ANN. SC. NAT. ZOOL. XI

de réchauffer les objets à injecter, par immersion dans l’eau chaude. Cette immersion doit être assez prolongée, et l’eau maintenue à une température telle que l’on puisse y plonger la main sans que la sensation de chaleur soit désagréable, c'est-à-dire un peu au-dessous de la température du corps humain.

Quant aux masses injectables à froid, elles sont nombreuses, mais moins parfaites que les précédentes, et je m'en suis rarement servi. Le procédé au bichromate de plomb (1) n’est utilisable que pour une étude rapide d'organes non destinés à être conservés. Les masses au vernis, ou à la gomme, ne se coagulent que lentement; ce fait les rend peu utilisables. L’injection de plâtre coloré, et très délayé, m’a donné de bons résultats : Parker s’en est également servi dans ses recherches sur Mustelus antarcticus.

Presque toutes les recherches sur l'appareil lymphatique, dont j'ai eu à parler dans l’Historique, ont été effectuées à l’aide d’injections de mercure. Je fais à celles-ci le reproche capital de créer des vaisseaux même dans les tissus les moins vasculaires et les plus compacts. Ce fait est très compréhensible. Les injections de mercure se pratiquent soit avec une seringue, soit, d’après le procédé Sappey, au moyen d’un vase rempli de mercure, placé à un niveau supérieur à celui du sujet à injecter, et dont le contenu se déverse par l'intermédiaire d’un tube de caoutchouc et d’une canule perforante. Cette canule perforante est introduite au hasard dans les tissus, on admet que le mercure pénètre alors soit directement dans un lymphatique, soit dans des espaces du tissu conjonctif, et de là dans le système lymphatique. En réalité, soit que l’on emploie ce procédé, soit que l’on injecte du mercure, au moyen d’une seringue, dans un trajet reconnu lymphatique, le poids de la masse injectée détermine le plus souvent des

(4) On se sert d’un bichromate précipité immédiatement au moment de

l'emploi, en mélangeant des solutions concentrées d'acétate de plomb et de bichromate de potasse.

ruptures, par lesquelles le mercure s'échappe en formant des réseaux qui ne sont rien moins que naturels. J'ai eu l'occasion d'étudier, les unes après les autres, presque toutes les pièces de la collection Sappey, aujourd’hui déposées dans les Galeries d’Anatomie comparée du Muséum: ces pièces, d’ailleurs fort remarquables, et dans lesquelles la sagacité de Sappey a dû reconnaitre ce qui est vraiment lymphatique de ce qui est dû à des accidents de préparation, présentent fort souvent de ces diffusions par suite de rupture des parois vasculaires. D'ailleurs, même dans le cas où la canule perforante ne rencontre pas de vaisseaux, le poids du mercure est suffisant pour déterminer des dissociations partielles, surtout dans le tissu celluleux, et y créer des plexus contre la richesse desquels il convient de se mettre en garde.

La pratique délaissée, et presque inconnue aujourd’hui, de l’aydrotomie, due à Lacauchie [2], est, au contraire, de nature à aider dans l'étude de la vascularisation. Cette pratique consiste dans un lavage très prolongé des tissus, par injection d’eau dans les vaisseaux. Les organes hydrotomisés deviennent transparents, et l’on peut y suivre facilement les trajets des vaisseaux, des nerfs... L’hydrotomie peut rendre à l'anatomie macroscopique des services comparables à ceux que les réactifs éclaircissants rendent à la microscopie.

J'ai exposé (p. 90) le procédé dit d'injection naturelle, qui repose sur la coagulation du sang n silu. Presque tous les agents fixateurs étant coagulants, donnent d'eux-mêmes ces injections. Mais on emploie spécialement pour cela la liqueur de Müller, ou mieux l'alcool nitrique. Le perchlorure de fer (formule de Robin) m'a donné de mauvais résultats.

Il. — HISTOLOGIE

Fixations. — Le sublimé, en solution aqueuse saturée à froid, additionnée si possible de 1 p. 100 d’acide acétique

au moment de l'emploi, et agissant pendant environ six heures, m'a donné d'excellents résultats, la liqueur de Zenker également. Pour des recherches qui relèvent plutôt de l’'Anatomie microscopique que de l’Histologie proprement dite, ces deux fixateurs sont suffisants. Ils nécessitent des lavages ultérieurs à l'alcool iodé, qui compliquent un peu leur emploi. L'alcool à 90°-95°, et la formaldéhyde à 5-10 p. 100 (1), m'ont donné des résultats à peu près égaux en valeur définitive, bien que ces liquides agissent différemment sur les tissus.

Ce n’est qu’à titre exceptionnel que je me suis servi de fixateurs plus complexes, comme le liquide de Flemming.

Pour l'étude des endothéliums, je me suis servi avanta-

geusement du liquide de Renaut :

Aeidelosmique M2p.100-.2 2.77 4 vol. AE Acide picrique (sol. aqueuse saturée). #4 vol. 4 Nitrate d'argentra 4 pe MO0R ennemie 4 vol.

