autre cause qu'à la présence du sucre; puisqu'on sait qu'à certaine période du diabète, l'urée est toujours en excès dans l'urine. Les modifications qui sui-viennent dans la densité d'une urine qu'on a soumise h la fermentation, pourraient être utilisées, avec plus d'avantaj^e, pour le diagnostic chimique de la glycosurie ou du diabète. Mais ce procédé, résultant de l'association de la fermentation à l'examen densimétrique, ne présente j)as tous les avantages que croient pouvoir lui accorder Montbly, Manassein et Roberts. Il n'est en effet nullement démontré que la différence que présente, après la fermentation, la densité spécifique d'une urine ne résulte que de la disparition du sucre. On sait, en effet, que l'urine contient des substances nombreuses qui sont aptes à fermenter, et pour n'en citer que quelques-unes, nous rappellcix)ns qu'il en est ainsi de la matière colorante (Seegen,Widerhold) et de l'urée (van Deen, Neubauer). Il peut donc se faire que cette diminution de la densité tienne aussi bien à la disparition du sucre qu'à la disparition de l'une quelconque de ces substances. On ne saurait donc accorder à ce procédé toute la valeur que lui reconnaissent les auteurs qui l'ont préconisé. On ne saurait donc admettre qu'à chaque degré de densité spécifique en moins, corresponde une quantité déterminée de sucre. Mais ce (jui rend ce procédé encore plus inexact, c'est qu'on ne saurait pas davantage admettre que cette diminution de densité soit en rapport avec la disparition de tout le sucr(» contenu dans l'urine, puisque, ainsi que nous le savons, il est de nombreuses conditions qui peuvent s'opposer au dével()pj)ement de la fermentation, ou en arrêter le cours. Toutes ces inexactitudes qui sont liées aux incertitudes de la fermentiition ne sont pas encore les seules rai-

EUMEN COHPAHATIP DES DIVERS PROCEDES DE DOSACE. 119

sons qui militent contre ce procédt^. Ce qui doit le faire rejeipi' de la pratique médicale, c'est que rVst un moyen peu espédilif, puisqu'il m''eessilc au pr^'alahle, pourpouvoirètre utilisé, le développement de la fermentation, et l'on suit qu'il faut à la rermcntation pour être complète, 20 à 24 heures.

Un procédé d'ordre physique bien supérieur au précédent est celui qui est basé sur la propriété que possède le sucre rontenu dans l'urine, de produire une déviation de la lumière polarisée. Mai? nous ne savons pas s'il présente tous les avantages qu'ont bien voulu lui l'econnaltre les nulcurs qui s'en sont faits les dérenseurs; ce qui nous porte à en douter un peu, c'est que le procédé ne peut être utilisé que par des gens exercés; c'est que son application présente des difficultés qu'il n'est pas toujours facile d'éviter. Il faut, en elTet, pour jufrer la différence de feinte une {trànde liabilude, surtout lorsque le liquide n'est pas tout à fait décoloré. Aussi, doit-on au préalable, lorsque la teinte du liquide est assez prononcée, procéder à cette décoloration. Cette précaution est mémo indispensable lorsque l;i coloration est intense, car elle s'oppose à l'usage du polarîmètrc. Il faut en outre s» prémunir contre toutes les causes d'er- Teurqiii peuvent naître des substances que l'urine peut ac- TOdentellement contenir concurremment avec le sucre. Car nous savons que s'il en est qui, comme la quinine, ne font |u'eia»érer la déviation due A la présence du sucre, il en est l'aulresqui, comme l'albumine, les acides biliaires, et la cinlionine aorissent en sens contraire, et s'opposent d'une façon fdus ou moins complète à l'action du sucre sur la lumièie po- Itrisce. 1^ sucre, dans ces conditions, peut donc échapper i fexamen polarimétrique. Aussi est-il Indispensable, pour 1er de semblables mécomples. do débariasser l'urine de toutes ces substances. Mais ce traitement préliminaire ne peut fee faire qu'en portant une atteinte plus ou moins considérable A la constitution de l'urine et par conséquent h l'exactitude ^ procédé. On ne peut en effet décolorer l'urine, extraire

