‹ Traité du paludisme [electronic resource]Chapitre 65 sur 283 · A. Laveran, Soc. de Biologie, 15 lévrier · texte numérisé non relu

A. Laveran, Soc. de Biologie, 15 lévrier

BTIOLOGIE

mes observations, en Algérie, ont été faites à la température du laboratoire.

L'examen du sang en goutte pendante est intéressant; il permet de bien observer les mouvements des flagelles; il faut avoir soin d'étaler la goutte de sang, les éléments parasitaires ne sont visibles en effet qu'autant que la préparation est très mince.

2° Examen du sang desséché. Procédés de coloration des hématozoaires. — La dessiccation rapide du sang est un excellent moyen de conservation du sang et des éléments parasitaires qu'il contient.

Pour obtenir de bonnes préparations, il faut se mettre à l'abri de toutes les causes d'altération des hématies; on opérera vite pour éviter l'action de l'air, on veillera à ce que la dessiccation se fasse rapidement; si l'on chauffe, on aura soin de ne pas porter le sang à la température de 57° avant d'avoir obtenu une dessiccation complète.

On emploiera des lames porte-objet très propres, nettoyées à l'eau et à l'acide chlorhydrique d'abord, puis à l'alcool; quand les lames sont souillées par des corps gras et des poussières, le sang s'étale mal et les poussières gênent l'examen.

Un procédé commode, consiste à étaler le sang sur les lames porte-objet avec une carte de visite; la goutte de sang est étendue d'abord de manière à former une ligne perpendiculaire au grand axe de la lame, puis étalée avec le bord de la carte qu'il ne faut pas faire glisser trop rapidement. Il est bon d'imprimer à la carte quelques mouvements de latéralité.

La goutte de sang qu'on étale doit être assez petite pour que la totalité du sang soit étalée; les hématies parasitées sont entraînées pendant le frottis; elles sont plus nombreuses dans la dernière partie ; si donc le sang est abondant et qu'on doive rejeter le surplus, on risque de perdre la partie plus intéressante '.

Il ne faut faire qu'un frottis avec le même bord d'une carte; le sang se coagule rapidement et les débris de fibrine sont nombreux et gênants dans les préparations, quand on ne prend pas cette précaution.

Les frottis de sang se conservent Ion» temps et ils peuvent être facilement expédiés au loin; on enveloppe les lames dans du papier fin sur lequel on inscrit le nom du malade ou ses numéros de salle et de lit à l'hôpital et la date de la prise de sang. Le sang

l. A. LaVERAN, .Soc de ISiolotjie, 7 juillet 1000.

peut être examiné et coloré plusieurs mois après qu'il a été recueilli; il y a avantage à ne pas attendre longtemps pour faire l'examen, les vieilles préparations se colorent en effet difficilement. , r Avant de soumettre le sang desséché à l'action des réactifs

colorants, il faut le fixer.

L'alcool absolu donne de très bons résultats pour la fixation des hématies de l'homme et des animaux; il suffit de faire agir l'alcool pendant 4 à 5 minutes.

Le mélange à parties égales d'alcool et d'éther, conseillé par Nikiforoff, fixe très bien les hématies de l'homme; on verse quelques gouttes de ce mélange à la surface de la lame garnie de sang desséché, on laisse en contact pendant quelques secondes et on sèche après avoir fait écouler le liquide en excès.

Quand on veut faire un examen rapide du sang, pour constater simplement la présence des hématozoaires, on peut employer, comme colorants, une solution aqueuse concentrée de bleu de méthylène ou le phénate de thionine.

Marchoux a préconisé la formule suivante :

Solution de thionine saturée dans l'alcool à 50 degrés. 20 cm3. Eau phéniquée à 2 p. 100 100 —

Il est bon de laisser vieillir cette solution pendant une quinzaine de jours avant de l'employer. A ce moment, elle colore très vite et il suffit de la laisser quelques secondes en contact avec la préparation; on lave à grande eau, on sèche, on lave rapidement à l'alcool absolu, on sèche de nouveau et la préparation est terminée Les hématies ont une teinte verdàtre, tandis que les hémamibes et les leucocytes se colorent en violet.

Pour colorer les karyosomes des hématozoaires, il est nécessaire d'avoir recours à des procédés spéciaux; ces karyosomes ne se colorent pas en effet par les réactifs qui donnent d'ordinaire les meilleurs résultats pour la coloration de la chromatine des éléments anatomiques (safranine, rouge de Magenta, hématéine, etc. . .) .

Le procédé de Romanowsky a été souvent employé. Le sang desséché sur des lamelles couvre-objet est mis à lcluve sèche, à la température de 105° à 110°, pendant une heure environ. Les lamelles sont ensuite plongées dans un mélange colorant composé

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