TABLEAU II

[. Action de la lumière solaire sur les lipides totaux en solution chloroformique *

1e Expérience

2 Indice d’iode

Jours Obscurité Lumière 1e 67 67 3° 66,5 92 7e 67 45,5

2me Expérience jer 64,9 64,9 2e 64,6 64,7 4e 67,9 55,9 8° 64,6 48,9 13e 66,4 59,6 23e 67,0 48,3 34° 66,8 D2 73E 67 21

. * La coloration de la solution exposée à la lumière est nettement moins intense que celle de la solution gardée dans l'obscurité Cette modification s’observe 24 heures après le début de l’expérience.

IT. Action de la lumière solaire sur les acides gras totaux

Indice d'iode

Jours Obscurité Lumière 1er 96,3 96,3 2e 98 96,3 4e 97,1 93,5 8° 97,7 93,5

III. Action de la lumière solaire sur les acides gras phosphatidiques Indice diode

Jours Obscurité Lumière qe 88,5 88,5 8° 88,1 85,1 11e 87,3 74,3 20e 87,2 58,4.

La lumière solaire diminue nettement l'intensité de la coloration de la solution chloroformique des acides gras totaux et des acides gras phospbatidiques.

Des variations semblables ont été décrites par BALLANTYNE (3) qui a étudié l'influence de l'exposition à l'air et à la lumière sur l'indice d’iode de quelques huiles végétales.

male. Dans le ballon où a eu lieu la saponification on introduit.

40 em° d'acide chlorhydrique normal 26,2 cm? d'alcool à 95°.

8,8 cm* d’eau

Le volume est de 100 cm? d'alcool à 50° a’une alcalinité voisine de l’alcalinité décinormale. (Le milieu réalisé est celui préconisé par Honix« et Sprrz pour séparer les acides gras de l’insaponifiable total). Comme l’adjonction brusque d'acide chlorhydrique normal libère parfois des acides gras qui réagiraient difficilement à froid avec la potasse, on chauffe à nouveau le liquide pendant 20 minutes sous condensateur à reflux pour assurer la salification de ces acides gras.

Le liquide ainsi obtenu est refroidi et ensuite introduit quantitativement dans une ampoule à décantation de 500 cm. Le liquide est traité à 4 reprises par 15 cm? d'éther de pétrole (P. E — 60°). L'insaponifiable total passe dans ce solva:t, et les savons restent dans la phase hydro-alcoolique. L'ensemble de ces extraits est lavé avec 50 cm d’eau distillée qui seront réunis à la phase hydro-alcoolique pour éviter toute perte d’acides gras. La solution éthérée contient le cholestérol total et l’insaponifiable X, celui-ci est constitué en partie par des substances volatiles à 100°. Pour éviter des causes d'erreurs iaiputables à ces composés nous avons adopté la méthode de LemELAND (43) : L’extrait éthéré est évaporé pendant huit heures dans une étuve électrique réglée à 50°, et par ce traitement la presque totalité des produits volatils est éliminée. (Le cholestérol total a été dosé sur l'insaponifiable par la méthode de Winpaus, tandis que le cholestérol libre a été déterminé par la même méthode sur les lipides totaux).

La récupération des acides gras totaux se fait dans le liquide hydro-alcoolique : on acidifie nettement par de l'acide

se

chlorhydrique étendu au tiers, ensuite on extrait trois fois avec de l’éther sulfurique ordinaire. Les solutions éthérées sont réunies et immédiatement évaporées, le résidu est repris par de l'éther de pétrole et filtré sur amiante et sable, puis on évapore le filtrat dans une étuve électrique à 20° pendant trois heures. Sur une portion des acides gras ainsi obtenus on déternine l'indice d’iode.

Extraction et purification des phospholipides : Un gramme de lipides totaux est dissous dans 10 cm? d’éther anhydre, on précipite les phospholipides par addition de 70 cm? d’acétone pur et sec après adjonction d’un cm d’une solution alcoolique saturée de chlorure de magnésium. Ce précipité est recueilli, lavé à l’acétone, dissous à nouveau dans l’éther absolu et encore précipité dans les mêmes conditions. Les phospholipides ainsi obtenus sont émulsionnés à l’aide d’une solution de Na CI à 1 pour cent ; cetie émulsion est introduite dans une ampoule à décantation, on agite ensuite avec 20 cm* d’éther anhydre et on répète cette opération quatre fois. Les solutions éthérées sont réunies dans un cristallisoir après avoir été lavées à l’aide d'eau salée acétonique (10 cm d’eau salée à 1 pour cent + 1 cm° d’acétone) le solvant étant évaporé dans une étuve à 50° on détermine par pesée le taux des phospholipides contenus dans les lipides totaux. La saponification de ces composés à l’aide de potasse alcoolique deux fois normale nous permet d'obtenir des acides gras phosphatidiques et de déterminer sur ceux-ci l'indice d'iode.

IV — Degré de précision des techniques de dosages employées

Pour la justification des techniques de dosages employées nous avons procédé de deux façons (59) :

1° Les dosages ont été effectués sur deux volumes égaux d’une même solution chloroformique de lipides totaux.

2 Sur deux portions identiques de purée homogène d'organe (foie de lapin).

Les résultats obtenus sont réunis dans le tableau n° IV.