L'OZONE SUR LE BACILLE DE LA DIPHTÉRIE
L'examen microscopique des cultures (culture ordinaire et culture ozoninlsée) nous révèle l'existence, outre les bacilles de Lœffler, d'éléments en bâtonnets courts terminés par une extrémité carrée. Malgré cette cause d'erreur, nous pratiquons des inoculations : >
Cobaye i. i/4 centimètre cube, culture témoin.
"" ^ '{^ "" 'culture B,
— 3. i/io — )
— ^ '/^ - ^culture A.
— 5. i/io — )
En même temps, nous ensemençons trois ballons avec chacune des cultures d'épreuve.
7 mars. — Les cobayes i, a et 4 (i/4 centimètre cube) sont morts; les résultats de l'autopsie sont les suivants :
Cobaye i (témoin). — Nous trouvons un gros œdème au point d'inoculation, avec engorgement ganglionnaire du groupe inguinal ; les capsules surrénales sont hyperémiées; les intestins présentent une congestion interne; un épanchement occupe la plèvre de chaque côté.
Cobaye 2. — Nous observons un œdème au point d'inoculation et de la congestion des capsules surrénales. Pas de pleurésie.
Cobaye 3, — Œdème de la cuisse inoculée. Pas de pleurésie ni de congestion des capsules surrénales.
Les ensemencements que nous avons effectués avec les trois cultures ont amené une prolifération d'égale intensité.
8 mars. — Le cobaye 3 meurt. Le cobaye 5 survit avec un léger empâtement de la cuisse.
28 mars, — Nous pratiquons l'autopsie du cobaye 5; nous constatons un abcès au point d'inoculation, sans relever aucun signe d'intoxication diphtérique.
Ainsi, nous n'avons pu entraver le développement du bacille de Lœffler; sa végétabilité a été enrayée dans une mesure proportionnelle à la quantité d'ozone avec laqueUe les cultures furent en contact.
Les cultures effectuées avec les cultures ayant subi l'influence de l'ozone ne nous présentent aucune particularité.
Les inoculations nous ont montré que les lésions caractéristiques chez l'animal injecté avec une culture ordinaire sont à peine généralisées chez les cobayes qui ont reçu i/4 de centimètre cube de culture ozonisée et simplement locales chez le cobaye qui a survécu à l'injection de i/io de centimètre cube de la même culture.
Nous ne pouvons cependant accorder à cette expérience toute la valeur scientifique désirable, en raison de l'intervention d'un élément étranger que nous avons signalé plus haut. Une nouvelle expérience était donc nécessaire.
88 ARCHIVES DÉI.KCTRiaTÉ MÉDICALE.
ExpéaisHCB IV. — 7 mars. — Ensemencement de diphtérie (culture Ifanc^) dans le bouillon nutritif; en même temps ensemencement dans un ballon réservé comme témoin.
()n expose la culture contenue dans un flacon à un courant d'ozone pendant lo minutes; la quantité de gaz qui traversa le flacon fut égale à 6^ litres.
12 mars. — Nous remarquons que la prolifération bacillaire s*est produite dans la culture d'épreuve et la culture témoin, plus abondante cependant dans cette dernière.
Inoculations :
Cobaye i . i/4 centimètre cube. J ^ ^ , ,
' / S Culture ozonisée.
— a. i/io — *
"" / / ~" J Culture ordinaire.
— 4. i/io — )
/4i mars, — Les cobayes 3 et 4 (témoins) sont morts. Nous relevons les lésions suivantes sur chacun d'eux.
Cobaye 3, — Œdème dé la cuisse inoculée avec envahissement ganglionnaire inguinal. Congestion des capsules surrénales et de l'intestin. Épanchements pleuraux abondants chez le cobaye 3.
Cobaye U. — Mêmes lésions. Épanchement moins considérable.
f6 mars, — Le cobaye a meurt. L'autopsie nous donne une congestion assez intense au point d'Inoculation ; nous ne constatons aucune lésion sur les capsules surrénales, llntestin, ni épanchement dans les plèvres.
Le cobaye i a survécu.
Dans cette expérience, outre l'influence sur la végétabilité, nous observons donc une atténuation de la virulence, ainsi que le prouvent l'absence de lésions généralisées sur le cobaye inoculé avec la culture ozonisée et la survie de celui qui a reçu t/4 de centimètre cube de la même culture.
