QUANTITÉ

d^adrénaUDe en gr.

poar 1000 kU.

d'animal.

capsule gauche ; D, capsule droite ; M, moyenne des

En examinant ces chiffres, noiis voyons d'abord que les deux capsules d'un même animal contiennent la même quantité d'adrénaline; les différences observées ont toujours été très faibles. It n^y a pas de proportion entre le poids de la capsule et la quantité d'adrénaline qu'elle renferme.

Les capsules appartenant à des animaux d'une même espèce et offrant à peu près le même poids renferment des quantités de substance active notablement voisines. En tout cas cette diflérence n'atteint jamais le double. Je n'ai jamais constaté, en substance active, les grandes différences de quantité que signalent Gluzinski, Gourfein, etc.

Le rapport existant entre la quantité de substance active et le poids de l'animal varie chez les différentes espèces animales, mais ces variations ne sont pas très considérables. En plaçant les animaux que j'ai examinés par ordre de leur richesse en adrénaline, on peut dresser le tableau suivant :

POIDS «..«»« ..,».w« de l'adréDalino en gammes

EBPÉci AHiMALB ^^^^ j^^O kil. d'ammal

Mouton 0,115 à 0,121 (moyennes)

Cheval 0,0816 à 0,120

Chien 0,0666 à 0,106

Porc 0,078 à 0,084 (moyennes)

Bœuf 0,074 à 0,077 (moyennes)

Ces chiffres démontrent, en outre, que la nature de l'alimentation ne paraît pas jouer un rôle appréciable relativement à la quantité d'adrénaline contenue dans les capsules. Le chien, Carnivore, tient en effet le milieu entre le mouton et le boeuf herbivores.

Comparaison entre les propriétés colorantes, toxiques,

ET LES modifications DE LA PRESSION ARTERIELLE PRO- DUITES PAR LA SUBSTANCE ACTIVE DES CAPSULES SURRÉNALES.

(Séance du 19 Juillet 190â)

Dans une note précédente (24 mai 1902), j'ai donné une méthode colorimétrique de dosage de l'adrénaline. Dans la thèse de M. Taramosio sont rapportés les résultats d'expériences relatives à la toxicité de cette substance.

J'ai ensuite fait une série de recherches destinées à déterminer si la toxicité de l'extrait des capsules surrénales est bien due à l'adrénaline. Dans ce but, j'ai dosé l'adrénaline dans l'extrait aqueux des capsules surrénales, et j'ai vérifié si la toxicité de cet extrait correspondait à la quantité d'adrénaline trouvée par le dosage colorimétrique.

Les capsules surrénales de bœuf on de cheval étaient prises immédiatement après la mort de l'animai, broyées on additionnées de qaatre à cinq fois lear volume d'eaa. Le liquide épais obtena ainsi était centrifugé pendant deux henres environ, pais filtré sur du sable. Le filtrat, sans être tout à fait limpide, n'est cependant plus très trouble.

On commence par doser la quantité d*adrénaltne existant dans ce liquide par la méthode colorimétrique au Cl'Fe, et on procède ensuite à rinjection de cet extrait.

Les expériences ont été faites sur des cobayes. Je rappelle que chez cet animal l'adrénaline injectée sons la peau à la dose de gr. 002 par kilogramme d'animal n'est jamais mortelle; à la dose de gr. 004 elle est rarement mortelle ; à la dose de gr. 010 elle est toujours mortelle au bout de très peu de temps (une demi-beure à trois ou quatre heures), la mort étant occasionnée par un œdème aigu du poumon.

Les résultats, que j'ai obtenus avec l'extrait aqueux des capsules surrénales, ont été les mômes que ceux que je viens de résumer.

Cinq cobayes ont reçu une injection hypodermique d'extrait aqueux de capsules surrénales correspondant à gr. 002 d'adrénaline par kilogramme d'animal. Tous ont survécu.

Six cobayes ont reçu une injection d'extrait correspondant à gr. 004 d'adrénaline. Deux sont morts, l'un dans l'espace de trois heures. L'auire dans l'espace de quatre heures et demie. Quatre ont survécu.

Quatre cobayes ont reçu une injection d'extrait correspondant à gr. 010 d^adrénaline. Tous sont morts dans un espace de temps variant entre vingt- cinq minutes et deux heures et demie par œdème aigu du poumon.

Il résulte de cette première série d'expériences que 2a tooddté de Vextrait de capsules surréncUes est dite exdtdsivement^ ou du moin 61 une manière - très préporidérante, à V adrénaline qu'il œntient. (L'adrénaline se trouve naturellement dans les capsules surrénales à l'état de sels.)

Dans une seconde série d'expériences, j'ai recherché si l'élévation de la pression artérielle produite par l'extrait des capsules surrénales est due exclusivement aux sels d'adrénaline.

