RACINES | RACINES

RACINES de, RES res séchées | séchées Na rase ir Re SC ER PSE ER EUR MODEM ER ME ES RON RS RTS Rotation initiale ({ — LE Mettre .[— 3024 |— 1055 | — 43 — après action de l’invertine...... —12043 |— 10053” | — 9°36? — — l'émulsine ...... — 1929 |— 1016 | — 2°14° Sucre réduc eu MITA lERE REP TRE 02600 CO 197749

= après actionde l’invertine| 6,714 7, 099 7,560 — — lémulsine | 8,104 | 8,251 8, 449

Changement de rotation par l’invertine..| 9o 19? 80 587 8°53° Sucre réducteur produit par l’invertine ..| G6sr114 59r696 5as811 Changement de rotation par l’émulsine..| 11°21° BTE 7022? Sucre réducteur produit par l’émulsine..| 19390 19152 Ocr882

AT ER SE On voit que, au cours de la dessiccation, il y a eu une diminution de la rotation initiale, gauche, en même temps qu'une

augmentation de sucre réducteur. On remarquera, en outre, que la quantité de sucre réducteur total {sucre réducteur après

EN te

action de l'émulsine) est plus forte dans la racine séchée à l'air que dans les deux autres, et que la racine séchée à l'étuve en renferme encore plus que la racine fraîche. Il semble donc qu'il se soit produit, pendant la dessiccation, une certaine quantité d’hydrates de carbone hydrolysables par l'invertine, aux dépens de composés sur lesquels n’agirait pas ce ferment, Peut-être se produit-il, pendant la dessiccation toujours longue d’une racine, un phénomène analogue à celui qui se passe pendant la maturation des fruits, phénomène que l’on aurait déjà remarqué autrefois pour la racine de betterave conservée à l'air (1).

L'augmentation de la rotation gauche, sous l’action de l’invertine, est à peu près la même dans les trois cas. On peut donc penser que les sucres hydrolysables par ce ferment, saccharose et gentianose, n’ont pas été transformés au cours de la dessiccation. Les retours de la déviation vers la droite sous l’action de l'émulsine sont plus différents ; mais la quantité de sucre réducteur produite pour un retour de 1° est restée sensiblement la même : 0 gr. 122 ; O0 gr. 119; O gr. 119.

Ce qui indique que les principes dédoublables par l’émulsine sont les mêmes dans la racine fraîche et dans la racine séchée à l’air. .

Pour nous rendre compte des différences qui existent entre la composition des racines séchées à l’air ou à l'étuve et celle de la pouäre des pharmacies, nous avons essayé celle-ci par la même méthode. Le tableau ci-dessous résume les résultats de nos expériences. La colonne IIT renferme les résultats publiés en 1902 par MM. BourqueLor et Hérissey (2), qui, déjà à cette époque, avaient essayé une poudre de Gentiane officinale par le même procédé ; 100 cm* correspondant dans ces essais à 100 gr. de produit sec.

(1) J.-P. BouneT. — Bulletin de Pharmacie, I, p.77, 1809.

(2) Em. BourQuELOT el H. HÉRISSEY. — Les sucres de la poudre et de l'extrait de Gentiane ; préparation du gentiobiose en partant de ce médicament (Journ. de Pharm. et de Chim. (6) XVI, p. 513, 1902).

Tableau II.

Pour l’une des poudres officinales, la rotation initiale se rapproche beaucoup de la rotation initiale du produit séché simplement à l'air; pour l’autre, la rotation initiale est légèrement droite. La différence la plus forte que l’on remarque entre les poudres et les racines se trouve dans le changement de rotation Provoqué par l'émulsine, ainsi que dans les quantités de sucre réducteur produit en même temps que ce changement optique. On trouve, ici, pour un retour de Ja déviation vers la droite de 1°, 0 gr. 273 et 0 gr. 230, chiffres qui sont de beaucoup supérieurs aux deux autres : 0 gr. 119. On pouvait donc penser que, pendant la fermentation, les glucosides étaient presque totalement décomposés et que ce faible retour vers la droite sous l'influence de l'émulsine pouvait provenir de l’hydrolyse du gentiobiose que la Gentiane des pharmacies renferme en assez grande quantité.

Cette hypothèse pouvait être vérifiée en utilisant la propriété que possède l’éther acétique de dissoudre la plupart des principes glucosidiques sans dissoudre une quantité notable d'hydrates de carbone. C’est d'ailleurs ce procédé qui est préconisé par M. G. Taxrer pour l'analyse d'un extrait de Gentiane que l’on divise ainsi en deux parts : d’un côté,les principes glucosidiques, de l’autre, les principes sucrés,

ENT Le

En traitant la poudre par l’éther acétique,on dissoudrait donc uniquement les glucosides, et les sucres: saccharose, gentianose et gentiobiose, ne passeraient pas en solution.

En conséquence, nous avons fait l'essai suivant sur notre poudre de Gentiane séchée à l’air et sur la poudre officinale.

On a épuisé les poudres par l'éther acétique saturé d’eau ; on a distillé l’éther acétique; on a repris par l’eau l'extrait obtenu et on a fait agir, directement, l'émulsine sur le liquide ainsi préparé, dont 100 cm° correspondaient à 100 gr. de poudre.

Voici les résultats de cette expérience :

Tableau III.

