Age de Canimal

L’on choisira de préférence des animaux jeunes, caries animaux jeunes réagissent mieux et plus vite que les animaux âgés. On prendra autant que possible des cobayes et des lapins de 4 à 5 mois.

3° Région où Ion doit inoculer.

Jusqu’en 1881, j’inoculais le lupus dans l’hypoderme du pli inguinal du lapin et du cobaye. Cette technique défectueuse me donna toujours des résultats négatifs.

Des fragments dé lupus insérés sous la peau, disparaissaient sans laisser de traces ou donnaient lieu à une sorte de petit abcès caséeux enkysté, qui finissait par se résorber sans déterminer de tuberculose locale ou générale. A ce moment j’ai cru que le lupus n’était pas de la tuberculose.

La peau et l’hypoderme constituent donc des milieux de culture absolument défavorables au développement des tuberculoses peu virulentes, de la scrofulotuberculose.

L’inoculation dermo-hypodermique doit donc être rejetée. Ce n’est que dans quelques cas très exceptionnels, 2 fois chez 2 jeunes lapins, et 2 fois chez le cobaye que j’ai ultérieurement réussi à produire une tuberculose d’abord locale (sorte de gomme scrofulo-tuberculeuse) aboutissant ensuite à une tuberculose généralisée.

Nous verrons plus loin les conditions particulières qui ont pu avoir une influence sur ces inoculations dermo-hypodermiques positives et tout à fait exceptionnelles.

Lé chambre antérieure de l’œil du lapin constitue un bon milieu de culture. Mais cette inoculation est difficile à faire; en outre il arrive quelquefois que l’introduction de microbes étrangers détermine la fonte purulente de l’œil.

Le grand avantage de cette méthode est qu’on voit la tuberculose de l’iris qui se montre assez rapidement âu bout de 8 à 25 jours environ.

L’inoculation dans le péritoine du cobaye constitue pour moi le procédé de

choix, comme je l’ai dit en 1882(H.Leloir. Recherches sur l’inoculation du lupus. Comptes rendus de la Société de Biologie').

Un hasard d’expérimentation m’a fourni en 1883 une méthode mixte que j’ai désignée sous le nom de méthode hypodermo-épiploigue. (H. Leloir. Recherches sur la nature du lupus vulgaire. — Congrès international des sciences médicales. Copenhague. 1884.) Ayant inoculé dans le péritoine deux cobayes et mes sutures ayant été mal faites, le nodule lupeux sortit du péritoine et se plaça dans l’hypoderme entraînant une lame d’épiploon. Je laissai les choses en état et j’obtins une gomme scrofulo-tuberculeuse de l’hypoderme laquelle s’ulcéra.

Guidé par ce hasard, j’introduisis chez une série d’autres cobayes des fragments de lupus dans l’hypoderme de la paroi abdominale, en leur accolant un lambeau del’épiploon de l’animal. J’obtins ainsi des gommes serofulo-tuberculeuses, des sortes de chancres tuberculeux aboutissant plus tard à la tuberculose généralisée.

4° Choix du nodule à inoculer.

Comme je l’ai dit à la société de biologie en décembre 1882 (H. Leloir, Recherches sur Vinoculation du lupus — Comptes rendus de la Société de biologie), il faut s’assurer autant que possible que le malade sur lequel on recueille le produit d’inoculation est indemne de tuberculose pulmonaire, abdominale on génitourinaire. Il faut choisir un nodule lupeux jeune, en voie d’évolution, non traité, non ulcéré autant que possible, pour éviter l’inoculation des agents de la suppuration (H. Leloir, De T action combinée du bacille de Koch et des agents de la suppuration dans Vévolution du lupus — Médecine moderne, '27 novembre 1890).

5“ Volume du morceau à inoculer.

