IX. CHAPITRE

Expériences d'infection sur les différents organes de

la Vigne.

Cest Cavara^ qui a fait les premières expériences d'infection. Il a semé sur des grappes vertes des spores germées dans Feau ou le moût frais. La rafle conservée en chambre humide et les pédoncules des grains furent ainsi infectés en quelques jours, tandisque les grains ne tombèrent malades, qu'en partie, et seulement au bout de 14—16 jours.

Il ne parvint à infecter directement les grains qu'en inoculant les spores germées dans les plaies faîtes sur les grains. L'infection des grappes sur le cep ne réussit pas davantage et il en attribue la cause à ce fait que les expériences furent faites trop tard (fin Août et Septembre), à une époque où la pédicelle commence à se lignifier.

Le Coniothyrium ne serait d'après lui qu'un parasite occasionnel ; en outre il vit comme saprophyte.

FoËx et Ravaz ont également fait des infections, mais dans le rapport présenté à ce sujet à l'Académie des Sciences le 7 Novembre 1887, il n'ont pu déterminer si l'on devait considérer le rot livide comme un parasite ou un saprophyte.

PiROTTA (le 20 Août 1887) provoqua la maladie sur des grappes saines au moyen de spores, germées dans de l'eau de puits.

Fréchou (en Septembre 1887) obtint les mêmes résultats. Le deuxième jour après l'Inoculation, les grains devinrent plus mous et en 4 ou 5 jours des pycnides apparurent à leur surface.

> Cavara. Intorno ail disseccamento dei grappoli. p. 16.

Prilueux^(1887) a également examiné les grains infectés par Fréchou et en conclut que le rot livide est un parasite. Il est regrettable que nous ne sachions pas si Fréchou, Pirotta et Prillieux ont vraiment travaillé sur des grappes qui étaient sur le cep?

Des expériences dinfection de grappes demeurées sur le cep ont été faites par Viala et Ravaz," qui ont infecté sur des grappes d'Aramon, la pédicelle, la rafle, les pédoncules et Tovaire. En une semaine les pycnides sont apparues.

Baccarini* a constaté d'autre part que l'infection sur les grappes ne réussissait qu'à partir du mois de Juillet.

Ainsi, la nature parasite du rot livide ressort des recherches faites jusqu'à présent, de même que de mes observations publiées ici.

Mais j'ai la conviction que l'étude des altérations au point de vue de la pathologie cellulaire, peut seule servir de base à la pathologie végétale qu'on devrait diriger dans cette voie.

Il faut descendre jusqu'aux détails les plus minutieux en observant l'intérieur des cellules, les changements et le rapport entre la maladie et sa cause, et, outre la haute valeur scientifique de cette méthode, elle peut fournir, en même temps, au point de vue pratique, des indications fort importantes.

Infection des grains.

V Infection du grain par des grains malades.

Le 30 Octobre 1901 j'ai mis des grains sains de Vitis Labrusca var. Isabella avec des grains malades, les premiers tombèrent complètement malades jusqu'au 19 Novembre, et je pus observer que:

1 ' rinfection avait eu généralement lieu à la base du grain (planche XXI, fig. 170), de même que dans la nature. Le grain

* Prillieux, Ed. Sur le parasitisime du Coniothyrium Diplodiella. Comptes Rendus de TAcadémie de Sciences. CV. 1887. II. sem. No. 21 p. 1037. C'est lui qui cite les données de Foëx et Ravaz, Pirotta, Fréchou.

s Viala, P. et Ravaz, L. Recherches expérimentales sur les maladies de la Vigne. Comptes Rendus de T Académie des Sciences. CVI. 1888. 1. sem. No. 25. p. 1711.

■ Baccarini, p. Appunti per la Biologia del Coniothyrium Diplodiella (Speg.) Sacc. Malphigia II. 1888/9. p. 328.

s'était embruni à sa base et Tinfection s'était répandue sur toute la surface.

2^ en ([autres cas plus rares , r embrunissement commença au sommet du grain, se répandant ensuite jusqu'au bas (planche XXI, fig. 171). La pénétration avait donc eu lieu au sommet du grain. Il n'est pas impossible que dans une semblable infection, les pustules enliégées et fendues des grains ne frayent le chemin au parasite. Leur développement n'a pas encore été étudié. Je remarque seulement pour l'instant, que ces pustules prennent naissance par l'enliègement des cellules de Fépiderme, formant des ilôts circulaires, qui se fendent ensuite. J'ai souvent trouvé en ces endroits des pénétrations.