En résumé, nous pouvons conclure de nos expériences sur le bacille de Lœffler :
1** L'ozone, à la dose où nous l'avons employé (quantité maxima = 468 litres; proportion par litre : o"«',25) est incapable de tuer les bacilles en milieu nutritif liquide ;
a*' 11 peut atténuer sa végétabilité dans un espace de temps qui n'excède pas quarante-huit heures, mais permet ultérieurement une prolifération cependant moins intense que les cultures ordinaires ;
S*" Il agit en atténuant la virulence des bacilles au point de permettre la survie des cobayes inoculés et de ne produire chez ceux qui succombent que des lésions purement limitées au point d'inoculation.
l'ozonk sur le Bacille de la diphtérie. 89
ACTION DE l'ozone SUR LA TOXINE DIPHTERIQUE.
Afin d'expliquer plus clairement Taction que paraissait avoir l'ozone sur les bacilles, nous avons pensé qu'il était nécessaire de tenter de nouveUes expériences. Négligeant cette fois le rôle de ce gaz sur la vitalité des microbes, nous nous sommes attachés à démontrer Finfluence de Fozone sur la virulence des microbes, autrement dit nous avons résolu de résoudre la question suivante : si l'ozone possède cette action bactéricide que lui prêtent certains auteurs, ne pourrait-il aussi avoir un rôle antitoxique; n'est-il pas susceptible de former avec les produits solubles des bacilles un composé moins virulent que les sécrétions microbiennes elles-mêmes?
C'est pour cette raison que nous avons recherché l'influence de l'ozone sur la toxine diphtérique. Ne connaissant aucun essai tenté antérieurement sur ce sujet, nous nous contenterons de relater les expériences que nous avons faites.
Le dispositif était semblable à celui que nous avons décrit plus haut; les conditions expérimentales absolument identiques. Le flacon renfermant la toxine, de même capacité que précédemment, remplaçait celui qui contenait la culture dans les expériences sur les baciUes.
Afin d'apprécier exactement la virulence de la toxine que nous avons employée, nous l'avons inoculée à doses variables à des cobayes. Ces doses étaient respectivement égales à :
Cobaye i i centimètre cube.
— 4 i/io — .
— 7 "Mo —
La toxine (toxine David) provenait d'une culture du 28 décembre 1901, filtrée le 7 janvier 1902. Nous avons pratiqué les inoculations le 9 janvier chez les cobayes i, a, 3 et 4, et le 2a janvier chez les cobayes 5, 6, 7 et 8.
Cobaye i, — Inoculé le 9 ('i centimctre cube). — (îros œdème local, le 10; mort le 11.
Autopsie: Congestion de Tintestin et des capsules surrénales. Pas de pleurésie. E^nvahissement ganglionnaire inguinal du c6té inoculé.
Cobaye 2 (1/2 centimètre cube). — Mort le 10. Mêmes lésions.
Cobaye 5 (1/4 centimètre cube). — Mort le 11.
Autopsie: Congestion de Fintestin; hyperémie des capsules surrénales, épanchement pleural; tuméfaction au point inoculé : pas de suppuration.
Cobaye U (i/io centimètre cube). — L'œdème de la cuisse, léger le 10 janvier, est considérable le 11. Le cobaye meurt le 12.
Autopaie : Hyperémie de l'intestin et des capsules surrénales; pas d'épancbement; pas d'abcès local.
Cobaye 5 (i/ao centimètre cube). — Mort cachectique le 24 février. Il présente un gros œdème de la cuisse avec tuméfaction des ganglions.
Autopsie: Congestion de l'intestin; ni hyperémie des capsules surrénales ni épanchement pleural. Congestion au point d'inoculation ; ganglions inguinaux volumineux.
Les cobayes 6, 7, 8 survivent; nous en cessons l'observation après le 24 février.
Ainsi, la toxine que nous employons est encore virulente pour le cobaye à la dose de i/ao de centimètre cube. Avec les doses i/3o, i/4o, i/5o, on constate la survie de l'animal inoculé.
Expérience I. — 22 Janvier 1902. — Nous faisons barboter dans la toxine contenue dans un ballon 67 litres d'air ozonisé ; le courant de gaz passe pendant i5 minutes.
Nous n'observons aucune modification du liquide; le flacon est laissé à la température du laboratoire.
23 Janvier. — Nous injectons la toxine à quatre cobayes :
Cobaye i i centimètre cube.
— 4 «/lo —
25 Janvier. ^ Le cobaye i meurt avec tous les signes de l'intoxication diphtérique.
27 Janvier, — Cobayes 2 et 3 morts.
L'autopsie nous révèle l'hyperém le des capsules surrénales et de l'intestin. Pas de pleurésie.
