Extraction etjpropiétés chimiques de V adrénaline

Takamine ^ a donné le nom d'adrénaline au principe actif des capsules surrénales préparé à l'état de base.

Ce principe actif avait été préparé précédemment à l'état de composé ferrique parFttrth(suprarénine), et à l'état de composé benzoylique par Abel (épinéphrine). FrânkeP, en 1896, avait déjà essayé d'isoler la substance active des capsules surrénales et avait obtenu un corps sirupeux, auquel il avait donné le nom de sphygmogénine. Mais il ne s'agissait évidemment que d'un extrait plus ou moins purifié et non d'une substance chimiquement définie.

Fùrth', en 1897, prépare la substance active des capsules surrénales sous forme d'un composé ferrique, se présentant sous l'aspect d'une poudre brun-rouge. En 1900*, il donne au corps préparé par lui le nom de auprarénine et, tandis que dans son premier travail il considérait celle-ci comme se rapprochant de la pyrocatéchine,iir envisage comme étant la tétrahydrodioxypiridine C*H'NO* ou bien une dihydrodioxypiridine C^H'NO'. Dans un travail plus récent *, il perfectionne son procédé et obtient une combinaison ferrique de la suprarénine sous forme d'une poudre amorphe violette, stable. L'analyse de cette subs-

* Takamine. The isolation of the active principle of the suprarenal gland, Journ. of Physiol. XXVII, p. 29, 1901.

2 FRiENKEL. Beitrôge zur Physiologie und physiologischen Chemie der Nebennieren, Wien. med. Bldtter, 1896, n°* 14, 15 et 16.

3 PuRTH. Zur Kenntniss der brenzkatechinaenlichen Substanz der Nebennieren, Zeitsch. fiXr physiol. Chem., XXIV, 1897, p. 142.

* FuRTH. Zur Kenntniss der brenzcatechinaenlichen Substanz der Neben nieren, Ibid., XXIX, 1900, p. 105.

5 FuRTH. Zur Kenntniss des Suprarenins, Hofmeister's Beitr» s. chetn, Phys. und PathoL, 1, 1901, p. 243.

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tance lui adonné, après éloignement du fer par THCl, la composition suivante : C = 69,65, H = 4,86, Az de 1,88 à 2,01 7u. Il déclare que cette substance est la même que Tadrénaline obtenue par Takamine, mais en realité le résultat de cette analyse élémentaire s'éloigne sensiblement de celui donné par Takamine.

Abel et Crawford S en 1897, avaient précipité la substance active des capsules surrénales en traitant l'extrait aqueux de cette glande par le chlorure benzoylique et l'hydrate de sodium. Ces auteurs préparaient ainsi cette substance sous forme d'un composé benzoylique. En 1899, Abel ■ donne à ce composé le nom à.'^épinéphrine et il lui attribue la formule brute suivante : C*'H**NO*. En enlevant à ce benzoyle d'épinéphrine le radical benzoyle C^H*0 et en restituant l'atome d'H qui a été déplacé par le radical, la base aurait pour formule C^^H**NO'.

D'après Abel, l'épinéphrine peut former différents sels actifs, tandis que la base ne peut se conserver à l'état libre et se transforme en une substance sans action sur la pression.

En 1901, Takamine prépare son adrénaline à l'état de base et lui attribue comme formule brute C'"H**NO'. Aldrik' prépare l'adrénaline d'après le procédé de Takamine, en fait l'analyse élémentaire et lui trouve la formule C'H**NO\

Abel* critique les résultats de Fttrth, de Takamine et de Aldrik et pense que la substance analysée par ces auteurs n'est pas une individualité chimique, mais un mélange de plusieurs bases qui -abondent dans la glande. Le benzoyle d'épinéphrine ne serait pas non plus une substance pure, mais, de l'aveu même d'Abel, ce serait probablement un mélange de plusieurs corps parmi lesquels l'épinéphrine tient une place prépondérante.

Quoi qu'il en soit, le procédé de Takamine présente le grand avantage de préparer la substance active des capsules surrénales à l'état de base stable, ne s'altérant pas sensiblement après plusieurs mois.

» Abel et Crawford. On the blood pressure raising constituent of the suprarenal capsule, Johns Hopkins HospitaVs Bulletin^ 1897, p. 151.