« à Fri POUDRE Le Serra Lofficinale IV séchée à Pair

HRofaHonAniiale (=D) ee een eee — 21°11 -— 3020 SHUCRETÉdUCIORE EMEA eee eee ceci Our 612 Our467 Rotation après action de l’émulsine ......... + 19 — 45 Sucre réducteur après action de l’émulsine.. 29r 890 Our 842 Changement de rotation par l'émulsine ..... 21°30° 2035’ Sucre réducteur produit par l'émulsine..... 21" 278 Or375 ME ac asian no ia 106 144

La différence entre la composition des deux poudres apparaî ici nettement. Les principes glucosidiques dédoublables par l’émulsine ont presque entièrement disparu dans la poudre officinale, puisqu'on n’observe plus, sous l'action de ce ferment, qu'un changement de rotation de 2°35’, avec formation de 0 gr. 375 de sucre réducteur. De plus, l'indice de réduction enzymolytique que l’on calcule est 145, chiffre assez éloigné de l'indice de la gentiopicrine, 111.

Au contraire, ces principes existent en quantité notable dans la poudre préparée avec des racines séchées à l'air.

On constate, en effet, un changement de rotation de 21930, avec formation de 3 gr. 278 de sucre réducteur : ce qui donne un indice de 106, très rapproché de celui de la gentiopicrine.

Extraction du glucoside. — Les indications données par ces recherches nous ont porté à essayer de préparer la gentiopicrine en partant de cette poudre, c’est-à-dire de la poudre séchée simplement à l'air, sans précautions spéciales. Nous avons employé pour cela deux procédés qui, tous deux, nous ont fourni le glucoside en proportion relativement élevée.

Le premier nécessite moins de manipulations, mais le produit obtenu de premier jet est moins pur. On épuise directement la poudre de Gentiane par l'éther acétique saturé d'eau, dans un appareil de SoxaLer. Par concentration convenable du dissolvant, la gentiopicrine cristallise.

Le second procédé, qu’il est préférable d'employer dans un laboratoire, est celui que donne M. G. Tanrer pour obtenir la gentiopicrine de la racine fraiche de Gentiane :

On épuise la poudre par de l'alcool bouillant. On évapore à sec le liquide obtenu ; on additionne l'extrait d'environ 17 pour 100 d'eau et on l’épuise par 30 fois son poids d'éther acétique saturé d’eau et bouillant. 11 suffit de concentrer cette solution par distillation de l'éther acétique pour obtenir la gentiopicrine cristallisée, impure, que l’on n’a plus qu’à purifier.

Nous avons obtenu, par ces deux procédés, environ 3 gr. 50 de gentiopicrine brute pour 100 gr. de poudre, rendement pratiquement avantageux.

La gentiopicrine, convenablement purifiée et desséchée à l'air, présentait les caractères suivants :

Pouvoir rotatoire : & p = — 196°,3 (p= 0,2522; v— 15; 1— 92; « — — 636).

On a ajouté de l'émulsine à la solution ayant servi à prendre le pouvoir rotatoire. Après vingt-quatre heures, la solution accusait une rotation de + 50’, avec formation de 0 gr. 859 de sucre réducteur pour 100 cm*; ce qui donne un indice de réduction enzymolytique de 115 ; (Théorie 111).

Extraction du sucre (1). — Comparons, dans le tableau I{, les changements de rotation produits par l'invertine, ainsi que

(1) Marc BRiDeL. — Journ.de Pharm. et de Chim. (7, IV, p. 455, 1911).

est

la quantité de sucre réducteur produit par le même ferment, dans les colonnes IT, IT et IV. On voit que la fermentation qu'on fait subir aux racines de Gentiane pour obtenir le produit commercial est la cause de l’hydrolyse d'une forte proportion d'hydrates de carbone (saccharose et gentianose). En effet, tandis que la poudre de Gentiane séchée à [l’air, sans fermentation, donne, sous l’action de l’invertine, 18 gr. 745 de sucre réducteur pour 100 gr., une poudre officinale n’en donne que 6 gr. 735 et l’autre encore moins, 3 gr. 10 : ce qui représente une diminution d'environ deux tiers pour la première et des cinq sixièmes pour la seconde.

Dans la poudre de Gentiane séchée à l’air, la proportion de ces hydrates de carbone était telle qu'on pouvait songer à en isoler le sucre à l'état cristallisé.

Dans ce but, on a traité un extrait alcoolique, déjà épuisé par l’éther acétique, c’est-à-dire, débarrassé des glucosides, de la façon suivante :

Cet extrait, séché dans le vide, a été additionné d’une certaine quantité d’eau, de façon à obtenir un sirop épais. On a traité ce sirop par l'alcool à 95e, à l'ébullition. On a laissé refroidir et on a décanté, après un repos de plusieurs jours, pour séparer le liquide clair d’un extrait qui s'était déposé. Ce procédé est celui qui avait permis à MM. BourqueLor et NarpiN d'isoler le gentianose contenu dans la racine fraîche de Gentiane.

Le liquide clair ainsi obtenu a été amorcé avec du gentianose cristallisé. Malgré cette précaution, et malgré un repos de plusieurs mois, il n’a laissé déposer aucun produit cristallisé.

On l’a alors évaporé à sec, sous pression réduite, et on a traité l'extrait par de l’alcool à 95c bouillant, en employant, à chaque extraction, 100 cm° de dissolvant. On a fait ainsi quatre extractions.

En quelques jours, il s'est fait, dans les quatre traitements, une cristallisation abondante. On a obtenu 12 gr. d’un produit blanc, sucré, que l’on a purifié en le faisant cristalliser dans l'alcool à 95°.

Le produit ainsi obtenu était pur. Il avait une saveur fortement sucrée ; en solution aqueuse, il ne réduisait pas la liqueur de Fehling, à l’ébullition.