D'ailleurs, au sommet, les restes du stigmate, forment des points d'attaque très favorables, puisque en tous ces endroits, la cohésion de la cuticule est plus ou moins interrompue et qu'ainsi l'organe protecteur le plus important n'offre plus son appui.

2^ Infection des grains par les, spores.

Les recherches antérieures de Cavara, Baccarini, Viala etc. ont prouvé que les grains recueillis peuvent être directement infectés par les spores du rot livide.

Mais on n'a pas dit comment pénètrent les tubes germinatifs et quels changements ils déterminent dans les tissus?

J'ai fait, à ce propos, diverses expériences.

Grains infectés dans Tair humide. Des grappes de la St. Martin (cépage Kôvi dinka), avec la partie de sarment qui s'y rattache ont été enfermées dans une bouteille le 14 Octobre 1901 ; elles sont demeurées fraîches pendant longtemps, parce que le bout de la pousse était dans l'eau.

J'ai alors placé sur de forts grains sains des morceaux des pycnides; une semaine après, le 21 Octobre, les grains présentaient déjà des taches brunâtres-jaunes qui, à l'examen, révélèrent que tinfection tétait accomplie. Les taches jaunes se formèrent par le jaunissement et le gonflement des membranes de l'épiderme, intéressant toujours plusieurs cellules et s'étendirent généralement à partir d'un centre, dans une direction radiale.

Sur le groupe de cellules attaquées de la sorte, on pouvait ensuite voir des spores germées en pénétration. Les cellules

attaquées dépérissent, leur contenu se jaunit, leur membrane devient jaune-brunâtre. Elle se change en brun foncé, traitée par le chloro-iodure de zinc.

Cire. J'attache une grande importance au revêtement de cire granulé qui recouvre le grain de raisin (planche XIll, figure 88). La cire forme souvent par la fusion des granules, des ilôts semblables à des amibes (planche XIll, figure 89). Quand elle est fortement développée, on peut à peine distinguer à travers la cuticule les <:ontours des cellules épidermiques. Mais où elle s'est essuyée, on les voit bien.

Par suite des blessures du grain, la cuticule se fend et on peut suivre les changements qui s'opèrent dans l'état de tension de la cuticule ; des raies ondulées parallèles à la blessure la parcourent, correspondant aux rides de la cuticule délabrée. Ces endroits favorisent tout particulièrement la pénétration des spores <planche XXII, figure 173).

Les granules de cire, irrégulièrement disséminées sur la cuticule peuvent être facilement essuyées. Au microscope, nous voyons des raies transparentes aux endroits où la cuticule est complètement dénudée (planche XIll, fig. 88i). On peut donc facilement reconnaître au microscope si l'épiderme est assez fraîche, ou si les grains ont perdu leur couche de cire par suite de frottements mutuels.

Les taches jaunes, c'est-à-dire les pénétrations apparaissent en plus grand nombre sur les parties de répiderme où la cire a été plus ou moins essuyée.

Il n'est pas superflu de mentionner que la couche de cire est très mince (planche XIll, figure 882), et que la cuticule qui recouvre l'épiderme comme d'une membrane homogène transparente, porte souvent les traces des contours des cellules épidermiques.

Les tubes germinatifs des spores dissolvent directement par leurs extrémités la cuticule et l'épaisse paroi extérieure cutinisée de répiderme. Mais en outre, les cellules voisines jaunissent, dépérissent et toutes ces transformations sont plus apparentes ici que sur l'épiderme des organes axiaux. Les lumières des cellules gonflées disparaissent y les cellules se confondent et forment des ilôts de 8 à 10 cellules très réfringentes à cause de leurs parois gonflées (planche XXII, figure 174).

Cest très remarquable, car je n'ai point vu de changements semblables en étudiant les pénétrations des spores.

En examinant les pénétrations dans des Études sur le Charbon, faites avec M. O. Brefeld,^ je n'ai remarqué que le renflement des membranes de tubes qui étaient pénétrées.

Je n'ai trouvé, que par exception, un renflement de la paroi des cellules épidermiques (I. c. figure 4), mais dans ce cas, la pénétration était ordinairement interrompue.