Le morceau que l’on inocule doit être gros, du volume environ d’un demiharicot. Comme j’y ai insisté en 1884 dans mes cliniques à l’hôpitàl Saint-Sauveur et comme je l’ai publié depuis, il faut avoir soin d’inoculer non pas de petits mais de gros morceaux. J’ai en effet constaté que les résultats négatifs obtenus parfois en inoculant des portions de tissu lupeux, provenaient de ce que le morceau inoculé était trop petit. Le fait n’a rien qui doive nous surprendre, si l’on tient compte de la très minime quantité de bacilles de Koch qui se trouve d’ordinaire dans le lupus vulgaire. On conçoit très bien que, en inoculant un plus gros morceau de lupus, l’on a plus de chances d’inoculer plus d’agents de la tuberculose, de même que, ainsi que je l’ai fait remarquer familièrement dans mes cliniques, en prenant une grosse cuillerée de potage au vermicelle, l’on a plus de chances de

d’inoculation est ici nécessairement petit. L’on ferme l’ouverture palpébrale pendant trois à cinq jours en suturant les paupières, et l’on fixe en avant de l’œil, d’après la méthode de Cl. Bernard, l’oreille du lapin pendant le même laps de temps. Au bout de trois à cinq jours au maximum, l’on peut sans inconvénient sectionner les points de suture et observer ce qui se passe dans la chambre anté-

c, — L’inoculation intra-péritonéale est faite d’après la technique appliquée par Hippolyte Martin à propos de la tuberculose en général et qui se trouve exposée tout au long à la page 105 de la thèse de Renouard. Au bout de cinq jours au maximum, la cicatrisation des parois abdominales est complète.

d. — Si l’on veut employer ma méthode dermo-épiploïque, on procédera de la façon suivante : On incise la paroi abdominale comme dans la méthode intra-péritonéale mais suivant l’étendue d’un demi-centimètre environ. L’on saisit délicatement avec une pince l’épiploon, et l’on fait sortir hors de la cavité abdominale un lambeau épiploïque long de un à deux centimètres environ. L’on a eu soin pendant toute l’opération d’empêcher la hernie des intestins en maintenant dans la boutonnière une baguette de verre ou de métal stérilisée.

L’on décolle la peau au niveau de l’une des lèvres de la plaie au moyen le la sonde cannelée et l’on constitue ainsi une petite poche dans l’hypoderme. G’est dans cette poche que l’on enfonce le nodule d’inoculation de telle façon qu’il se

trouve placé à un centimètre environ de l’ouverture de la boutonnière. L’on ferme laboutonnièremusculairehermétiquementavec deux ou trois pointsdesuture comme pour l’inoculation intra-péritonéale, sans avoir crainte de passer l’un des fils à travers l’épiploon hernié. Puis au moyen d’un ou deux points de suture, l’on réunit ensemble l’épiploon hernié et le nodule d’inoculation qu’on lui a accolé. Le nodule d’inoculation ainsi que l’épiploon qui l’englobe plus ou moins, se trouvent fixés à la paroi abdominale au moyen de un ou deux points de suture. Ces différentes opérations faites, l’on ferme la boutonnière cutanée comme dans l’inoculation intra-péritonéale. La plaie se trouve ainsi complètement fermée et ne tarde pas à se cicatriser.

7° Animal témoin.

L’on inoculera autant que possible deux animaux lesquels seront placés en cage avec un animal témoin non inoculé.

8* Conditions hygiéniques.

On ne doit jamaisplacer les animaux dans des cages contaminées ou à côté d’animaux tuberculeux.

Les cages ayant renfermé un animal inoculé devront être absolument stérilisées avant de recevoir de nouveaux hôtes.

Les cages devront être grandes et bien aérées. Dans les portes de mes cages, se trouve pratiquée une grande ouverture sous forme de fenêtre fermée par derrière par un treillis en toile métallique à larges mailles, permettant d’y adapter pendant l’hiver un cadre vitré. Il existe en outre une fente d’aération au niveau de la partie inférieure de la porte.

Les cages devront être placées dans un espace vaste et en plein air/ Jamais l’on ne devra placer les cages dans les caves ou dans des réduits malsains comme je l’ai vu faire quelquefois. Elles devront être à l’abri de la pluie, du froid. Elles devront être disposées de façon à ce que la stagnation des liquides et matières fécales ne s’y produise pas. L’on devra donner aux animaux une litière de paille fraîche très, épaisse.