2 Abel. Ueber den blutdruckerregenden Bestandtheil der Nebennieren das Epinephrin, Zeitschr, fUr physiol. Chem.<, XXVIU, p. 318.

8 Aldrik. A preliminary report on the active principle of the suprarenal gland, Americ, Journ, of Physiol. V, 1901, p. 57.

* Abel. On the behaviour of epinephrin to Fehling*s solution and other caracteristics of this subject. Johns Hopkins HospitaVs Bulletin, XII, 1901, p. 336.

Le procédé employé par Takamine et par Aldrik est en résumé le suivant :

L'eau de macération des capsules surrénales est portée à l'ébullition; on ajoute de l'acétate de plomb et on filtre. Le filtrat, concentré par évapot'ation, est traité par l'alcool. Après élimination de l'alcool par évaporation, on alcalinise la liqueur par l'ammoniaque ou l'hydrate de sodium. L'adrénaline précipite* On filtre, et le précipité est lavé par l'alcool puis par réther et séché à l'air ou dans le vide. L'adrénaline ainsi préparée, se présente sous l'aspect d'une poudre jaunâtre.

Battelli' a tout récemment apporté quelques perfectionnements à la méthode de Takamine. Ces modifications sont essentiellement au nombre de trois. En premier lieu on prend seulement la substance médullaire des capsules surrénales et on rejette la substance corticale qui ne renferme pas d'adrénaline. En second lieu, après l'éloignement de l'alcool, le liquide est traité par le bichlorure de mercure qui, donnant un précipité trèë abondant desubstances inertes, permet d'éliminer celles-ci. Elles précipiteraient aussi en partie par l'addition de l'alcali et gêneraient la précipitation de l'adréralijie. *En troisièÎBe lieu, Battelli renaplacc la filtration par la centrifugation, pour éviter que l'adiénalinene s'oxyde à l'air. Cette précaution est surtout impoi'tante dans les diverses manipulations que l'on pratique après avoir alcalinise le liquide par l'ammoniaque, car l'adrénaline s oxyde rapidement et se transforme en une substance inactive, lorsqu'elle se trouve dans un milieu alcalin.

Ces manipulations sont facilitées par le dosage colorimétriquede l'adrénaline, tel qu'il est indiqué par Battelli*. On peut, en eftet, reconnaître à chaque moment si la marche des opérations est normale et à quel moment il faut ajouter l'alcali pour précipiter l'adrénaline. 11 faut en effet que la concentration du liquide en adrénaline soit suffisante pour que cette substance précipite par l'action de l'alcali.

Le dosRge colorimétrique de l'adrénaline d'après le procédé de Battelli^ est basé sur la réaction verte donnée par l'adrénaline et ses composés en présence de chlorure ferrique. La solution d'adrénaline est diluée déplus en plus jusqu'au moment où

1 F, Battelli. Préparation de la substance active des capsules surrénales, C. R. de la Soc. de Biol., 31 mai 1902.

3 F. Battelli. Dosage colorimétrique de la substance active des capsules surréualeii, C. R. de la Soc. de Biol., 24 mai 1902.

le chlorure ferrique (solution au 15 ©/o) ne donne plus de color ration verte. Battelli appelle dilution limite^ la dernière dilution dans laquelle la solution ferrique a produit une teinte verte, persistant quatre à cinq secondes. Un centimètre cube de liquide qui possède la dilution limite constitue une unité chlorure ferrique. Si Ton dit, par exemple, que 50 ce. d'extrait de capsules surrénales possèdent 500 unités chlorure ferrique, cela signifie que ces 50 ce. donnent encore une teinte verte par le Cls Fe lorsqu'ils sont dilués à 'A»» ina-is ils ne donnent plus cette coloration lorsqu'ils sont dilués à V". Nous donnons ici le procédé détaillé de l'extraction d'adrénaline employé par Battelli.

La substance médullaire des capsules fraîches de bœuf est séparée avec soin du reste de la capsule ; elle est broyée avec du verre pilé et on ajoute trois volumes d'eau distillée. On laisse macérer pendant une heure ; on décante le liquide et on exprime le résidu à travers un linge. On répète l'opération cinq fois. Après la cinquième macération, le résidu de substance médullaire est épuisé et ne renferme plus de substance active.

