I. Qui, eu réalité, est une solution de rosaniline

l’excès de vert par des traitements successifs à l’alcool ; on immerge la préparation dans le baume lorsque la teinte convenable est obtenue.

D’une façon générale, il est bon de faire les colorations dans un verre de montre dans lequel on a versé assez de substance pour que la coupe y flotte librement. Les colorations obtenues sur la lame sont le plus souvent inégales.

Conservation de la préparation. — Si dans quelques cas l’obtention de la préparation est chose facile et rapide, nous avons vu qu’il n’en est pas toujours ainsi, aussi est-il sage de conserver les bonnes préparations pour éviter de nouvelles manipulations. Bien que les préparations ne gagnent pas en vieillissant, il y a quand même intérêt à réunir des collections de types, d’objets rares.

Le procédé consiste, en un mot, à empêcher la perte du véhicule et par conséquent l’entrée de l’air et le dessèchement de l’objet. On y parvient en emprisonnant la préparation entre la lame et la lamelle au moyen d’un vernis épais qui, en se concrétant à l’air, empêche tout échange avec l’extérieur.

Ce vernis épais prend le nom de bitume., car il avait primitivement pour base une solution sirupeuse de bitume de Judée dans l’essence de térébenthine à laquelle on ajoutait un volume égal de mixtion des doreurs. Cette préparation laisse souvent à désirer, car, en se desséchant, elle se fendille laissant des orifices par lesquels s’échappe le véhicule.

On lui substitue la paraffine fondue que l’on étend avec une tige de fer recourbée, sorte de tringle de rideau, que l’on enduit de matière en la plongeant chaude dans un morceau de paraffine. Le sertissage refroidi est recouvert au pinceau d’une solution alcoolique et sirupeuse de gomme-laque.

Beaucoup préfèrent, et je suis de ce nombre, une solution sirupeuse do cire à cacheter surfine dans l’alcool . La cire concassée est placée dans un flacon à col droit avec la quantité d’alcool à 90° juste nécessaire pour l’immerger. La solution se fait à froid ou plus rapidement en plongeant le flacon dans un bain-marie à 70° ; on agite de temps en temps. On amène ensuite à consistance voulue soit par addition d’alcool, soit enchâssant l’excès du dissolvant par la chaleur du bain-marie. On conservera le bitume dans un flacon à baume de (>anada, mais on remplacera la tige de verre par un petit pinceau de blaireau.

Si les bords de la lame et de la lamelle sont bien secs, on applique directement le sertissage de façon à ce qu’ayant 3 ou 4 millimètres de largeur, il porte mi-partie sur la lame, mi-partie sur la lamelle; on le laissera sécher et, avant de mettre de côté la préparation, on s’assurera que la fermeture est bien hermétique et l’on donnera, s’il est nécessaire, une seconde et même une troisième couche pour combler tous les interstices.

TECHNIQUE GÉNÉRALE

Si Jes verres sont humides ou si l’objet risque d’ètre déformé à la longue par le poids de la lamelle, il faut faire un nouveau montage en cellule^ c’est-à-dire dans une sorte de petit godet ayant la forme et les dimensions du couvre-ohjet. La cellule se prépare soit en déposant sur la lame, à la façon du sertissage, une ou plusieurs couches superposées de bitume, selon l’épaisseur que l’on veut lui donner, en ayant soin toutefois de ne renouveler l’opération que lorsque la couche précédente est parfaitement sèche, soit en soudant à la lame au moyen d’un vernis une feuille perforée d’étain et mieux de verre L

On monte la préparation dans la cellule avant que la dernière couche de bitume soit complètement sèche et on a soin de mesurer le véhicule pour qu’il remplisse exactement la cavité lorsqu’elle sera recouverte par la lamelle. Les bords du couvre-ohjet reposeront sur la paroi de la cellule et on les fera pénétrer dans la dernière couche de bitume par une légère pression. Si pendani cette opération il ne s’est point échappé de véhicule, on appliquera immédiatement la fermeture au bitume. S’il en est autrement, on attendra au lendemain que le bitume se soit desséché et ait fait corps avec la lamelle, on enlèvera au moyen d’un dissolvant approprié (eau, alcool, chloroforme) la partie du véhicule qui souille la lame et l’on appliquera la fermeture lorsque toute trace du dissolvant aura disparu.