Les cages devront être nettoyées complètement et la litière renouvelée tous les huit jours. La nourriture des animaux devra être abondante et choisie. On leur donnera de bons légumes et du pain.

De pareilles conditions hygiéniques sont quelquefois difficiles à réaliser et la nourriture des animaux coûte très cher; mais l’observation de ces règles hygiéniques est absolument nécessaire. Avec mon admirable installation de l’hôpital Saint Sauveur, que je dois à la bienveillance des Hospices Lillois, je ne constate plus les tuberculoses spontanées que j’ai observées quelquefois quand j’inoculais à Paris et

peut-être n’avait pas eu le temps de se développer chez le sacrifié. L’on pourra alors tuer le premier cobaye au bout de six semaines environ.

Eu résumé, plus le nodule d’inoculation est gros, moins il faut attendre. En général, lorsque l’inoculation (intra-péritonéale) est bien faite, le cobaye est nettement tuberculeux au bout de six semaines à deux mois, il l’est certainement au bout de trois à quatre mois, sauf dans des cas tout à fait exceptionnels où il faut attendre jusqu’à quatre à six mois.

Certains lupus peuvent produire rapidement (entrois à quatre semaines) une tuberculose étendue chez le cobaye (inoculation intra-péritonéale). Ils peuvent déterminer la tuberculose du lapin et du cobaye par inoculation sous-cutanée (2 cas sur 200 cas). Ces lupus sont anormalement riches en bacilles et constituent de véritables tuberculoses franches du tégument.

10’ Des inoculations en série.

La méthode créée par Hippolyte Martin pour la tuberculose en général doit être appliquée aux inoculations de tout produit scrofulo-tuberculeux. C’est ainsi que les viscères (rate, foie, reins, épiploon ou ganglions) du cobaye rendu tuberculeux par l’inoculation du produit scrofulo-tuberculeux, seront inoculés dans le péritoine d’un deuxième cobaye. Les viscères tuberculisés de celui-ci seront inoculés à leur tour à un troisième cobaye et les viscères de ce troisième cobaye inoculés à un quatrième cobaye.

La tuberculose de l’œil du lapin sera de la même façon inoculée en série dans le péritoine des cobayes. Depuis 1884, je m’arrête en général au quatrième terme de la série, quelquefois même au troisième terme. Lorsque les inoculations

milieu de culture pour le virus scrofulo-tuberculeux, ainsi que je l’ai démontré depuis 1882.

En effet, comme je le répétais encore en 1888 au Congrès de la tuberculose, ces’mêmes produits lupeux inoculés cher le lapin dans un milieu de culture favorable (la chambre antérieure de l’œil du lapin) donnent la tuberculose à cet animal.

D’autre part, comme je l’ai démontré depuis 1878-79, le lupus inoculé dans l’hypoderme du cobaye ne donne pas la tuberculose à cet animal, tandis qu’inoculé dans le péritoine, bon milieu de culture, il produit presque infailliblement la tuberculose.

Mais, chose importante, des morceaux de viscères tuberculeux du cobaye (1" série), rendu tuberculeux par inoculation intra-péritonéale de lupus, ne donnent pas la tuberculose, si on les inocule sous la peau d’un autre cobaye, malgré une attente de plusieurs mois (10 cas).

En résumé, le lupus produit chez le lapin et le cobaye, quand on l’inocule dans un milieu approprié (péritoine du cobaye, chambre antérieure de l’œil du lapin), une tuberculose incontestable, comme en témoignent les inoculations en série et la recherche des bacilles. — L’on ne peut donc, en ce qui concerne le lupus, distinguer ce produit scrofulo-tuberculeux de ceux de la tuberculose franche, en disant qu’il n’est pas inoculable au lapin, mais qu’il est inoculable dans l’hypoderme du cobaye.

Mais cette tuberculose est peu virulente, puisqu’elle ne peutprendre ni chez le cobaye ni chez le lapin dans un milieu où prend d’ordinaire la tuberculose franche, c’est-à-dire dans l’hypoderme.