120 DIÂBÊTK SUCRÉ.

Talbumine sans diminuer dans des proportions plus ou moins grandes le sucre qu'elle renferme. Si l'on ajoute que ce traitement réclame un temps toujours très-long, par conséquent peu conciliable avec les exigences de la pratique journalière, si l'on considère en outre que le polarimètre est un instrument coûteux qui n'est pas à la portée de toutes les bourses, on comprendra que nous n'ayons pour l'examen de l'urine sucrée, à l'aide du polarimètre, qu'un enthousiasme assez restreint. Les résultats qu'il donne, alors qu'on a rempli toutes les conditions que nécessite son application, ne sont pas du reste de nature à modifier notre tiédeur- à son endroit, puisqu'il est des cas où le polarimètre est insensible et qu'on ne peut guère espérer de reconnaître, à l'aide de cet instrument, des quantités de sucre inférieures à 0,02, àOyOS pour cent; alors que leâ liqueurs cupriques en dénotent encore la présence d'une façon très-appréciable.

Les procédés chimiques dont il nous reste à parler et qui nous paraissent supérieurs aux procédés physiques ne nous semblent pas posséder indistinctement toutes les qualités qu'on s'est plu à leur attribuer. Ainsi la fermentation qui a été tant vantée par quelques auteurs, qui, pour quelquesuns, constitue même le seul moyen de reconnaître la présence du sucre dans un liquide, présente des causes d'erreur qu'il est souvent difficile d'éviter. Ces causes d'erreur, nous le savons^ sont nombreuses. Elles tiennent, ainsi que nous l'avons dit, ou à la nature du liquide, ou à la nature des méthodes employées pour produire la fermentation, ou aux modifications de température. Si l'on peut se mettre i l'abri de cos dernières causes d'erreur, il n'est pas toujours facile d'éviter les premières. Que le liquide à examiner contienne de l'albumine, qu'il renferme des matières colorantes en excès, et l'on aura des substances fermentescibles qui, au contiict de la levure de bière, donneront lieu à la formation d'une quantité plus ou moins considérable d'acide carbonique ou d'hydrogène carboné qui peut être tout à fait

EXAMEN COHPiRATIP DES DlVtRS PROCÈDES DIS DOSAGE. 111

élrangère à la prt'sencc du sucre. On pourra donc dans res cas croire â l'existence du sucre alors qu'il n'en exlsle pas trace, il faut donc tout d'abord, si l'on veut éviter ces causes d'erreur, examiner au préalable le liquide qu'on veut soumettre à la fermentation, et le débarrasser de l'albumine qu'il contient ou des matières colorantes qui peuvent s'y trouver en excès. Mais ces causes d'erreur ne sont pas les seules â éviter, il sullit en efl'et, pour fausser les résultats de ropéi-ation, que la quantité de sucre que lenferme l'urine y soil en proportion considérable pour que la fermentation ne s'y fasse qu'incomplètement ou y soil peu sensible, l'alcool résultant de cetlfi fei-mentatton s'opposant à son développement ullèrieur ou augfmentant le coefficient d'absorption du liquide. On devra donc dans ces cas, étendre d'eau un liquide par trop salure de sucre, avant d'y provoquer la fermentttîon. Il peut se faire enfin, il ne faut pas l'oublier, que 4'acide carbonique obtenu vienne en pnrtie de la levure elle- Ittéme, qui, après avoir provoqué la fermentation, en subit elle-même les atteintes (Pasteur, Liebig). Comme on le voit, Jes conditions li réaliser, pour que la fermentation donne 'd6S résultats salisfaisants, sont assez difliciles à obtenir. Mais iSês conditions réalisées ne sont, pour ainsi dire, que le prélude de la fermentation qui demande, pour se développer complètement, âO à 34 lieures. On ne saurait donc conseiller la fermentalion comme un moyen de diagnostic desliné à entrer dans la pratique journalière, d'autant plus qu'elle ne donne Jamais le chiffre exact du sucre contenu dau.s un liquide. Elle n'en décèle guère en moyenne que les 7/10. Toutefois, ainsi que la polarisation, elle peut être et doit utilisée comme moyen de contrôle dans certains cas où ^l'examen par la liqueur de Febling n'a donné que des résul> lais douteux.