On réunit les extraits des cinq macérations. On chauffe ce liquide à 80** environ pendant quelques instants. On laisse refroidir et on ajoute 2 grammes d'acétate de plomb pour 1000 ce de liquide; on obtient ainsi un précipité très abondant. La tiltration étant très lente, on éloigne le précipité par centrifugation. Le dépôt est lavé plusieurs fois avec de l'eau distillée, jusqu'à ce que l'eau de lavage ne renferme plus de substance active. Ces divers liquides obtenus par centrifugation sont réunis et soumis à un courant d'H2S. On filtre et on évapore le filtrat dans le vide à une température de 46 à 50*, jusqu'à un trentième environ du volume primitif. Le liquide devient foncé et il s'y dépose un précipité. On ajoute six à sept volumes d'alcool et on obtient un précipité rougeâtre.

On filtre, on évapore le filtrat dans le vide à une température de 40 à 45*», jusqu'à un cinquième environ du volume primitif. On ajoute quatre volumes d'eau et on obtient un précipité faible. On filtre, on évapore le filtrat dans le vide à 45-50% jusqu'à un cinquième environ du volume primitif. On ajoute du bichlorure de mercure tant qu'il se produit un précipité; ce précipité blanchâtre est très abondant. On centrifuge; le dépôt est lavé plusieurs fois avec de l'eau jusqu'à ce que l'eau du lavage no contienne plus de substance active. Tous les liquides

obtenus par centrifugation sont réunis et soumis à un courant d'HjS. On centrifuge et on lave le dépôt jusqu'à complet épuisement de la substance active.

Le liquide obtenu est évaporé dans le vide à 45-50^ On arrête l'évaporation lorsqu'un centimètre cube de ce liquide renfernae environ mille unités chlorure ferrique. On obtient ainsi un liquide avec une faible coloration jaune à réaction franchement acide.

Un tube rempli de ce liquide est mis dans la glace fondante. On y ajoute de TNEg concentrée jusqu'à neutralisation, puis on alcalinise par une goutte d'NHg concentrée pour 2cc. de liquide et on bouche hermétiquement le tube. L'adrénaline précipite presque immédiatement. Après cinq minutes de repos, on centrifuge pendant dix minutes.

Quelle que soit la concentration du liquide, un quart environ de la substance active reste en solution. Ainsi, dans notre cas, le liquide décanté après centrifugation, renferme environ 250 unités chlorure ferriqtie environ par centimètre cube. On acidifie ce liquide immédiatement par de l'HCl ; on concentre par évaporation dans le vide, ce qui permet d'en extraire de nouvelles quantités d'adrénaline.

Le dépôt d'adrénaline est lavé par quatre volumes environ d'eau distillée et centrifugé de nouveau. Le nouveau dépôt est lavé trois fois par l'alcool, puis deux fois parl'éther et chaque fois soumis à la centrifugation. Après la dernière centrifugation on chasse par le vide l'éther qui baigne le dépôt d'adrénaline. On conserve l'adrénaline, qui est hygroscopique, dans un flacon bien bouché.

On obtient ainsi une poudre blanche peu soluble dans l'eau, bien soluble au contraire dans l'eau ou dans l'alcool acidifiés par l'acide acétique, l'acide chlorhydrique, etc.

Un centigramme de cette substance donne 700 à 750 unités chlorure ferrique, c'est-à-dire qu'un centigramme d'adrénaline dilué dans 700 à 750 ce. d'eau, donne encore avec le ClgFe, une teinte verte persistant quatre à cinq secondes ; dilué dans 800 ce, il ne donne plus de teinte verte.

C'est l'adrénaline préparée de cette manière, qui nous a servi pour nos recherches toxicologiques.

II. — ToxicUé de l'extrait des capsules surrénales. Historique.

Avant de parler des recherches toxicologiques faites avec les extraits de capsules surrénales, nous résumerons en quelques mots les principaux effets physiologiques produits par ces extraits. L'extrait de capsules surrénales ii\jecté dans les veines d'un animal modifie d'une manière très appréciable la pression sanguine, le pouls et la respiration.