Bien plus, malgré son passage dans l’animal (péritoine du cobaye), cette tuberculose n’accroltque très difficilement sa virulence.

ulose du lupus, ut en général, àrloing, Koch,

quement les viscères de l’animal inoculé, ce qui est toujours utile pour se rendre compte de la richesse en bacilles de ces tuberculoses d’inoculation et ce qui peut au besoin servir pour les distinguer des pseudo-tuberculoses décrites par Waldenburg, H. Martin, Comil, Babès, etc.

Le lupus est donc une tuberculose locale.

Mais cette variété dé tuberculose présente quelque chose de spécial. En effet, elle n’arrive pas à tuberculiser le lapin, à moins que l’on n’inocule cet animal dans la chambre antérieure dé l’œil. Elle n’arrive pas à tuberculiser le cobaye, à moins que l'on n’inocule cet animal dans le péritoine ou d’après ma méthode dermo-épiplolquei

En outre, pour réussir, il faut inoculer de gros morceaux de lupus.

Enfin, cette tuberculose consécutive à l’inoculation de produits lupeux évolue lentement.

Le lupus doit donc être considéré comme une tuberculose tégumentaire peu virulente, peu riche en agents pathogènes, en général distincte de la tuberculose vulgaire classique par Ses caractères spéciaux qui peuvent se résumer

Petit nombre de bacilles ;

Nécessité d’inoculer de gros morceaux ;

Nécessité d’inoculer dans un milieu favorable ;

Nécessité d’inoculer un animal favorable ;

Lenteur de l’infection de l’animal.

Ces caractères spéciaux, ce peu de virulence de là variété de tuberculose tégumentaire désignée sous le nom de lupus vulgaire, dépendent-ils seulement, comme je l’ai écrit depuis 1883 et comme l’a ultérieurement dit Nbcârd, de ce que le lupus renferme peu de bacilles ? Faut-il, au contraire, admettre, comme Arloing semble vpuloir le supposer, que la scrofulo-tüberculose dont le lupus est une des branches, est occasionnée par un virus spécial ou tout au moins distinct du virus tuberculeux ordinaire, par les qualités de sa virulence (i).

Les faits que j’ai observés me portent plutôt A admettre que, dans l’état actuel de la science, le lupus doit être considéré comme une tuberculose peu virulente, mais en somme comme une tuberculose.

Comme je l’ai dit, il ne semble pas qu’ü y ait de différence essentielle entre la scrofulo-tuberculose et la tuberculose vraie. Ainsi que je l’ai écrit en 1882 c’est :

Affaire de technique : placer le morceau inoculé dans des conditions favorables au développement du; virus (chambre antérieure de l’œil du lapin, péritoine du cobaye) ;

J’ai inoculé des parcelles de cette substance tuberculisée dans l’hypoderme de lapins et de cobayes (3 lapins, 5 cobayes). Toutes ces inoculations-ont été négatives.

De minimes parcelles de la substance introduites dans le péritoine de 3 cobayes m’ont donné dans 2 cas (au bout de ô mois dans un cas, de 4 mois dans l’autre, une tuberculose généralisée ayant pour point de départ l’abdomen.

Chez,2 cobayes, ayant inoculé une quantité beaucoup plus considérable (masse grosse comme un haricot) de cette substance tuberculeuse diluéé, j’ai produit chez ces 2 cobayes une tuberculose classique des viscères abdominaux et du poumon au bout de 5 semaines chez l’un et de 6 semaines chez l’autre.

basées sur un nombre de faits suffisamment nombreux et suffisamment précis, venaient corroborer les études précédentes, encore bien insuffisantes d’ailleurs, ces faits viendraient encore à l’appui de l’opinion que nous émettions plus haut, à savoir qu’il n’y aurait entre la scrofulo-tuberculose et la tuberculose, au point de vue de la virulence, qu’une différence quantitative et non qualitative.

Ce que je viens de dire est applicable à toutes les variétés de lupus, au lupus vulgaire classique de la peau, ainsi qu’au lupus des muqueuses dont je crois avoir également démontré le premier la nature tuberculeuse par la méthode des inoculations expérimentales.