Les procédés cbimtciues sont beaucoup plus prali-

les que les précédents, maïs ils ne présentent pas tous

même degré d'exactitude, il nous suffira de rap-

peler les principales des imperfections de quelques-uns d'entre eux pour faire ressortir toute l'importance du procédé Fehling et pour lép^itimer la préférence que nous lui accordons.

Une des raisons qui doivent faire rejeter le procédé de Moore aussi dit procédé de Heller ou de Vop^el, c'est son peu de sensibilité. Ghrrod, qui l'a beaucoup étudié, ne croit pas qu'on puisse reconnaître dans une urine, à l'aide de ce procédé, la présence d'une quantité de sucre inférieure à 0,50 à 0,75 pour 1000. La détermination du sucre parce procédé repose, on le sait, sur les modifications que présente la teinte du liquide en expérimentation, or cette appréciation sera d'autant plus difficile à faire que l'urine sera plus colorée et qu*elle contiendra moins de sucre. Mais cette diflîculté qu'il y a à reconnaître la différence d'intensité que présentent deux colorations, ne constitue pas le seul degré d'infériorité de ce procédé. Il peut se faire que, sous l'influence de la potasse ou de tout autre alcali, il se produise dans l'urine des colorations plus ou moins foncées, et qui sont tout à fait étrangères au sucre. Cette modification, qui survient ainsi dans la coloration du liquide en expériment<alion, peut tenir ainsi que nous l'avons vu, à la nature même de l'urine ou au réactif employé. L'urine peut contenir des matières colorantes en excès (Wiedcrliold), du mucus (Fauconnoau-Dufresne), de l'albumine, de la cystine, toutes substances qui brunissent an contact d'un alcali, en formant avec lui un corps mal déterminé (Wiedcrliold) qui reste en dissolution dans l'urine et peut être, dans certains cas, un sulfure qui tombe au fond du vase. Aussi ost-il nécessaire de débarrasser de toutes ces substances l'urine, qu'on veut examiner à l'aide de ce procédé. Il n'est pas moins nécessaire de s'assurer du degré de pureté do la solution de potasse employée, puisque Owen Rees a démontré qu'elle peut se charger de plomb dans les bouteilles on on la conserve et former, au contact de Turine, des sulfures de plomb qui la noircissent (Brùcke).

EXAHEN GOMPAHATIF DES DIVERS PROCÈDES DE DÛSAnK. tM

Les observalions qui? vient di> nous inspii-i>r le proC45dc! Hoore, ppiivent. s'appliquer en partie au proci^di' Bôllger, tant ^-anli^^ pur Aufield el Oehier, qui n'Iu^sitent p.'is à le déclarer plus sensible que celui de Trommer, opinion conleslée du reste jKir Seegen. Les raitses d'erreur sont A peu près les marnes. Dos inatièrps rolorantes en exr^s dans l'urine, une coclion de l'urine un peu trop prolongée, suflisent pour donner au inélann:e de bismuth et de carbonate de soude une teinte prtsiltre pbts ou-moins foncée, rappelant rellK de la réaction (Wiederbold). L'aride urique (Debout. Uialhe) et l'albumine (Attlield) jouiraient è)ra]ement, comme déjà nous l'avons dii, du rdebeus privilège de colorer plus ou moins ce ni''-lanp:e et donneraient le change sur la vi^ritable constitution de l'urine en expérimentation. Il n'est pas jusqu'au carbonate de soude employi? qui ne soil susceptible de donner au mélange une teinte firieaire (Lowe) ou plutôt jaunâtre (lluppert) lorsqu'on vient à le chaulTer. A l'aide d'un procéd(5 si facile î\ impressionner, et exposant par conséquent si facilement A l'erreur, on ne saui'ait afllrmer la présenne du sucr^ que dans des cas où la réaction est nettement aoruspe. On ne saurait du reste pas plus avec ce proeédé qu'avec le procédé Moore en apprécier la quantité d'une manière exacte, puisque cette appréciation ne repose que sur les didÎTences de teinte souvent assez peu prononcées d'une même couleur.