La pression sanguine subit une élévation énorme^ le pouls se ralentit si les nerfs pneumogastriques sont intacts, la respiration s'accélère et devient superficielle. Ces phénomènes ont été décrits pour la première fois par Oliver et Schâfer* d'im côté, et par Cybulski" et Szymonowicz • de l'autre.

Oliver et Schâfer trouvent qu'ils sont dus uniquement à la substance médullaire des capsules, la substance corticale étant absolument inactive. Us pensent que l'augmentation de la pression est due à l'influence de l'extrait de capsules surrénales sur les petites artères qui se contractent énergiquement. Cybulski et Szymonowicz supposent au contraire que l'extrait agit sur le centre vaso-moteur. L'opinion d'Oliver et Schâfer a été confirmée par les observations ultérieures. En effet, l'extrait des capsules surrénales produit la contraction des petits vaisseaux non seulement lorsqu'il est injecté dans les veines, mais aussi lorsqu'il est appliqué localement. On obtient ainsi une ischémie locale surtout des muqueuses (Bâtes, Dor, Eônigstein, etc.). Cette propriété a été utilisée, comme ou le sait, en ophtalmologie, en rMnologie, etc.

L'élévation de pression par l'injection d'extrait de capsules surrénales, serait en outre favorisée par l'influence directe de cet extrait sur le cœur dont les battements deviennent plus énergiques. Cette action de l'extrait sur le cœur est considérée par Oliver et Schâfer comme supérieure à celle de la digitale et elle a été surtout bien étudiée par Gottlieb *.

^ Oliver et Schâfer. The physiological effects of extracts of the suprarénal capsules, Journ. ofPhysiol., XVIII, 1895, p. 230.

2 Ctbulski. Weitere Untersuchungen iiber die Function der Nebenniere, Akad. der Wiss. in Krakau, mars 1895.

3 Szymonowicz. Die Function der Nebenniere, Pfluger's Archiv, LXIV,

* GoTTLiBB. Ueber die Wirkung der Nebennierenextracte auf Herz und Blutdruck, Arch.f.exp. Path, und Pharm., XXXVIII, 1896, p. 99.

Les premières recherches sur Taction toxique de l'extrait de capsules surrénales, sont dues à Pellacani^ qui a en même temps étudié l'influence de l'extrait d'autres tissus sur l'organisme. En laissant de côté tout ce qui se rapporte aux autres tissus, résumons les résultats quePellacani a obtenus avec l'extrait de capsules Burréuales.

1" Chez la grenouille, il faut un poids considérable de capsule pour obtenir la mort. En eflet, ce n'est qu'avec deux grammes environ de capsule de veau (injectée sous la peau après l'avoir diluée dans Peau) qu'on a produit la mort au bout d'une heure, et au bout de quinze heures avec gr. 1,25 de la même substance. L'application directe de l'extrait sur le cœur n'arrête pas les battements de cet organe. Comme autres phénomènes, l'auteur a noté constamment : la stupeur, la perte de la sensibilité et du mouvement, l'arrêt du cœur en diastole.

2. Un chien de petite taille fut tué au bout de dix-huit heures par une injection hypodermique de 30 ce. d'une solution de deux capsules surrénales macérées dans 40 ce. d'eau.

3. Chez des lapitéSy Pellacani produit la mort au bout de cinq heures avec uue dose de gr. 0,50 de capsule de bœuf. Un lapin injecté avec gr. 0,15 de capsule de bœuf, meurt au bout de quinze jours; gr. 0,09 de capsule de chien tuent au bout de 22 heures. Un lapin injecté avec deux capsules d'un petit chien meuil dans la nuit-; avec gr. 0,23 de capsule de chien, un lapin meurt en 18 heures, et une capsule de chat tue aussi un lapin en 22 heures.

4. Chez les cobayes, gr. 0,29 de capsule de lapin tuent un eobjjye au bout de 13 heures ; un autre meurt au bout de cinq jours avec gr. 0,50 de capsule de bœuf (il se forma un abcès au lieu de l'injection); gr. 0,14 de capsule de lapin tuent un cobaye de 700 gr. et enfin gr. 0,18 de capsule de lapin tue un lapin en 18 heures.

