C. — BLANC D’ŒUF COAGULÉ

Technique :

Après répartition en tubes stérilisés de 3 à 4 cc. de notre milieu, la coagulation est obtenue sans dépasser la température de 70-75°. Le milieu doit être blanc brillant sans bulles d’air. La coagulation doit se faire lentement.

Si l’on coagule de grandes quantités de tubes, on se sert de l’étuve de Koch. Si on ne veut coaguler que quelques tubes, il est très simple de faire coaguler ses tubes sur un plateau de métal placé sur une casserole d’eau en ébullition; il est indiqué, pour que la coagulation s’opère également dans tous les tubes, de mettre un peu d’eau sur le plateau de métal et de recouvrir également ses tubes avec un buvard imbibé d’eau.

Ensemencement :

Nous ensemencerons chaque tube d’albumine coagulée avec une goutte de culture en bouillon de 24 heures, répartie sur toute la surface du milieu à l’anse de platine et nous avons fait chaque 24 heures

un témoin gélose et bouillon qui fixe l’évolution de la bactérie dans les milieux étudiés.

D. — BLANC D’ŒUF AYANT SUBI UNE MODIFICATION PAR L'ACTION D’UNE BACTÉRIE PROTÉOLYTIQUE.

Nous nous sommes demandés si la mollécule protéique du blanc d'œuf désintégrée sous l'influence d’une diastase protéolytique conservait sa même action sur les bactéries après avoir subi les moditications d’une bactérie très protéolytique.

Pour nos essais, nous avons ensemencé des tubes d’albumine d’œuf avec quelques gouttes d’un bouillon de 24 heures de bacille Protée souche Melun, une des souches les plus protéolytiques de la collection de l’Institut Pasteur. « Le bacille Protée hôte normal de l’intestin se trouve en abondance à la surface du sol. Il cultive facilement sur tous les débris végétaux et animaux, grâce à une grande puissance d’attaque des matériaux albuminoïdes les plus simples comme les plus complexes. Il liquéfie la gélatine. Après 48 heures, à 375, le lait est coagulé en masse compacte ou grumeleuse, suivant l’échantillon pris; après trois à six jours la caséine est digérée et le sérum prend une teinte jaune sale. Il digère le sérum coagulé après six à douze heures de culture. L’albumine d'œuf coagulée est digérée en 24 à 48 heures.

Avec l’albumine d’œuf liquide, dès la 24° heure de séjour à l’étuve à 37°, il y a formation d’un voile gris visqueux : ce voile s’épaissit et forme au bout de quelques jours, un gros bouchon épais, filant. Le blanc d'œuf semble plus fluide.

Les tubes d’albumine d’œuf ensemencés avec le bacille Protée ont été laissée huit jours à l’étuve à 37°; au huitième jour, ces tubes ont été filtrés pour les débarrasser du bacille Protée qui y cultivait.

La technique de filtration employée est celle donnée par M. Legroux dans le Cours de l’Institut Pasteur : filtration de l'extérieur vers l’intérieur. La bougie en porcelaine Chamberland à l’intérieur de laquelle plonge jusqu’au fond, un tube capillaire, baigne dans le liquide à filtrer et est reliée par un tube de caoutchouc à une monture en bronze en forme de croix (modèle Legroux) constituée par trois tétines A.B.C. et un corps conique D. Le corps D est gainé d’un anneau de caoutchouc qui obture l’orifice du tube destiné è recevoir le liquide filtré. La tétine B est reliée à la bougie. Sur A on monte un tuyau de caoutchouc terminé par une effilure de verre destinée à répartir stérilement le liquide filtré. La tétine C est mise en relation avec la trompe à vide.

Pour filtrer l’albumine d'œuf, nous avons d’abord centrifugé ce liquide pour nous débarrasser des bouchons glaireux formés par le bacille Protée. Et pour faciliter la filtration de ce liquide albumineux, nous avons dilué le blanc d’œuf avec moitié eau physiologique à 9 pour 1.000 et après avoir fait passer à travers le filtre quelques centimètres cubes d’eau physiologique pour « mouiller » notre bougie, nous avons filtré le liquide albumineux en maintenant le récipient du liquide à filtrer au bain-

AT

marie à 40° pendant le temps de l’opération. Les iiquides limpides, riches en albumine, traversant difficilement les parois des bougies à la température de 16-18°, le passage en est facilité à une température plus élevée de 40°.

Nous avons obtenu avec le blanc d’œuf un liquide limpide, clair, réparti ensuite à raison de 4 cm3 par tube à essai.

Les milieux ont été ensemencés dans les mêmes conditions que les albumines d'œuf pure, diluée et coagulée.