J'ai commencé par étudier les changements de pression artérielle prodnits par l'injection intra- veineuse de petites quantités d'adrénaline. Les expériences ont été faites sur des lapins de 2 kilogrammes environ.

L'extrait des capsules surrénales produit, comme on le sait, en même temps qu'une élévation de pression, un ralentissement du pouls, lorsque les nerfs pneumogastriques sont intacts. Ce ralentissement du pouls gène la comparaison des tracés entre eux. Pour éviter ce ralentissement, les lapins recevaient préalablement une injection intra-veineuse de 2 milligrammes de sulfate d'atropine.

Les injections d'adrénaline ou d'extrait de capsules étaient faites dans la jugulaire toujours à la dose de 2 centimètres cubes de liquide pour chaque injection.-

Dans ces expériences, il est indispensable, d'observer les précautions suivantes : i^ la solution d'adrénaline ou l'extrait de capsules doivent être frais et suffisamment concentrés, 1 p. 1000 d'adrénaline, par exemple ; â« les dilutions de ces solutions dans l'eau salée doivent être faites au moment môme de l'injection. On sait, en effet, que l'adrénaline en solution neutre s'altère lentement. Or, si cette altération ne change pas d'une manière appréciable le titre d'une solution concentrée, elle est, par contre, très importante à considérer lorsque la solution est très diluée (i p. 500.000, par exemple).

Les injections des mêmes quantités d'adrénaline ne produisent pas des changements de pression constamment identiques. On constate des différences d'animal à animal, et aussi chez le môme animal dans la suite d'une môme expérience. Ces différences toutefois ne sont pas très considérables et les résultats restent comparables.

L'injection d'une dose de gr. 000.000.125 d'adrénaline par kilogramme d'animal ne modiûe pas la pression.

Une dose de Ogr. 000.000. 2o quelquefois ne produitpas d'effet ; d'autres fois elle amène une augmentation de 1 centimètre environ pendant une dizaine de secondes au maximum.

Une dose de gr. 000.000.5 produit le plus souvent une augmentation de 1 centimètre environ pendant dix ou vingt secondes ; d'autres fois l'élévation de pression est un peu plus marquée .

Une dose de gr. 000.001 produit toujours une élévation de pression bien appréciable, de 2 à 4 centimètres ; mais cette élévation dure peu de temps, et au bout d'une demi-minute, la pression est de nouveau normale.

Une dose de gr. 000.002 produit le plus souvent une élévation de pression de 3 à 5 centimètres.

Finalement une dose de gr.000.004 produit une élévation de pression de 5 à 6 centimètres, et la pression reste élevée assez longtemps; au bout de trente secondes, elle est encore de 3 ou 4 centimètres audessus de la normale.

L'extrait aqueux des capsules surrénales de bœuf ou de cheval, dans lequel la quantité d'adrénaline avait été dosée par ma méthode colorimétrique, a produit des changements de pression tout à fait analogues aux précédents. Je n'aurais qu'à répéter les chiffres que je viens de donner.

Il résulte de cette seconde série d'expériences que les ^nodificatiom de pression, produites par les injections intra-veineuses ^extrait de capsules surrénales, sont dues exclu^ivemeni, ou du moins d\ine manière très prépondérante, à V adrénaline que ce extrait contient.

Influence des injections intraveineuses continues d'adrénaline sur la survie des animaux décapsulés.

(Séance du 18 Octobre 1902)

L'action si marquée de l'extrait des capsules surrénales (ou de l'adrénaline) sur la pression artérielle, sur la respiration, sur le cœur et sur le tonus du nerf pneumogastrique, tait surgir l'idée qu'une des fonctions principales des capsules mvvénales est de verser dans le sang l'adrénaline nécessaire pour pour maintenir la pression élevée (Szymonowicz, Cybulski, etc-)-

On sait d'autre part que les injections sous-cutanées d'adrénaline n'ont pas d'influence appréciable sur la pression artérielle. On pourrait supposer que c'est pour cette raison que les injections sous-cutanées d'extrait de capsules surrénales chez les animaux décapsulés n'ont donné que des résultats peu appréciables (Brown-Séquard, Abelous et Langlois, etc.) ou nuls (Dubois, Fabazzi).

Il était donc justifié d'injecter l'adrénaline directement dans les veines. Mais on sait que l'élévation de la pression et le ralentissement du pouls produits par l'injection intraveirieuse d'adrénaline sont irès passagers. Pour maintenir constamment la pression élevée, il fallait donc pratiquer l'injection d'une manière continue ; de cette façon on se rapprocherait aussi davantage de la prétendue sécrétion d'adrénaline par les capsules surrénales.