Il en est de même de ces variétés particulières de lupus que j’ai décrites en 1888 au Congrès de la Tuberculose sous le nom de Variétés atypiques du lupus vulgaire, à savoir :

Le lupus vulgaire colloïde,

Le lupus vulgaire myxomateux,

Le lupus vulgaire scléreux et demi scléreux,

Et enfin le lupus vulgaire érythématoïde dans ses diverses variétés. (H. Leloir, Le lupus vulgaire érythématoïde. — Archives de physiologie , 1891.)

En outre les ganglions où aboutissent les lymphatiques partant du foyer lupeux donnent lieu, dans certains cas. comme je l’ai démontré, à une tuberculose des plus nettes, quand on les inocule dans le péritoine des cobayes ou dans la chambre antérieure de l’œil du lapin. Ces adénopathies suppurées ou non, en général non suppurées, sont donc bien, dans certains cas, dénaturé serofulo-tuberculeuse, comme je l’ai prouvé en 1889, contrairement à l’opinion dé certains auteurs.

L'œdème dur ou demi dur, d’origine en général lymphangitique, qui compliqué quelquefois le lupus, et en particulier le lupus des membres inférieurs et qui aboutit-au pseudo-éléphantiasis scrofulo-tuberculeux, doit être dans certains cas considéré comme de nature tuberculeuse, ainsi que l’ont démontré pour un certain nombre d’observations mes inoculations et celles de Doutrelepont.

Dans des cas exceptionnels, comme je l’ai dit plus haut, le lupus est très riche en bacilles. Il est parfois inoculable dans l’hypoderme du cobaye et même du

Il prend alors très vite dans le péritoine du cobaye.

Dans ces cas exceptionnels, les inoculations donnent des résultats analogues à ceux que l’on obtient en inoculant la tuberculose franche du tégument.

Mes expériences me portent à considérer les gommes scrofulo-tuberculeuses (dermiques, hypodermiques et ganglionnaires) comme des produits tuberculeux plus virulents que le lupus, bien que moins virulents que la tuberculose vraie. En effet, quand on inocule des parcelles de gommes dans le péritoine de cobayes, l’on obtient en général plus rapidement une tuberculose généralisée que lorsqu’on inocule du lupus.

D’autre part, comme l’ont démontré Villemin, Colas (de Lille), Lannelongue,

-tuberculeuses seraient inoculables souvent dans lans l’hypoderme du lapin.

terme le moins virulent et la tuberculose franche des muqueuses et de la peau le terme le plus virulent: lupus; gommes scrofulo-tubereuleuses tégumentaires ; tuberculose vraie des téguments.

Pour terminer, je dois noter, en outre, que les animaux inoculés avec du lupus ne sont pas vaccinés contre la tuberculose, ainsi que je l’ai pu constater dans les expériences nouvelles entreprises après la communication que j’avais faite sur cette question en 1883 avec Corail à la Société de Biologie et après les recherches faites à ce sujet par Babès.

Je dois remarquer en outre que, dan que la tuberculose locale, produite par s’éteindre, se guérir sur place, sans avoi

Le diagnostic bactériologique est souvent très difficile, étant donné en général le petit nombre de bacilles que renferme le lupus et la grande quantité de coupes qu’il faut faire pour les trouver.

Les inoculations expérimentales bien faites pourront, dans ces cas, enlever

Elles pourront montrer parfois que certaines ulcérations, consécutives au développement d’un lupus cicatrisé ou non, sont non pas d’essence tuberculeuse, mais déterminées, comme je l’ai montré, par les agents de la suppuration' {H. Leloir, De T action combinée du bacille de Koch et des agents de la suppuration dans l’évolution du lupus (.Médecine Moderne, 27 décembre 1890) ;Des affections cutanées ' pures ou hybrides déterminées par rinoculation des agents de la suppuration (Leçons recueillie» par le D'Lespinne) ; Journal des maladies cutanées et syphilitigues 1891).

Je pourrais citer nombre d’exemples pour démontrer que dans le cas où le diagnostic entre la scrofulo-tubereulose et d’autres affections (la syphilis en particulier) est douteux, l’inoculation est capable de lever les doutes plus ou moins promptement. 1