C’est en injections interstitielles, et intravasculaires, que j'ai employé ce liquide; les pièces étaient ensuite traitées par l'alcool à 90-95°.

Les injections de solutions argentiques : nitrate à 1-2,5 p. 100, ou à la gélatine nitratée, m'ont également servi. Dans ce dernier cas, la masse à injection était ainsi com-

posée :

Solution de nitrate d’argent à 1 p. 100........ 100 grammes. Gélatine (préalablement ramollie dans l’eau dis- DÉC) ITU RS ELLE ENT re 10 —

Dans tous les cas, je procédais à un lavage préalable des vaisseaux par injection de sérum artificiel (solution dite physiologique ou sel marin à 7,5 p. 1000). Parfois, la pratique des imprégnations m'a servi moins à étudier la forme des endothéliums qu’à reconnaître la présence ou

(4)-C'est-à-dire renfermant 5-10 p. 400 de la solution commerciale, laquelle renferme 40 p. 100 d’aldéhyde gazeuse. Cette solution est à recommander pour la fixation (dans le but de recherches d'anatomie microscopique et non d’histologie fine) des organes injectés à la gélatine.

l'absence de fins vaisseaux ou de lacunes vasculaires. Tel à été le cas pour les lacunes de la sous-muqueuse dans la valvule spirale et les parois intestinales. A cet effet, je procédais à une injection interstitielle de liquide de Renaut, sans lavage préalable de l'organe. Les impuretés fixées à la paroi des vaisseaux, et y réduisant le nitrate, pouvaient alors altérer la netteté des lignes intercellulaires, mais en revanche cette injection interstitielle pénétrait dans toutes les lacunes ou vaisseaux voisins du point injecté, mieux qu'une injection vasculaire à la gélatine; si, aux lacunes que je décris comme veineuses, s’en ajoutaient d'autres, de nature lymphatique, je les aurais certainement injectées de cette manière, e{ par comparaison avec des pièces semblables, mais injectées à la gélatine, je les aurais mises en évidence.

Coupes. — Désirant avoir plutôt une connaissance d’ensemble des lissus que de fins détails de leur structure, je me suis attaché, le plus souvent, à obtenir des coupes assez larges, pratiquées sur des fragments d'organes relativement volumineux; j'ai dû employer pour cela la méthode au collodion. En portant le fragment d’organe, préalablement déshydraté par la série des alcools, et imprégné d’éther, dans une capsule remplie de collodion #rès liquide el placée sur la platine chauffante, on obtient une pénétration presque aussi rapide qu'avec la paraffine. Cette excellente méthode m'a été enseignée, comme beaucoup d’autres, par M. Pettit. La préparation, montée dans du collodion épais, après avoir été ainsi chauffée pendant environ deux heures, est ensuite immergée dans :

GlyLÉrIMe Er REA ea 1 ICO AN Perth eme ent ee 2

Une inclusion faite le matin, et plongée aussitôt dans ce liquide, peut être mise au microtome dans l’après-midi. En résumé, ce procédé est presque aussi expéditif que celui à la paraffine.

Colorations. — Trois réactifs m’ont servi parallèlement et ont été appliqués à toutes mes coupes, ce sont:

1° Le carmin aluné.

2° L'hématoxyline de Delafield, suivie d'un traitement à l’éosine.

3 La liqueur de Van Gieson, modifiée comme suit :

Acide picrique (sol. aqueuse saturée) ...... 200 cent. cubes. Saurefuschine (de Grübler) à 4 p. 100...... 2 —

L'emploi du carmin aluné est des plus simples, je n'ai donc pas à le décrire. Il m’a paru préférable d'employer les autres réactifs à l’état de dilutions agissant pendant un certain temps, plutôt qu’à l’état pur; c’est dans ce but que j'ai augmenté la dose normale de solution picrique de la liqueur de Van Gieson. On obtient ainsi, avec le matériel que j'ai eu à étudier, des colorations beaucoup mieux différenciées.

La comparaison de coupes colorées par chacun de ces trois réactifs est des plus instructives, et permet de comprendre des structures qu'un seul d’entre eux ne résoudrait pas.

En outre, le procédé à l’orcéine m'a permis de déceler des fibres élastiques que je n'aurais, le plus souvent, pas vues autrement. Le liquide dans lequel je plongeais les coupes était ainsi composé :

LOU td et ÉD Pr ne AE SE et ce Pde 20 cent. cubes. Orcéine de Grübler pour fibres élastiques... 08",50 AICOGLARO OS RE le eu ete 40 cent. cubes.

AGIT NAZOLIIUEMPUT een er peer XX gouttes.

Laisser agir pendant 24 heures et décolorer par l’alcool chlorhydrique.

C’est le baume du Canada qui m'a toujours servi comme milieu définitif.