Chez tous ces anunaux, on remarque que selon la qualité et la quantité de substance capsulaire, les effets sont plus ou moins promptjâ. En excluant les variations de la température (qui diminue si la mort survient avant 30 heures, augmente au contrai t-e en cas de plus longue survie), ces efl'ets ne se manifestent

' Pellacani. Intorno agli effetti tossici délie diluzioni acquose degli orgaai fresehi introdotte nelForgaaismo di alcuai animali, Arch. per le Sûien^i^med. ÏII, 24, 1879.

qu'une heure avant la mort et consistent en phénomènes d'excitation fugace suivis de paralysie.

Les altérations anatomiques consistent généralement en congestion du foie, de la rate, des reins, anémie du cerveau, etc. Dans les cas oii la mort est tardive, on' trouve une atrophie des mêmes organes.

Pellacani constate en outre que les eifets toxiques s'observent plus promptement si l'injection a été faite par voie hypodermique, que si elle a été faite dans le péritoine ou dans les veines. D ajoute que les capsules de veau, de bœuf et d'agneau sont moins toxiques que celles des autres animaux (carnivores et petits herbivores). Les capsules de la même espèce animale sont moins toxiques pour la même espèce que celles d'autres animaux.

L'action toxique que Pellacani attribuait à l'extrait capsulaire, fut contestée» déjà en 1880, par Ziino *. Cet auteur considérait que les phénomènes attribués par Pellacani à la toxicité de l'extrait, étaient produits par l'infection.

Pellacani' répond en faisant plusieurs expériences prouvant que les symptômes morbides se produisaient de suite après l'injection d'extraits de rein, de muscle, de foie, de capsule surrénale et se continuaient jusqu'à la mort sans que l'on pût constater à l'autopsie la présence d'abcès ou de bactéries.

Pellacani rencontra bientôt un nouveau contradicteur en la personne de Di Mattei '. Cet expérimentateur affirmait qu'on ne pouvait attribuer une action toxique qu'aux extraits contenant des substances en suspension. Si l'on écartait celles-ci en filtrant avec soin, à travers un filtré de charbon animal, de sable ou d'argile poreuse, les injections ne produisaient qu'une 1res faible élévation de la température (jusqu'à un demi degré) pendant les jours suivants et ne causaient pas la mort. Di Mattei produisait par contre la mort avec des signes certains d'infection, en se servant des substances restées dans le filtre.

Il attribue donc la mort occasionnée par l'injection d'extrait capsulaire, à l'introduction des substances albuminoïdes insolubles, amenant la septicémie par leur décomposition. Il considère qu'il n'y a aucune différence dans l'action de l'extrait organique d'animaux d'espèces différentes.

* Ziino. Qiornale internazionale di Scienze mediche^ Napoli, III, 1880, s Pellacani. Sull'azione tossica délie diluzioni acquose degli organi freschi.

Rivista sperimentale di Freniatria, VI, 1880, p. 169.

* Di Mattei. Sulla pretesa azione tossica délie diluzioni acquose degli organi animali freschi, Arch. per le Scienze med., VI, 1882, n» 15.

Les substances activés de l'extrait capsulaire furent examinées de plus près par Foà et Pellacani* en 1883. Ces auteurs arrivèrent à la conclusion que les capsules surrénales contiennent une substance toxique qui n'est pas identique au ferment de la fibrine, et qui produit de l'agitation, de la paralysie motrice et sensitive et enfin la mort par suite de la paralysie de la moelle épinière, du bulbe et particulièrement du centre respiratoit*e. D'après les résultats qu'ils ont obtenus, l'injection souscutanée d'un gramme d'extrait alcoolique, tuerait un lapin au bout d'une heure et un chien au bout d'un jour. Les capsules sont traitées par l'eau bouillante puis par l'alcool. Par évaporation on obtient un résidu qui est redissout dans l'eau.

Le haut degré de toxicité de l'extrait capsulaire fut de nouveau démontré en 1888 par deux médecins italiens, Guarnier etMarino-Zuco", qui trouvèrent que si l'on injectait 1 ce. d'extrait aqueux de capsules surrénales de bœuf (10 capsules macérées dans 60 ce. d'eau) à un lapin de taille moyenne, l'animal mourait rapidement. Par contre, si l'on traitait l'extrait avec un acide, par exemple l'HCl, on n'observait point de symptômes toxiques, même en injectant des doses beaucoup plus élevées.