28 Janvier. — Cobaye 4 mort.
Congestion de l'intestin; épanchement pleurétique; pas d'hyperémie des capsules surrénales. Congestion au point d'inoculation. Ganglions inguinaux tuméfiés.
Ainsi, le passage d'un courant d'ozone n'a modifié en aucune sorte la virulence de la toxine : tous les cobayes inoculés succombèrent
l'ozone sur le BACILLK DE LA DIPHTÉRIE. 91
même à la dose de i/io de centimètre cube et avec les lésions caractéristiques de l'infection. Nous devons donc tenter une seconde expérieDce en augmentant la quantité d'air ozonisé.
Expérience IL — Nous faisons passer un courant d'air ozonisé à travers un flacon contenant une nouvelle quantité de toxine.
Le nombre de litres et le calcul de temps employé dans chaque séance sont donnés par les chiffres suivants :
QU41ITITÉ. TBMP8.
27 Janvier 19 litres. 6 minutes.
f février 65 — i5 —
Total. . . . a22 litres.
Nous remarquons qu'à mesure que nous répétons les séances d'exposition à l'ozone, la toxine prend une teinte de plus en plus foncée et présente une coloration nettement brune le dernier jour.
Le 3 février, nous iiyectons la toxine à quatre cobayes :
Cobaye i i centimètre cube.
— 3 ijfio —
Nous observons pendant les jours suivants :
Le cobaye i présente un œdème le lendemain du jour de l'inoculation, 4 février, qui augmente le 5 et le 6, puis demeure stationnaire.
Même constatation pour le cobaye 2. Nous ne trouvons ni tuméfaction de li cuisse inoculée, ni engorgement ganglionnaire cbez les cobayes 3 et 4.
S mari. — Tous les cobayes inoculés ont survécu ; nous cessons l'obser- ▼itbn à partir de cette date.
Donc, en augmentant la quantité d'ozone, jusqu'au nombre de saa litres, nous obtenons l'atténuation de la virulence de la toxine, ainsi que le démontre la survie des cobayes injectés même à la dose de I centimètre cube.
ExpÉRiKNGB m. — Afin de rechercher plus nettement le degré d'atténnatioD de la toxine, nous réalisons une nouvelle expérience en maintenant U quantité d*oxone dans une proportion intermédiaire à celles que nous atons employées dans les expériences a et 3.
9^ AI\CHIV£S D'ÉLKGTRICITË MÉDICALE.
Wcid la liste des nombres obtenus.
OVAHTIT^. TEMPS.
24 mars 4^ litres. i5 minutes.
Total. . . . i63 litres.
Nous observons encore le changement de coloration que nous avions déjà constaté dans Texpérience précédente.
5 mai. — Nous inoculons quatre cobayes.
Cobaye i 1/2 centimètre cube.
— a. ...... . i/io —
Les cobayes i et 2 présentent les jours suivants un œdème local.
Les cobayes 3 et 4 meurent cachectiques le 21 mai. L'autopsie ne nous révèle aucun signe d'infection.
Les cobayes i et 2 succombent le 26 mars.
L'autopsie nous fournit les renseignements suivants :
Cobaye i : légère congestion de l'intestin et des capsules surrénales; pleurésie légère plus accentuée du côté droit. Rien au point d'inoculation.
Cobaye 2 : Mêmes lésions.
La quantité d'ozone (o"^,a5 par litre) renfermée dans i63 litres d'air est donc suffisante pour atténuer jusqu'à un certain point la toxine diphtérique. Les cobayes inoculés avec les doses de 1/2 et i/io de centimètre cube présentent, malgré les signes d'une infection généralisée de moyenne intensité, une survie de vingt et un jours.
Cette dernière expérience confirme la précédente.
Nous résumerons donc nos expériences sur la toxine diphtérique de la façon suivante :
Dans une quantité d'air ozonisé à o'^^'yib par litre inférieure à 60 litres, l'action a été négative. En élevant la quantité au-dessus de i5o litres, nous avons obtenu par inoculation au cobaye une survie de dix jours. Au delà de aoo litres, la survie est illimitée, même sous l'eiTet d'une dose de i centimètre cube, alors que le témoin a succombé au bout de vingt-quatre heures avec une dose de 1/2 centimètre cube.
Travail des Laboratoires de Physique médicale et de Médecine eipérimentale de la Faculté de Lyon.
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