TECHNIQUE EMPLOYÉE
De très nombreuses techniques ont été mises en œuvre, depuis le travail de Fanragus (1917) pour mesurer la vitesse de la sédimentation globulaire. Elles diffèrent surtout par la quantité de sang employée et la façon de le prélever (ponction veineuse ou ponction à la pulpe du doigt ou au lobule de l'oreille), par la manière d’éviter la coagulation (matériel paraffiné, addition de substances anticoagulantes diverses), par le mode de lecture (lecture rapide ou après un temps prolongé, lectures successives avec établissement d’une courbe). Par suite les chiffres fournis diffèrent un peu selon la méthode à laquelle on a recours. La thèse de Capanis (1926) contenait une excellente étude des différentes techniques. Nous ne ferons que rappeler ici les principales, avant de décrire celle que nous avons employée, et à propos de laquelle nous insisterons sur quelques détails pratiques qui nous ont paru dignes d’attention.
Fanraeus prélevait le sang par ponction veineuse, au pli du coude, et en recevait 8 ce. dans un tube de verre, calibré à 1 cc. de diamètre, contenant 2 cc.
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d’une solution de citrate de soude à 2 %,. Il mesurait au bout d’une heure la hauteur du culot hématique. La méthode de Praur est analogue.
La méthode de WesTERGREN (1919) encore très en faveur, emploie un tube de 30 cc. de hauteur, calibré à 2,5 mm. de diamètre et gradué en millimètres. Le sang est prélevé par ponction veineuse : dans une seringue de 1 ce. on aspire d’abord 2/10 de ce. d’une solution de citrate de soude à 3,7 %, puis 8/10 ec. de sang. Le mélange est versé dans le tube et la lecture se fait deux heures après en mesurant au compas d'épaisseur avec précision la hauteur du plasma. #
Forestier emploie une technique analogue mais portant sur 2 ce. de sang, et fait trois lectures successives, après 1 heure, 2 heures et 24 heures.
Pevre opère sur 4 cc. de sang reçus directement de l’aiguille dans une éprouvette de 5 cc. contenant déjà 1 ce. d’une solution de citrate à 5 %,. La lecture est faite d'heure en heure pendant 24 heures.
Toutes les méthodes qui exigent une quantité notable de sang ont l’inconvénient de nécessiter très souvent une striction du bras qui, même de très courte durée, modifie la vitesse de sédimentation. C’est pourquoi divers auteurs ont essayé d’obtenir des mesures précises avec une très petite quantité de sang. GRüNBERG opère sur 3/10 de ce. par une méthode calquée sur celle de WesreRGREN, en faisant la lecture au bout d’une heure. LINZENMEIER emploie un tube de verre de 4 mm. de diamètre et
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65 mm. de haut, sur lequel un premier trait sert de
repère pour un volume de 1 ce. Au-dessous de ce
trait en sont gravés trois autres, à des distances de 6, 12, et 18 mm. On aspire dans une seringue de 1 ce. contenant 0,2 ec. de solution citratée, 0,8 cc. de sang, et le mélange est versé dans le tube. La vitesse de sédimentation est mesurée par le temps au bout duquel le culot hématique atteint le trait inférieur, ce qui est très long. En pratique, on se contente de lire au bout d’une heure le niveau de la couche hématique par rapport à la graduation,
Les micro-méthodes ont l’avantage de ne demander qu’une très faible quantité de sang, que l’on peut prélever par ponction des capillaires au niveau de la pulpe d’un doigt ou du lobule de l'oreille. L’expérience montre que la vitesse de sédimentation est la même pour les capillaires et pour les veines, de sorte que les résultats des micro-méthodes resteront comparables à ceux des méthodes opérant sur des quantités plus importantes. Mais la difficulté est d'éviter la coagulation (le mélange du sang et de la substance anticoagulante ne pouvant se faire dans la micropipette), et aussi de faire la part des phénomènes de capillarité qui gêneraient la lecture si l’on prenait des tubes trop étroits. Différentes techniques de microsédimentation ont été proposées par BriNkMann et Wasrz (1921), BorocHowsxi, Lancer et Scamipr, Raw, BurGer, ete. La méthode de Tzancx a l'intérêt de permettre, par des lectures successives, d'établir une courbe de la sédimenta-
Henri Weill: 2
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tion dont l’allure est parfois d’une analyse intéressante.
Nous avions besoin pour notre étude d’une méthode applicable à tous les cas et cependant assez précise, pour que les résultats demeurent comparables. Il fallait en outre une technique simple et relativement rapide, qui put être éventuellement employée couramment en clinique. Ces données exigeaient une micro-méthode. Nous avons toujours eu recours à celle de LANGER et Smcipr et hous y avons procédé de la manière suivante. \
‘Matériel
Nous avons utilisé les micropipettes spéciales, construites en France sur les directives de Ch. Acxæar», Jeanne Lévy et G. GuraManx. Ces micropipettes sont calibrées à 2 mm. de diamètre intérieur et ont 9,5 cm. de haut. Elles portent de bas en haut trois traits, marqués €, 0, B, et mesurant respectivement un volume de 30, 90 et 120 millimètres cubes. D’autre part la distance entre c et o porte une graduation millimétrique qui la divise en 25 parties égales. Toutes les pipettes sont soigneusement vérifiées avant l'emploi. On à en outre une épouvette à mercure.
Prélèvement du sang
On pique le lobe de loreille ou la pulpe d’un doigt préalablement lavé à lalcooi et à léther, puis séché. Il faut une piqûre suflisamment profonde pour que le sang s’écoule facilement, c’est pourquoi 1l est préférable d'utiliser la lancette de Bensaude et de faire le prélèvement au quatrième doigt. Il est facile de
vérifier que les résultats sont les mêmes, quel que
soit Le point où l’on prenne le sang, à condition qu’on évite autant que possible de comprimer le doigt ou d'exprimer la pulpe pour hâter l'écoulement, ce qui peut fausser la réaction. (Cependant une pression légère et rapide ne l’influence pas). L
Dès que la goutte de sang apparaît, on place le doigt dans une position légèrement imelinée, la pulpe dirigée vers le sol. On applique à la surface de la goutte l’extrémité de la micropipette, qui aura été préalablement lavée avec une solution de eitrate de soude à 5 % préparée fraîchement, et remplie de la même solution jusqu’à la division € (le trait inférieur). Pendant que le sang monte par capillarité dans le tube, on imprime à celui-ci des mouvements de rotation de manière. à ï‘avoriser le contact du sang avec le crtrate de soude. Il faut éviter très soigneusement la pénétration de bulles
d'air, ce qui fausse la réaction en changeant les pro-
portions respectives de sang et de solution citratée.
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