2. Grains dans de Teau contenant des spores. Pour éclaircir la question: les spores disséminées dans F eau peuventelles attaquer des grains murs? J'ai le 24 Octobre 1001 semé dans de Feau stérilisée, des spores de Coniothyrium et suspendu dans Teau des grains de Chasselas blanc de 15 mm. de diamètre. Les grains étaient placés aux deux tiers dans Teau. (Planche XXII,

fig. 189i.)

Au bout de deux jours, des filaments mycéliens apparurent au fond de la bouteille, car les spores avaient commencé à germer. Le 4 Novembre, des taches brunes se formèrent en plusieurs points de la surface du grain, d'où un mycélium était sorti. (Planche XXII, fig. \%%) Mais un développement de mycélium beaucoup plus abondant était apparu sur le tiers supérieur du grain non immergé, et de petites pustules blanches, commencèrent à s'y former. L'examen microscopique révélait que les taches brunes étaient les lieux d'infection.

Nous avons pu suivre directement la marche de l'infection :

P Le tube germinatif pénétrant à travers l'épiderme se ramifie vite et pousse des branches dans toutes les directions. (Planche XV, fig. 108.) Ondulées et épaisses de 7 -8—9 u., elles pénètrent d'abord entre les cellules, puis s'acheminent dans les membranes, ou passent même par les lumières. (Planche XVI fig. 114c.) Le contenu des cellules devient très transparent et les parties de chlorophylle dépérissent les premières. (Planche XVI, fig. 114a.)

1 Brefeld, o. Untersuchungen aus dem Gesammtgebiete der Mykologie. XI. Die Brandpiize. II. Die Untersuchungen sind ausgefùhrt, mit zeitweiser Unterstutzung von Dr. O. von Istvânffi. 1895. Planche I.

2* Le mycélium serpente ensuite dans les deux couches extérieures de Thypoderme et envoie à peine quelques minces filaments dans les parties les plus intérieures, il s'articule (planche XV, fîg. 109), par endroits en cellules longues de 12 à 16 ,s mais de manière à ce que r autre partie du filament reste indemne.

Sur une section longitudinale du grain, on peut remarquer les filaments, qui rayonnent à partir du foyer de Tinfection. La figure 109 de la planche XV représente un endroit où la ramification a été très abondante et où les filaments se sont répandus dans toutes les directions. Ici dans Thypoderme, Fépaisseur des filaments est de 8 à 9 j/, leur paroi est ridée et en partie renflée. Quelques filaments, tout en s'adossant à la cuticule s'avancent en ligne droite et transpercent toutes les cellules, épidermiques qu'ils rencontrent. La cuticule, de couleur jaune a 1*5 UL d'épaisseur, les cellules de Fépiderme ont 20 [x de longueur et 8 a de hauteur. L'hypoderme comprend généralement 8 couches.

Partie supérieure saillante du grain. Les filaments de mycélium pénétrant le grain transpercent Tépiderme, la cuticule, sortent à sa surface libre, s'y agglomèrent et produisent des pycnides.^ (Planche XXII, fig. 189a.)

La production des pycnides commence dans le sillon d'articulation, qui se forme entre la base du grain et la couronne du pédoncule. C'est ici qu'on remarque les nectaires parvenus à la base du grain. Ce coin a favorisé l'infection, la preuve en est dans la masse des taches jaunes situées sur l'épiderme, en cet endroit.

1<* Le 10 Novembre, des pycnides brunes apparurent en très grand nombre sur la partie du grain non immergée: elles étaient petites rondes, avec 80 a de diamètre et développées exclusivement sur le mycélium parvenu à la surface, La cuticule de l'épiderme, située au-dessous d'elles était indemne et non transpercée. D'ailleurs, on peut fort bien suivre le développement des pycnides superficielles dès la formation de la première spire. (Planche XXII, fig. 181 et 182.)

* De l'enveloppe brune des pycnides sortent parfois des filaments articulés, semblables aux conidiophores de Monilia. (Planche XXII, fig. 180.) Ce sont peut-être des formations produites par des champignons parasites?

2^ L'épiderme indemne recouvert par la cuticule épaisse de 4 pt. ne se fend point, mais les cellules épidermiques ellesmêmes ne sont plus visibles, si nombreux sont les filaments de mycélium développés sous la cuticule. Ils s'agglomèrent en grosses pelotes (150 a de diamètre) et dans les plus grandes, Thyménium s'est développé, produisant même des spores très petites, quoique le péride ne se soit pas encore différencié.