' Guarnieri et Marino-Zuco trouvèrent comme principes actifs dans cet extrait aqueux, la neurine et des composés phosphoroorganiques. Bientôt après l'injection se développaient des symptômes de paralysie. Les animaux se couchaient sur le côté et réagissaient peu. Finalement la paralysie apparaissait dans les extrémités postérieures, plus rarement dans les antérieures, et la mort se produisait par la paralysie de la respiration.

Cliver et Schàfer % outre les eflets physiologiques dont nous avons déjà parlé, trouvèrent que des doses élevées d'extrait capsulaire font baisser la température. Chez la grenouille, on observe une diminution des mouvements volontaires due à des troubles dans les centres nerveux. Ils n'ont jamais observé une action curarisante avec cet extrait. Les lapins mouraient le plus souvent dans la nuit qui suivait l'injection intraveineuse,

* FoA et Pellacani. Sur le ferment fibrinôgène et sur les actions toxiques exercées par quelques organes frais, Arch. ital. de Biol.^ IV. 1883.

3 Guarnieri et Marino-Zuco. Recherches expérimentales sur l'action toxique de l'extrait aqueux des capsules surrénales, Arch. ital, de Biol. X, 1888.

8 Olivier et Schjeper. The physiological effects of extracts of the suprarenal capsules, Journ. ofPhysiol. XVIII, n® 3, 1895.

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sans que la cause de la mort pût être clairement détermjtiée.

Cybulski' constate que l'action toxique de ses extraits (aqueux, alcooliques glycérines, etc.) contenant une partie de tissu capsulaire pour dix parties de liquide, est si forte que quelques animaux, comme par exemple les lapins, périssaient déjà après Tinjection d'un centimètre cube dans les veines. Si l'extrait est beaucoup moins dilué (dix ou vingt fois moins concentré que le précédent), on peut alors injecter des quantités beaucoup plus considérables de substance active sans amener la mort. L'animal présente donc une accoutumance au poison. Après l'injection de fortes doses, on observe des convulsions et quelquefois un tétanos généralisé. Dans tous les cas oîi l'animal meurt rapidement, on peut constater comme cause directe de la mort, une extravasation dans les poumons, accompagnée quelquefois d'œdème ou d'infarctus du cœur, parfois aussi de la mœlleet du cerveau. Dans quelques expériences, la respiration cessa après l'injection d'un centimètre cube d'une solution concentrée. Dans ces cas la respiration artificielle non seulement maintint l'animal vivant, mais celui-ci se remit même à respirer spontanément au bout de quelque temps. Chez la grenouille, les réflexes s'afl'aiblissent progressivement et d'une façon durable, après l'injection de 1 ce. d'extrait aqueux.

Gluzinski* emploie des extraits glycérines: un gramme de substance médullaire pour 4 ce. d'un mélange d'eau et de glycérine à parties égales. Il se sert de capsules de bœuf, de veau, de porc, de chien ou de lapin. Cet extrait injecté chez un lapin dans une veine de l'oreille, produit des symptômes marqués d'empoisonnement, en particulier la paraplégie et la perte de sensibilité des extrémités postérieures, la dyspnée, la mydriase, une paralysie générale, des convulsions et finalement la mort. L'autopsie montre l'arrêt du cœur en diastole et un fort œdème des poumons . Les injections sous cutanées sont beaucoup moins toxiques.

Gourfein^ emploie dans ses recherches un extrait alcoolique

^ Cybulski, Ueber die Function der Nebenniere, Wien, med. Wochenschr. 1896. n" 6-7.

2 Gluzinski. Ueber die physiologische Wirkungder Nebennierenextracte, Wien, klin. Wochensch., 4 april 1895.

• GouRPEiN. Sur une substance toxique extraite des capsules surrénales, C. R. de VAcad. des Se. 5 août 1895 etRev. méd. de la Suisse rom., 1895, p, 513.

en injections hypodermiques. Les capsules broyées sont traitées avec plusieurs volumes d'eau chaude ; après filtration, on évapore à consistance sirupeuse et on ajoute quatre volumes d'alcool ;, on laisse se reposer et on filtre. C'est le filtrat qui sert aux injections. Le liquide possède donc 80 7» d'alcool.

