STÉRILISATION

ture de — 20° ; le Bacille du charbon végète encore, après avoir été soumis pendant vingt-quatre heures à un froid de — 70° et jusqu'à — 130°, A plus forte raison, les basses températures n’exercent-elles aucune action nuisible sur les spores. Cette résistance est tout à fait comparable à celle dont les graines nous ont précédemment donné des exemples (p. 957).

L'optimum de température pour la végétation des Bactériacées et pour la germination de leurs spores est d'ordinaire compris entre 35 et 38°. C’est donc à ces températures qu'il convient, par exemple, d'exposer à l'étuve les milieux de culture stérilisés dont on veut vérifier la stérilité. Aucune végétation ne doit s’y produire après quarante-huit heures, sinon la stérilisation aurait été incomplète ; ainsi, dans un bouillon, on verraitapparailre un trouble, indice d’une colonie bactérienne.

La lumière et l'oxygène exercent une action déprimante très nette sur le développement des Bactériacées (p. 1208, 1228, 1231). Aussi, la libre circulation de ces deux agents vivifiants, jointe à l'évacuation des matières organiques inertes, qui véhiculent les Bactériacées pathogènes, est-elle la condition fondamentale de l'Hygiène publique et privée.

Stérilisation. — Stériliser un milieu, c’est détruire par une chaleur suffisante tous les germes vivants qu'il peut renfermer.

Comme les spores de certaines espèces sont capables de résister, pendant un temps plus ou moins long, à des températures supérieures à 100 degrés, il convient, pour stériliser entièrement les bouillons ou autres milieux nutritifs, destinés à la culture des Bactériacées, de les chauffer au moins pendant une demi-heure à la température de 110 ou 115 degrés, dans un autoclave ou éluve à vapeur d'eau surchauffée (Hig. 14641). Cette température est parfois portée en chirurgie jusqu'à 14% degrés, ce qui correspond à une pression de 4 atmosphères pour la vapeur intérieure ; à 120 degrés, cette mème pression est seulement de deux atmosphères.

Dans des milieux traités de la sorte, aucune vie ne se manifeste plus ultérieurement, si l’on a soin de les conserver à l'abri des poussières de l'air ; seuls, les germes qui viennent à être déposés sur ces milieux s’y développent, ce qui permet précisément d'obtenir des cultures pures des espèces étudiées.

L'autoclave, qui reçoit les milieux de culture destinés à être stérilisés (fig. 1641 et 1642), est une sorte de marmite de Papin, dont le fond est couvert d’une couche d'eau, que chauffe directement la flamme du gaz. Le couverele de lappareil, solidement maintenu au moyen d’écrous, est pourvu d’une soupape de sûreté, ainsi que d'un manomètre, qui indique la pression et par suite la température intérieure.

Les flacons à bouillon, les tubes à gélatine, et plus généra-

1204 LES BACTÉRIACÉES

lement tous les matériaux destinés à être stérilisés, sont disposés sur un fond mobile percé de trous, ou dans un panier de toile métallique, et placés immédiatement au-dessus de la couche d'eau, Avant de serrer les écrous à laide d’une felef, on chauffe jusqu'à ébullition de l'eau, c’est-à-dire jusqu'au

Fig. 1642. Fig. 1643.

Fig. 1642. — Coupe schématique d’une étuve pour le chauffage des cultures dans l'eau, à température déterminée. — 1, intérieur de la marmite, renfer-

mant l’eau ; 2, couverele ; 3, réservoir à mercure du régulateur de la température (la partie extérieure n’est pas représentée) ; 4, thermomètre; 5, appareil de suspension des tubes à cultures ; 6, rampe à gaz (Chauveau).

Fig. 1643. — Fourneau à gaz, avec panier en fil de cuivre, pour stériliser la verrerie, à see, à environ 200 degrés.

moment où la vapeur condensée s'échappe par le bord du couvercle, Une fois autoclave entièrement fermé, l’ébullition cesse el la température monte régulièrement,

Quand le degré nécessaire est obtenu, on le maintient constant au moyen d'un régulateur de la flamme du gaz, annexé à l’autoclave (fig. 1642, 3 et 1644).

Les objets de verrerie, les instruments, ete., sont stérilisés par un séjour d’une heure à l’étuve sèche (fig. 1643 et 1644), à une température qui varie de 160 à 200 degrés.

Stérilisation fractionnée. — Il peut arriver qu'un séjour d’une demi-heure ou de trois quarts d'heure à l’autoclave à 115 degrés soit insuffisant à détruire les spores de quelques espèces ; c’est le cas pour celles du Bacille subtil. On a alors recours à la stérilisation fractionnée, qui s'effectue à la température de 100° seulement.

A cet effet, pendant trois jours de suite, on porte chaque jour le milieu à stériliser à la température de 100° pendant quelques minutes,