Il résulte de cette expérience:

1* que les spores peuvent germer dans de l'eau de puits stérilisée et

2® peuvent pénétrer dans l'épiderme immergé des grains plongés dans l'eau, mais sans y produire de pycnides;

3^ le mycélium grimpe sur la partie non immergée du grain et produit sur cette surface libre de petites pycnides;

4^ le mycélium pénétrant de l'extérieur par le haut, ou montant par l'hypoderme s'il s'est développé plus bas dans la partie submergée, donne naissance à des pycnides aux points du grain non submergés.

Ce qui prouve que le mycélium a besoin d'air parce que dans la partie immergée, où il n'en avait pas, il n'a pu produire de pycnides.

Infection de la pédicelle.

P Pédicelle infectée dans Teau. Dans de l'eau de puits stérilisée mélangée de spores, on suspendit le 14 Septembre 1901 des grappes à pédicelles vertes. La jeune pédicelle encore verte est seule susceptible d'être attaquée par le rot livide et l'infection s'est fort bien développée.

Dans la jeune pédicelle les faisceaux ne se sont point encore unis, ceux qui se développent dans le cambium interfasciculaire sont encore très tendres.

La structure de l'écorce est très simple. Au-dessus de l'épiderme se trouvent deux couches composées de cellules rondes (de 16 à 24 u. de large et 48 à 80 [f^ de long), puis 4 à 5 couches de cellules collenchymatiques et à l'intérieur, du parenchyme cortical plus étendu (30 à 50 a). (Planche XX, fig. 162.) De petits groupes de jeunes fibres sclérenchymatiques, viennent se coller sur la partie libérienne des faisceaux.

Les pédicelles étaient, dès le 21 Septembre, parsemées de taches jaunes, qui permettaient de remarquer immédiatement llnfection.

Les filaments percent à travers le collenchyme et beaucoup pénètrent par la même cellule^ ils s^ attachent les uns au liber quHls détruisent rapidement, les autres aux rayons médullaires quHls traversent pour se rendre directement dans la moelle (le diamètre des cellules est de 80 à 100 a) et de /à, dans le bois primaire.

Les pénétrations sont fadies à reconnaître, parce que la membrane de la cellule épidermique en question et même sa voisine est très gonflée et F épaississement continue le long du filament en forme d^ entonnoir.

Souvent, plusieurs points de pénétration sont presque réunis, parce que les cellules voisines ont été attaquées par les spores. Après la pénétration, on peut remarquer sur les cellules de Fépiderme la membrane des spores secondaires déformées vide et des parties du tube germinatif Ceci vient à disparaître également et alors le trou se bouche complètement, grâce aux parois de Fépiderme gonflées. Ainsi, après la pénétration faite, on ne voit plus d^ ouverture sur les points renflés, ce qui peut induire facilement Fobservateur en erreur.

L'orifice de percement étant bouché. Feutrée est ainsi défendue même aux autres parasites (planche XXII, fig. 191). Par endroits, les pénétrations sont très nombreuses, on en peut compter jusqu'à 35 sur un fragment d'épiderme de 0*6 mm^ (sur une pédicelle de 15 mm.de large ; planche XXII, fig. 190).

La paroi extérieure de Fépiderme d'une pédicelle est ordinairement assez épaisse (6 j/), mais aux endroits où les tubes germinatifs des spores la transpercent: cette paroi extérieure (planche XXII, fig. 192), et mêmes les cloisons latérales, d'ailleurs fort minces, se gonflent aussi en forme de cônes et forment des épaississements ronds ou coniques brillants.

La paroi extérieure de Fépiderme et les épaississements deviennent jaunes sous l'action du chloro-iodure de zinc, ainsi que la moelle, les rayons médullaires du bois, le bois lui-même et les cellules sclérenchymatiques, tandisque les éléments primaires du bois demeurent incolores.

Les membranes du liber prennent une couleur rougeâtre sale, de même que le contenu de beaucoup d'éléments libériens. Le collenchyme brille d'une certaine nuance violette, les rayons corticaux et la paroi des cellules de Fécorce restent incolores.

Lorsque le chloro-iodure de zinc continue à agir, le bois qui était jaune, le sclérenchyme et la moelle prennent une couleur jaune-or ; tandisque la cloison des cellules épidermiques et les épaississements en forme de cônes deviennent bruns. On ne rencontre d'amidon nulle part, la pédicelle est vide, ce qui la prédisposait à la maladie.