Gourfein critique d'abord le procédé de Gluzinski, qui a employé un extrait glycérine, la glycérine ayant l'inconvénient de provoquer par elle-même des convulsions.

Passant aux expériences avec son extrait alcoolique, il trouve qu'un quart de seringue de cet extrait produit chez la grenouille les symptômes suivants : L'animal tombe inerte, il reste immobile, mais si on l'excite il réagit. Il s'affaiblit, la respiration se ralentit, puis s'accélère, s'affaiblit de nouveau et finalement cesse. Le cœur se prend plus tardivement. Les nerfs et la moelle ne perdent pas leur excitabilité électrique, qui persiste trois ou quatre heures après la mort. La survie varie entre un quart d'heure et trois heures. On ne constate pas de convulsions. A Tautopsie, on ne trouve aucune autre lésion que la congestion pulmonaire.

Chez les mammifères (rat blanc, souris, cobaye, lapin), on trouve de la gêne respiratoire qui augmente progressivement jusqu'à la mort. On remarque aussi une extrême faiblesse et de l'abattement; l'animal se fatigue très vite et présente une forte dyspnée. Le sensorium est conservé. Si l'on pratique la respiration artificielle, l'animal meurt un peu moins vite par paralysie du cœur. Comme phénomènes accessoires, on remarque des vomissements (chez ceux, naturellement, qui peuvent vomir), de la salivation, mais pas de diarrhée. Les animaux sont refroidis. La mort survient par asphyxie, que Gourfein attribue à une paralysie du centre respiratoire. Les convulsions qu'on observe quelquefois sont dues à l'asphyxie. Le cœur s'arrêterait en diastole.

Gourfein ajoute que la valeur toxique des extraits obtenus avec un même poids de substance, a été très différente. Son travail présente l'inconvénient de ne pas indiquer assez exactement la dose de substance capsulaire employée.

Dubois S expérimentant sur des rats fatigués et sur des rats au repos et maintenus au chaud, trouve que la dose nécessaire

1 Dubois. Sur l'action des extraits des capsules surrénales, C. R. de la Soc. de BioL, 1896, p. 14. . '

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pour amener la mort est moindre chez les premiers que chez les seconds. En outre chez les premiers il y aurait des convulsions, tandis que les autres présenteraient des phénomènes paralytiques et succomberaient comme à une sorte de sidération. Chez les animaux vivant en liberté, la toxicité est plus grande que chez ceux vivant en captivité. A jeun, et surtout dans le jeûne prolongé, l'extrait est moins actif. L'autopsie des animaux intoxiqués n'indique tantôt rien d'appréciable, tantôt une congestion généralisée à tous les organes.

Vincent ^ employant des. extraits actifs, a vu )a mort se produire déjà au bout de quelques minutes. Il faisait ses injections le plus souvent sous la peau, quelquefois aussi dans la cavité pleurale ou péritonéale. L'extrait dont il se servait provenait principalement de capsules surrénales de mouton, puis de celles de bœufs, de chiens, de chats et de cobayes; il était préparé en partie avec de la substance fraîche (avec ou sans cuisson), en partie avec de la substance séchée.

Vincent expérimenta sur les animaux suivants : i. Grenouilles et crapauds. Gr. 0,5 d'une glande fraîche, produisait une paralysie momentanée. Il administra jusqu'à 3 grnmmes sans amener la mort.

2. Rats et souris, Gr. 1,5 à gr. 3,0 d'une glande fraîche procuraient une respiration fréquente et superficielle et une accélération des battements du cœur. Au début, les animaux étaient dans un état d'excitation, mais au bout de peu de temps, leurs extrémités postérieures, puis les antérieures, se paralysaient. La respiration devenaient plus lente et l'activité du cœur plus faible. Les animaux se couchaient ensuite sur le côté avec les membres engourdis; leur respiration devenait irrégulière et toujours plus lente et ils succombaient souvent à des convulsions. De temps à autre s'écoulait une urine abondante mélangée à du sang. La défécation se faisait la plupart du temps normalement, et la température tombait souvent avant la mort à un degré très bas. Les mjections faites dans la cavité pleurale et péritonéale opèrent plus vite, même à de plus faibles doses.