Si l’on fait usage, ce qui est plus économique, de lamelles carrées, en prendra pour guide dans la fabrication des cellules un parallélogramme, tracé sur la table, ayant les dimensions exactes des couvre-objets ; mais si l’on emploie des lamelles rondes, il faut avoir recours à la tournette. Cet instrument consiste en une planchette de bois à l’extrémité de laquelle est disposé un plateau circulaire en laiton pouvant tourner sur son centre qui repose sur un pivot. Sur cette lame sont tracés plusieurs petits cercles concentriques dont le centre commun coïncide avec le pivot et ayant les dimensions des différentes sortes de lamelles. Pour obtenir la cellule, on fixe d’abord la lame sur le plateau au moyen des valets que porte celuici, puis appliquant la pointe du pinceau chargé de vernis au-dessus du cercle qui représente les bords de la lamelle que l’on emploiera, on imprime au plateau un mouvement de rotation. La lame entraînée se recouvre d’un cercle de bitume ayant exactement les dimensions voulues ; si l’opération doit être répétée, il faudra avoir soin de ne rien changer au centrage de la lame. La fermeture se fera par le même procédé.

1. Ces dernières se trouvent chez Gogit, 17, quai Saint-Michel à Paris.

CHAPITKE JV

DESSIN ET MICKOMETKIE

Toute préparation heureuse doit être dessinée et cela pour ces deux raisons que la préparation ne peut que s’altérer avec l’âge et aussi que les résultats acquis doivent être vulgarisés dans l’intérêt général.

La reproduction de la préparation n’est pas chose aussi difhcile qu’on pourrait le croire au premier abord, attendu que le dessin micrographique se réduit presque entièrement à du trait et que les formes cellulaires sont relativement peu variées. On peut avec un peu de bonne volonté arriver en quelques mois à une perfection assez grande ; nous en avons eu maintes fois la preuve au laboratoire de l’Ecole de pharmacie de Paris.

On usera de papier glacé, non granuleux, résistant : papier double couronne, à aquarelles, carton bristol ; le fond du dessin sera obtenu au moyen de crayons durs 4-5 Faber, HHllH graphite de Sibérie, les traits forts indicateurs del’ombre avec le 2 Faber ou le graphiteB. Les crayons seront taillés longuement et la mine sera tenue très effilée, pour permettre l’obtcntioii de traits fins et serrés bien distincts, par une friction souvent répétée sur un petit morceau de papier de verre 00.

On s’en tiendra d’abord à représenter des éléments isolés et, lorsque plus tard 011 les groupera, on aura bien soin de s’habituer à tenir un compte exact de leurs relations et de leur importance.

L’image aura les dimensions de celle qui est doimée par le microscope, sauf lorsque les traits fins et pressés risquent de se superposer, auquel cas il faudra l’agrandir ; on la diminuera au contraire, lorsque des éléments immenses réclament sans profit une surface énorme. Coiiventionnellemeiit

T E G II N 1 n U G J^: N É R A L E

le soleil se trouve dans Faiigle supérieur gauche du papier; ou eu tiendra compte pour les ombres.

On construit dilïérents appareils à l’usage des personnes tout à fait rebelles au dessin; avant de les indiquer, posons en principe que, quelle que soit leur perfection, ils ne fournissent le plus souvent que des résultatsdéfectueux et que leur rôle se borne à donner les grandes lignes et quelques contours : les chambres claires sont surtout dans ce cas. Les lignes du dessin sont tremblotées et ne peuvent que servir de guide, après avoir été en partie effacées, pour un dessin à main levée.

Uappareil à photographie est appelé à rendre de grands services, mais jusqu’à présent il n^a trouvé d’application heureuse que dans un nombre de cas restreints : Diatomées, levûres, etc. Il réclame une grande habileté, des préparations spéciales, une installation coûteuse. Esquisser le procédé ne conduisant à aucun résultat pratique, je préfère renvoyer le lecteur aux nombreux ouvrages sur la matière publiés par la librairie Gauthiers-Yillars, 55, quai des Grands-Augustins, à Paris G On peut, cependant, tirer bon parti de l’appareil photographique en remplaçant la glace sensible par un verre mince finement dépoli, huilé même au besoin pour lui donner plus de

Fig. 6. — Orand appareil pliotographiqiie du Dr Roux.

douceur, dont la face dévitrifiée est tournée vers l’observateur. L’image étant projetée sur cette face par le verre frontal s’y peindra avec netteté et y sera facilement fixée par le crayon. Je préfère de beaucoup cette méthode à l’emploi de la chambre claire : elle donne des images d’une ampleur con-

I. Nous recommandons surtout Fouvrage de M. Viallanes : La photogra'phie appliquée aux études d'anatomie microscopique. Cet auteur, plus heureux que ses devanciers, déci'it une méthode nouvelle plus exacte et. plus simple que toutes celles qui ont été proposées jusqu’ici, permettant de photographier les différentes parties des larges coupes.

sidérable et parfaitement éclairées ; elle permet aussi, fait très intéressant, de faire varier dans une certaine mesure Tamplification de l’image en éloignant ou rapprochant la glace dépolie du verre frontal et déplaçant rimage dans le même sens par le jeu de la vis micrométrique.