2^ Pédicelle de grappe infectée à l'air humide. On plaça le 14 Octobre 1901 sous une cloche à l'air humide, une grappe de Kôvi dinka (Vitis vinifera), avec la partie de sarment y adhérant. Sa pédicelle avait été infectée par des débris des pycnides contenant des spores mûres.

Le 20 Octobre, des taches brunes apparurent sur la pédicelle. L'examen microscopique révéla que les cellules épidermiques s'étaient embrunies par groupe, que leur contenu avait dépéri, et que les cellules situées au-dessous d'elles avaient aussi souffert. En même temps, toutes ces cellules s'étaient collabées et une tache renfoncée s'était formée.

Il y avait toujours beaucoup de spores sur ces taches brunes, et, chose remarquable, la membrane cellulaire épidermique sous les spores jaunissait toujours, même si les spores n'avaient point germé et si de la sorte, la cellule en question n'avait pas été directement blessée. Ceci prouverait qve la vitalité des spores exerce un effet pernicieux sur la membrane cellulaire exposée à un air saturé de vapeur et permet de supposer que, dans tair humide, les spores sont capables de sécréter des enzymes qui attaquent la cellulose.

J'ai constaté, relativement aux taches brunes que la dévastation des cellules épidermiques a commencé le plus souvent autour des stomates. Il n'y a que très rarement des pénétrations sur les taches brunes.

Infection des sarments.

1. Infection de la moelle. Le 11 Janvier 1902 on perça un trou dans la moelle d'un certain nombre de boutures, à leurs extrémités supérieures, ec on remplit le trou de moût mélangé de

spores brunes mûres. Les boutuies furent placées dans des éprouvettes, fermées à la ouate, et y demeurèrent jusqu'au 23 Janvier.

En examinant les sections longitudinales pratiquées à l'endroit de l'inoculation, on constata que non seulement des spores, mais encore des pycnides étaient parvenues dans la moelle.

Les spores germaient, mais elles ne poussèrent que des filaments très minces, qui continuèrent à croître dans les cellules médullaires voisines, dont la paroi jaune était déjà lignifiée. La paroi de ces cellules était devenue par suite brune-jaunâtre, mais sans montrer de gonflements. On remarquait que dans les cellules médullaires complètement vides, les filaments n'avaient pénétré que rarement par la partie épaissie, mais étaient passés régulièrement par les ponctuations de la membrane.

Les filaments souvent moniliformes étaient généralement très faibles, minces (de 2-3 a de large), et ne croissaient ordinaire- • ment que par 3—4 couches de cellules.

Ainsi la simple dose de moût qu'on avait ajoutée ne leur permit pas de se développer plus vigoureusement dans les cellules médullaires généralement presque vides et ne renfermant point de plasme. Les filaments germinatifs des spores qu'on avait placés au milieu de la moelle, ne purent donc pas atteindre la partie extrême de la moelle riche en tanin et en amidon, même avec le secours du moût ; ainsi le bois ne fut pas infecté. Ils ont dépéri, faute de nourriture, avant d'y être parvenus. On peut donc conclure qu'avec une nutrition exclusivement saprophyte:

\^ la cellulose lignifiée ne convient pas à la croissance des filaments germinatifs du rot livide (à défaut de protoplasme), même s'ils peuvent se servir du liquide nutritif;

2" Les filaments germes de la sorte, ne sont pas assez vigoureux pour transpercer directement les membranes cellulaires plus épaisses déjà lignifiées, ou pour pouvoir ensuite se développer en elles comme nous V avons vu dans les moelles non lignifiées des pousses vertes de Jabuka,

y^ On peut en tirer la conclusion pratique, qiiil ri est pas vraisemblable que V infection se produise à travers la moelle lignifiée des boutures stratifiées.

4° Les couches périphériques de la moelle contiennent beaucoup de tanin qui peut fort bien servir de défense contre rinfection intérieure.

2. Infection des sarments sur une section transversale. Il peut être intéressant d'étudier la question suivante: Quels tissus du sarment aoûté permettent la pénétration des filaments germinatifs du rot livide, c'est-à-dire les sarments coupés transversalement peuvent-ils être infectés directement du dehors par les filaments, qui se développent sur le plan de section et sur leur écorce?

A cet effet, on plaça des morceaux coupés de sarments aoûtés, dans du moût, mélangé de spores mûres, le 11 Janvier 1902 (à une température de 25 C^). Les spores ne tardèrent pas à germer et, au bout de deux jours, de petits flocons de mycélium apparurent.