3. Cobayes. Vincent considère l'injection de six grammes provenant d'une glande fraîche, comme uue dose léthale. Les cobayes présentent les mômes symptômes que les rats, avec cette diflfé-

' Vincent. The comparative physiology of the suprarenal capsules, Pro ceed. Roy. Soc. LXI, 1897, p. 64.

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reûce que l'on constate plus souvent chez eux l'hématurie (mais seulement lorsqu'on fait usage d'organes pas complètement frais). Vincent observa très fréquemment des hémorragies par la bouche et le nez.

4. Lapins. Chez ces animaux, les doses mortelles sont très variables. Les symptômes constatés se distinguent en plusieurs points de ceux observés chez les cobayes. Les lapins deviennent tranquilles et endormis. Au bout de quelque temps leurs yeux s'ouvrent très grands et les pupilles sont dilatées. Les extrémités postérieures se paralysent d'abord, puis les antérieures. Vincent n'observa jamais chez les lapins de l'hématurie ou des hémorragies par la bouche ou par le nez..

D'après les résultats obtenus par cet auteur, il paraîtrait que les animaux en expérience seraient partiellement immunisés pendant quelques semaines après l'injection de petites quantités d'extrait.

Dans un autre travail, Vincent* rapporte des expériences faites sur des chats et des chiens. Deux chiens de 6 à 7 kilogr. auxquels on injecta sous la peau l'extrait aqueux de 60 grammes de capsules surrénales fraîches, présentèrent d'abord des phénomènes généraux d'excitation, puis de paralysie et périrent dans l'espace de 22 à 30 heures avec un fort abaissement de température. Un chat de 3 kilogr. présenta après l'injection de l'extrait aqueux de 26 gr. de capsules surrénales fraîches, une accélération de la fréquence des mouvements respiratoires allant de 60 à 200 à la minute, et fut trouvé mort 18 heures après. Des injections d'aussi fortes doses d'extrait de foie, de cerveau, de rate, de reins ou de muscles, n'avaient point amené de suites fatales.

Langlois* trouve que les symptômes de l'intoxication par l'extrait de capsules surrénales, sont peu caractéristiques et mal déterminés et que les effets sont très variables.

D'après Hultgren et Andersson^ les injections intraveineuses ou sous-cutanées d'extrait capsulaire en quantité suffisante, amènent la mort chez le lapin par œdème des poumons accompa-

1 Vincent. Further observations upon Ihe gênerai physiological eflects of extracts of the suprarenal capsules, Journ. of PhysioL, XXII, 1898, p, 270.

2 Lanolois. Recherches sur l'altération fonctionnelle des capsules surrénales, Arch. de physioL, 1897, p. 152.

* Hultgren et Andersson. Studien uber die Physiologie und Anatomie der Nebennierea, Skandin. Arch. fur Physiol. IX, 1899, p. 73.

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gné souvent d'hémorragie de ces organes. Avec Tinjection intra. veineuse, la mort est précédée d'un état d'agitation. La dose mortelle est très variable.

Foà\ enfin, produit avec un centimètre cube d'extrait en injection intraveineuse, la mort d'un lapin par thrombose pulmonaire. Avec des doses moindres, il constate des infarctus nécrobiotiques du rein, du catarrhe aigu intestinal. On peut obtenir chez le chien, par des injections sous-cutanées, des hépatites interstitielles. D'après Foà, on n'arrive pas à immuniser les animaux contre l'effet des extraits capsulaires, par des injections successives de faibles doses.

ni. — Expériences personnelles.

Pour faire une étude comparative sur les effets toxiques de l'adrénaline, nous avons expérimenté sur des grenouilles, des cobayes et des lapins.

L'injection a toujours été faite dans le sac lymphatique dorsal chez la grenouille, sous la peau chez les autres animaux.

L'adrénaline était dissoute dans de l'eau distillée légèrement acidulée par l'HCl.

On a toujours employé une asepsie rigoureuse et les anhnaux étaient maintenus dans les meilleures conditions.

Pour la clarté de notre exposé, nous avons divisé nos observations en trois groupes selon les espèces des animaux expérimentés. Chaque groupe est divisé à son tour en deux séries d'après la dose employée.