Nous ne reviendrons pas sur les iniperreclions que peuvent présenter les autres procédés; nous nous contenterons A'aA'oir indiqué les raisons qui nous font rejeter les deux cédés les plus en vopfue, ceux de Moore et de Botlg^er. 11 is reste A sifçnaler quels sont les motifs qui nous font préifftrer !e procédé de Fehlinp qui, de tous les procédés conlaus, nous semble et le plus exact et le plus pratique.

Nous n'ignorons pas qu'il est de nombreuses conditions K^i peuvent en fausser ou en exap;érer les résultats. Di^jA ■ Dous les avons signalées. Nous savons que ces conditions

12i DIABÈTE Sl'CRÊ.

peuvent tenir aux substances contenues dans Turine ou à l'altération des réactifs. Ainsi il est démontré que la matière colorante de l'urine (Wiederhold, Schiff, Beale), l'acide urique (Meissner, Seegen, Leconte), le mucus (Beliier, Fauconneau-Dnfresnc), l'allantoine (Stiideler) et rhypoxanthine (Lehmann) peuvent donner lieu à une légère précipitation d'oxydule. On sait d'autre part que la formation d'oxydule peut résulter de la présence dans l'urine de substances accidentelles, telles que le chloroforme (Bernard, Pavy, Wiederhold), la glycérine (Bernard, Leconte), et le tannin (Bernard). On sait aussi qu'il est d'autres substances, au contraire, qui, tout en permettant la formation d'oxydule, due à la présence du sucre, s'opposent à sa précipitation et le tiennent en dissolution, comme l'albumine (Pavy), l'urée (Beale, Leconte, Meissner, Babo), la parapeptone cl la pepsine (Meissner), l'acide urique en excès et les acétates (Van Deen). Mais, connaissant ces causes d'erreur, il sera toujours facile, s'il est nécessaire, d'y remédier, en décolorant l'urine, en précipitant l'acide urique, en le débarrassant des substances étrangères, ou en chauffant l'urine, lorsque la formation du précipité sera empêchée par la présence de l'ammoniaque existant dans l'urine, ou formée aux dépens des substances îizotées qu'elle renferme.

Ce n'est du reste qu'exceptionnellement qu'ob se trouve dans la nécessité d'avoir recours à de telles extrémités, et seulement lorsque l'on veut apprécier de faibles quantités de sucre. Le plus souvent, dans la pratique journalière, on se contentera de l'examen de l'urine, se rappelant qu'elle peut contenir des substances qui augmentent un peu le chiffre vrai du sucre.

C'est ainsi qu'on peut s'expliquer la différence que présentent les tableaux d'examen d'urine, dressés par Neuschler(l)i Wicke et Lespiau (â). Les doses de sucre qu'accuse ce pro-

(li Neu5chler, !oc. cil.

(2) Lespiau, Sucre dans les urines (Gaz. Paris, 1857).

MemODE D'ISOLEMENT Dit SUCRE. lâô

cédé y sonl toujours snpriieures :\ celles que décèle la fer- QientatioQ ou la polarisaLion.