Je constatai, à l'examen, que les filaments germes pénétraient généralement dans les vaisseaux ligneux ouverts, quelques autres dans les rayons médullaires, mais sans continuer à s'y développer. Le sarment coupé ne fut pas dans ce cas infecté.

Infection des racines adventives.

Des morceaux de sarments poussant des racines adventives furent placés dans du moût mélangé de spores brunes et conservés à une température de 25 C^. Les spores germèrent en deux jours, et développèrent un mycélium abondant.

Une partie des spores germa sur les racines adventives, et perça directement leurs tissus. La plupart des spores étaient située à l'extrémité de la racine, couverte d'une coiffe mucilagineuse. Les jeunes poils de la racine apparurent en petit nombre^ derrière le sommet de la racine à 800 (jl d'éloignement.

ils n'étaient longs que de 80 a et épais de 8 j/., avec des bouts arrondis; et entre eux, sur les jeunes cellules épidermiques on pouvait apercevoir des perforations autour desquelles la paroi cellulaire était toujours gonflée et jaunie. Les tubes s'étaient creusés profondément dans la racine, mais sans produire de pycnides.

Infection des planttiles.

1. Le 19 Décembre 1901 nous suspendîmes dans de F eau mélangée de spores des plantules de vigne, dont la partie épicotyle atteignait une longueur de 8 cm. Je remarquai le 28 Décembre sur répiderme parsemée de taches jaunes, beaucoup de points de pénétration.

Cest caractéristique pour les pénétrations qui se présentent sur les cloisons radiales (de cellules épidermiques) de constater qu'autour du trou la membrane cellulaire se gonflait fortement (sh), que ses couches les plus intérieures ainsi que la lame moyenne étaient brunâtres-jaunâtres, les couches extérieures incolores et éloignées les unes des autres d'une façon irrégulière et ondulée (planche XXII, fig. 183).

Le dégât de la membrane cellulaire se répandait à distance, toutes les parois latérales de la cellule malade jaunissaient, et même les voisines en souffrirent et se gonflèrent aussi (planche XXII, fig. 176).

Le tube germinatif, en gonflant la membrane, s'achemine souvent dans les couches gonflées (m), se comportant ainsi comme un vrai parasite de cellulose (planche XXII, fig. 177).

2. Dans d'autres cas, les filaments germinatifs pénétraient par le milieu de la paroi extérieure de l'épiderme. Le filament développé du tube germinatif se présentait alors comme un parasite de plasme,

La spore germée poussait un tube court qui transperçait aussitôt (sur une longueur de 2 3 spores), la membrane cellulaire.

Autour du Irou, généralement oblong, la paroi épidermique jaunissait et se soulevait vésiculairement, en imitant de grandes ponctuations aréolées (planche XXII, fig. 178 et 185—187).

Parvenu dans l'épiderme, le filament mycélien se ramifie richement, et continue à croître, en dévastant aussitôt le protoplasme partout où il entre en contact avec lui (planche XXII, figure 175). Dans la cellule représentée par la figure citée, le filament a déjà dévoré une partie du protoplasme, il se recourbe alors en arrière à gauche pour y chercher de la nourriture.

Sous répiderme les filaments couraient parfois à travers les méats cellulaires, 3 à 4 filaments formaient faisceau et continuaient ainsi leur chemin le long de plusieurs cellules ; tandisque les autres transperçaient généralement les cellules directement (planche XXII, figure 184).

Le développement des pycnides sur les plantules ne se produisit pas, car ces plantules infectées dans l'eau, ne se développèrent plus, une fois plantées. Une plantule de pois fut aussi infectée et sur elle, les pénétrations apparurent de la même façon.

3. Le 15 Janvier 1902 nous avons arrosé la terre de jeunes plantules de vigne âgées de 3 semaines, avec de Feau contenant des spores brunes. Dans l'intervalle de 2—3 semaines l'infection s'établit immédiatement au-dessus de la surface du sol, et les jeunes plantules dépérirent.

4. Infection des pousses vertes à travers le sol. Des boutures enracinées, cultivées dans du sable, furent arrosées le 14 Mai de moût mélangé de spores brunes. L'arrosage avec du moût contenant des spores fut ensuite répété deux fois à des intervalles de 5 à 6 jours.

Les pousses vertes qui se développèrent pendant ce temps montraient des changements à leurs parties touchant le sable dès le 12 Juin. Elles commençaient à brunir, et dépérirent L'examen révéla à leur intérieur des filaments mycéliens.