Strehl et \Veiss (1901) ont déjà essayé cette récherche chez le lapin. Ds ont toujours injecté la même quantité d'extrait capsulaire; l'injection n'a jamais duré au delà de vingt heures à cause de la coagulation du sang au niveau de la canule. Ces auteurs ont constaté que, dans quelques cas, les sj^raptômes résultant de la décapsulation n'avaient pas encore apparu au

moment où les lapins non traités étaient déjà morts (c'est-àdire après vingt heures). Mais nous savons par les recherches de Huitgren et Andersson et celles d'autres expérimentateurs que souvent les lapins décapsulés survivent pendant cinq ou six jours sans traitement, ce qui fait que les expériences de Strehl et Weiss ne sont pas concluantes,

Mes expériences ont été faites sur le chien. Pour éviter la coagulation du sang au niveau de la canule, on introduisait celle-ci dans la veine fémorale à 2 ou 3 centimètres au-dessous de l'arcade crurale. A ce niveau la veine fémorale présente des valvules qui empêchent le sang de venir en contact avec la canule et on évite ainsi la coagulation. Toutefois, au bout d'une douzaine d'heui'es la paroi de la veine devient perméable au liquide, et celui-ci suinte dans la plaie. Pour cette raison, on changeait la canule de place après une dizaine d'heures et on ' l'introduisait dajis la veine fémorale de l'autre membre.

La quantité de liquide injecté était dans la proportion de 1 centimètre cube par heure et par kilogramme d'animah Un chien de 10 kilos aurait donc reçu 240 centimètres cubes de liquide par jour.

Le liquide avait la composition suivante : CINa, 9 p. 1000 ; ac. acétique 1/3000 (pour empêcher l'oxydation de l'adrénaline) ; des quantités variables d'extrait capsulaire ou d'açlrénalinepure. Les solutions d'adrénaline ont varié de 1/5000 à 1/500.000. Pour chaque dose, j'ai fait une expérience avec l'adrénaline pure et une autre avec l'extrait capsulaire de bœuf, dans lequel l'adrénaline avait été dosée par ma méthode colorimétrique.

Pour procéder à l'extirpation des capsules surrénales, on ouvrait l'abdomen par une incision de la ligne blanche, le chien étant maintenu dans la narcose par l'éther.

Après avoir suturé la plaie abdominale, l'animal était gardé dans l'appareil à contention couché sur le côté, et on commençait l'injection du liquide dans la veine.

Voici les résultats principaux de mes expériences :

1* La mort a été très rapide (de quatre à six hetfres) dans les cas où l'animal se débattait et criait, c'est-à-dire lorsqu'il se fatiguait. Le cœur s'arrête presque subitement; on voit l'animal qui tout à l'heure criait, présenter des convulsions, faire encore quelques derniers mouvements respiratoires, perdre les réflexes, etc. Si on injecte alors une quantité assez considéra-

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ble d'adrénaline (1/2 milligramme par exemple) et que l'on fasse quelques compressions du thorax, le cœur se remet à battre avec énergie et l'animal se rétablit. Après une heure oa deux on observe un nouvel arrêt du cœur et ainsi de suite ;

2^ Si le liquide servant à l'injection continue renferme moins de 1 p. 100.000 d'adrénaline, on n'observe pas de changements dans le nombre et dans 1 énergie des battements du cœur, lorsqu'on établit l'injection ou lorsqu'on la suspend. Si le liquide renferme au minimum 1 p. 100.000 d'adrénaline, le pouls se ralentit et les battements du cœur sont plus énergiques au commencement; mais après quelques heures l'injection ne parait plus produire aucune action et il faut élever la dose d'adrénaline si l'on veut de nouveau obtenir les mêmes ettèts sur le cœur ; *

3° La survie n'a jamais été supérieure à vingt heures, quelle que fût la dose d'adrénaline ou d'extrait capsulaire injectée. Avec des solutions d'adrénaline de 1/500.000. de 1/200.000, de . 1/100.000, de 1/50.000, de 1/20.000, j'ai obtenu des survies allant jusqu'à vingt heures. Avec des solutions de 1 p. 10.000 et 1 p. 5.000, la survie maxima a été de dix heures.

Les injections intraveineuses continues d'adrénaline ou d'extrait capsulaire sont donc inefficaces pour prolonger la vie de l'animal décapsulé si la quantité d'adrénaline est faible; elles accélèrent la mort si la quantité d'adrénaline est élevée.

PrÂSENCE d'adrénaline dans le sang d'animaux NOaMAUX.

Son dosage.

("Séance du 23 Octobre 4902)

L'élévation de la pression sanguine, produite par une injection intraveineuse d'extrait capsulaire ou d'adrénaline, ne dure jamais, comme on le sait, au delà de trois ou quatre minutes. Tous les auteurs (Oliver ^ Schâfer, Langlois, etc.) sont d'accord pour admettre que l'adrénaline injectée disparaît rapide-

ment du sang. On devrait donc en conclure qu'à l'état normal, le sang ne renfenne pas d'adrénaline.