La figure 6 représente le grand appareil photographique construit par Verick sur les indications du D'’ Roux. Cet appareil, monté sur un hanc de fonte qui lui donne toute la stabilité désirable, permet d’obtenir des photographies de 9 cent, sur 12 ou de 13 cent, sur 18. Le dessin parfait nous permet d’en éviter la description.

La figure 7 nous fait connaître un petit modèle de chambre photogra-

Fig. 7. — Appareil photographique petit modèle. A gauche, la chambre noire; à droite, la loupe

pour la mise au point.

phique qui s’adapte tout simplement à la place de l’oculaire. La mise au point exacte se fait en analysant l’image au moyen de la loupe F montée sur un tube à tirage et que l’on règle une fois pour toutes en la fixant dans la position convenable au moyen de la vis latérale.

Les chambres claires sont, en somme, des appareils formés de deux prismes dont on utilise la réflexion totale pour faire coïncider l’image de l’objet avec celle d’un papier placé sur le côté du microscope, coïncidence qui permet de fixer sur le papier, par le crayon, les grandes lignes de l’image.

La chambre claire de Milne-Edivards perfectionnée par Verick (pl. I, lig. 19) répond mot à mot à la conception théorique : elle est formée de deux prismes b, c. Lorsque l’appareil est en place, b plus volumineux déborde le tube et regarde le papier, c beaucoup plus petit obstrue à moitié l’orifice o percé dans le laiton protecteur, orifice dont le centre se trouve exactement dans l’axe du microscope. On fixe l’appareil sur la partie supérieure du tube au moyen de l’anneau a de telle façon que le prisme b soit à 1 droite de l’observateur. La chambre n’est mise en position que lorsque le microscope est au point et après enlèvement de l’oculaire qu’on replace ensuite. Ces opérations, devant se faire sans changer le point, sont facilitées par un mouvement de bascule de la chambre claire sur la charnière x qui lui per-

TEGHMQUE GÉNÉRALE

met (le dégager l’extrémité supérieure du microscope en temps voulu.

Plusieurs précautions sont à prendre afin d’arriver du premier coup à un bon résultat. 1°I1 faut atténuer en partie l’éclairage de l’image: plus sombre, elle se projette mieux sur le fond blanc du papier ; on y parviendra soit au moyen de la glace convenablement manœiivrée, soit en interposant entre l’oculaire et l’œil un verre bleu. 2° Il est souvent difficile d’apercevoir nettement la pointe du crayon ; on la mettra en évidence en l’entourant d’un papier d’un blanc éclatant. 3® La chambre claire ne donne l’image de l’objet avec ses dimensions réelles que lorsque le papier se trouve sur le même plan que l’image; or la position de celle-ci au-dessous du verre frontal varie avec les jeux de lentilles, il faudra chercher cette position par tâtonnements en se guidant sur ces faits que Timage est généralement comprise entre 10 et 20 centimètres et qu’elle est d’autant plus éloignée que le grossissement est plus considérable *. Le papier étant placé au-dessus du point convenable, le dessin sera plus petit que l’image ; placé au-dessous, il sera plus grand et ce fait se produit toujours lorsqiÉon place le papier sur la table, ce que l’on fait habituellement et à tort. 4° Le plan du papier devra être rigoureusement parallèle à la face du prisme qui lui est opposée sous peine de donner des images déformées (le cercle, par exemple, se projette sous forme d'ellipse d’autant plus allongée que la discordance est plus prononcée). Pour assurer le parallélisme, M. Yerick rend le grand prisme h mobile par le moyen d’un bouton e placé dans son axe.

Vi^chamhre d Oherhauser 14,pl.I) cstcomposée de deuxtubes inégaux soudés à angle droit : le plus petit vertical v sert à fixer l’appareil sur le microscope et prend la place de l’oculaire que l’on supprime, il porte à la partie supérieure un prisme p qui réfléchit dans le tube horizontal h les rayons provenant de l’objet. Ces rayons traversent ensuite deux lentilles plan-convexes c, d et arrivent finalement sur un petit prisme p' qui les rend verticaux et les envoie dans l’œil placé au-dessus du cercle qui le protège ^ Le papier étant disposé ici au-dessous du prisme p' est vu directement, contrairement à ce qui se passe dans la chambre claire de Milne-Edwards.

La chambre d’Oberhauser donne des images très réduites ce qui, joint à son prix élevé, doit lui faire préférer soit la précédente, soit la chambre de Nachet, excellent instrument dans lequel un même prisme a taillé convenablement (fig. 25, pl. I) envoie dans l’axe du microscope les rayons p provenant du papier. Un second prisme fixé au premier, empêche la déviation des rayons o, provenant de l’oculaire, qui doivent traverser le premier prisme avant d’arriver à l’œil. Le maniement de l’appareil Nachet est celui