Il faudra se rappeler que la formation d'oxydule a d'autant plus de chances d'Mre due au sucre contenu dans^'urîne, qu'il apparaît plus nettement et plus rapidement, que l'acidité de l'urine en est moins praude (Scejïen), que parfois il suffit d't'tendrc d'eau l'urine à examiner pour voir se former un précipité abondant (See^^en), que, dans d'autres cas, ati coQlraire, il est essentiel de la concentrer par l'évaporation.

On pourra enfin prévenir les causes d'erreur, provenant du réactif lui-même, en s'assurant de sa pureté, en dosant exactement le sucre employé ù son titrage, en n'employant pour ce titraj^e qu'un sucre entièrement pur et parfaitement 8CC. On pourra du reste s'assurer du mode d'artion de la liqueur de Fehlinfr sur le liquide à expérimenter, à l'aide du procédé que conseille Scliilf, et qui consiste dans l'emploi d'une solution de chtorite de fer.

Ces précautions prises, on pourra sans crainte employer ce procédé de dosage qui permet de reconnaître très-nettement des quantités relativement peu considérables de sucre : 0,:îO, 0,20, et même 0,10 par 1000 grammes (Seegen). Ce diaimostic est plus que suflisant pour la pratique; il est supérieur à tous les autres. Ce procédé a en outre l'avaDtaire d'être trés-expéditif, ce qui n'est pas à dédaigner, et de plus de ne pas laisser de doute dans l'esprit de l'opérateur, attendu que les résultats qu'il donne, lorsqu'ils sont positifs, ne reposent pas sur des modifications légères d'une même coloration, comme ceux que donnent les procédés de Hoorc et de Bùtlger, mais sur un changement complet de coloration.

Toutefois si l'on veut connaître dans une urine des quantités de sucre inférieures à 0, 10, 0,:20, 0,âO, pour 1000 il faut

(le toute nécessité débarrasser Turine des substances qui peuvent simuler la réaction du sucre, ou qui peuvent s'y opposer, ou bien il faut procéder à son extraction en opérant sur de grandes quantités d'urine.

Voici quels sont les procédés employés par Brucke pour débarrasser Turinc de toutes ces substances et rendre à celle urine sucrée la sensibilité que présente toute solution aqueuse. Il prend de l'urine fraîche, il y ajoute de Falcool absolu, de manière à ce que cet alcool absolu forme les 4/5 du mélange. L'alcool dont se sert cet auteur est de l'alcool à 94%3 ou 94%4, d'une pesanteur spécifique de 0,795 à 12* Réaumur. Il le mélange dans, la proportion de 54 ce. pour 10 ce. d'urine. A peine a-t-il fait ce mélange, qu'il se forme un précipité dont il se débarrasse, en filtrant le liquide. Il ajoute alors à ce liquide filtré une solution alcoolique de potasse, qu'il laisse tomber goutte à goutte jusqu'à production d'alcalescence. On abandonne ensuite à lui-même, pendant vingl-quatrc heures, ce liquide ainsi préparé. Si, au bout de ce temps, on vient à le décanter, on trouve, sur les parois et dans le fond du vase, des masses cristallines et amorj)hes. Les cristaux seraient formés de saccharate de potasse, les masses amorphes contiendraient du sucre mélangé à quelques-unes des substances qui, contenues dans l'urine, se sont déposées eu même temps que le sucre. Si> par l'évaporation, l'on débarrasse ces substances amorphes et cristallines de l'alcool qui les imprègne, on peut ensuite, en les dissolvant dans de l'eau, obtenir une solution sucrée dont il sera facile de faire l'examen, à l'aide des procédés dont nous avons parlé plus haut (liqueur Fehling, fermentation, polarisation).

Pour isoler le sucre à l'aide du deuxième procédé on précipite l'urine par l'acétate acide de plomb. On traite le liquide, résultant du filtrage, par l'acétate de plomb basique. On le filtre de nouveau et on y ajoute de l'ammoniaque. Il se forme alors un précipité qui n'est autre que du saccharate