Or, les expériences dont je vais donner le résultat prouvent au contraire que le sang normal contient toujours de l'adrénaline, bien qu'à des doses très faibles.

L'injection de 2 ou 3 centimètres cubes de sang ou de sérum de chien, pratiquée dans la veine jugulaire d'un lapin, produit quelquefois chez ce dernier une très légère augmentation de pression. Mais cette élévation manque souvent, et si elle a lieu, on peut l'attribuer à l'introduction de substances tout autres que l'adrénaline. Pour produire des effets plus appréciables, il fallait concentrer le sérum sans détruire l'adrénaline. Voici comment j'ai procédé.

On prélève chez un gros chien,- à jeun depuis vingt-quatre heures, 200 centimètres cubes de sang artériel. On centrifuge rapidement. On décante le sérum et on le neutralise par l'acide acétique. On ajoute encore de l'acide acétique de manière à avoir une acidité de 1 pour 1000 en acide acétique. On ajoute deux volumes d'eau distillée.

Le liquide est porté à 85 degrés environ au bain-marie. Il se forme un gros précipité. On filtre. Le filtrat est additionné d'acide acétique de manière à obtenir une acidité de 2 p. 1000. On*concentre dans le vide à 50 degrés environ jusqu'au quinzième du volume du liquide, ce qui correspond à un cinquième du volume primitif du sérum. On filtre. On neutralise par le carbonate de sodium. C'est le liquide ainsi obtenu qu'on injecte dans la jugulaire du lapin.

L'injection de 1 centimètre cube de ce liquide par kilogramme d'animal produit toujours une élévation nette de la pression.

Il fallait démontrer que cette élévation de pression était bien due à l'adrénaline. En voici les preuves :

Le liquidé neutralisé exposé aux rayons du soleil perd rapidement son action sur la pression ; après une demi-heure ou une heure il est devenu complètement inactif. A la lumière diffuse, le liquide neutre garde plus longtemps ses propriétés ; il faut six heures au minimu pour qu'il ait perdu toute action appréciable sur la pression. Conservé dans ^l'obscurité, il garde encore ses propriétés après vingt-quatre heures.

Alcalinisé légèrement par du carbonate de Na et exposé à la lumière diffuse, ce liquide ne perd son action sur la pression

qu'après deux ou trois heures. Fortement alcalinisé (1 pour 100 de CO*Na* par exemple), il a perdu complètement cette propriété après une demi-heure. Ce liquide se comporte donc absolument comme une solution étendue d'adrénaline dans l'eau distillée ou dans l'eau salée.

Je ferai remarquer en passant que l'adrénaline se conserve longtemps inaltérée dans le sérum malgré l'alcalinité de celuici. Ainsi l'adrénaline additionnée au sérum dans la proportion de 1 pour 1.000.000 garde intactes ses propriétés sur la pression après quarante-huit heures. Après avoir démontré l'existence d'adrénaline dans le sang, j'ai cherché à en doser la quantité.

Dans ces recherches, je ne pouvais pas me servir de ma méthode colorimétrique au chlorure ferrique. parce que celle-ci n'est pas assez sensible. J'ai dosé la quantité d'adrénaline existant dans le liquide obtenu par la concentration du sérum sanguin, en comparant son action sur .la pression avec celle produite par une solution titrée d'adrénaline.

Pour ces expériences, on choisit des petits lapins qui sont plus sensibles que les gros. Chez les lapins de 1300 à 1500 grammes une injection dans la jugulaire de 1,5 centimètre cube d'adrénaline au titre de 1/4.000.000 produit une élévation de pression bien appréciable (de 2 centimètres et demi environ) ; au titre de 1/8.000.000 on a une élévation de 1 centimètre environ.

On injecte d'abord 2 milligrammes d'atropine ; les battements du cœur sont plus réguliers et les tracés deviennent mieux comparables. On prend ensuite les tracés qui correspondent aux injections de 1,5 centimètre cube de solution d'adrénaline à 1/1.000.000, à 1/2.000.000, à 1/4.000.000, à 1/8.000.000. On injecte alors 1,5 centimètre cube du liquide obtenu par la concentration du sérum, et on compare l'eflet obtenu avec celui produit par Tes injections précédentes d'adrénaline.

Le liquide provenant de la concentration du sérum de chien a toujours donné des tracés correspondant aux solutions d'adrénaline au titre de 1/2.000.000 ou de 1/4.000.000. Pour obtenir ce liquide, le sérum a été concentré à 1/5 ; le sérum normal du chien renferme donc V adrénaline dans la proportion de 1/10,000.000 à 1/20.000.000.