PAR LA CULTURE
Les cultures étant régulièrement pratiquées par les mêmes techniques : ensemencement parcellaire direct des cheveux malades, sur un même milieu d'épreuve : maltose 4Vo peptone IVo, les cultures du Tr. acuminatum et du Tr. crateriforme se distinguent entre elles dès leurs premiers jours. La culture qui deviendra crateriforme est représentée à ses débuts par une petite houppe blanche semblable à une minuscule houppe à poudre de riz, tandis que la culture qui deviendra plus tard acuminée pousse d'abord
(1) De ces 2^^ derniers cas, 15 sont dus au> Trichophyton à culture violette fTr. violaceu^n Sab.; et cinq à des Trichophy tons pseudo-cratériformes, différents du Trichophyton crateriforme vrai, et incomplètement étudiés jusqu'ici.
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au-dessus d'une petite coupole qui se développera peu à peu, plusieurs digitations poilues qui resteront toujours visibles au centre de la culture devenue adulte (fig. 1, 3 et 4).
Suivons le développement de chacun de ces deux types sur le milieu d'épreuve maltosé. Le Tr. crateriforme s*étend par ses bords, et la houppe à poudrer devient un petit gâteau blanc, velouté.
Fig. 1. — Trichophyton acuminatum, cultures premières sur milieu d'épreuve maltosé; âge: 20 jours. Grandeur naturelle.
dont le centre prend une couleur jaunâtre et se creuse en cupule pendant que ses bords se relèvent. La culture, qui perd peu à peu son aspect velouté pour un aspect poudreux, prend ainsi la forme d'un bouton (fig. 2), puis d'un cratère qui peut être étonnamment régulier et qui montre le plus souvent une petite saillie centrale. La culture du Trichophyton a4:uminatufn lorsqu'elle a grandi, fait sur le milieu nutritif une saillie de plus en plus grande. Bientôt les ailerons poilus qui avaient signalé le début de la culture ne paraissent plus à son sommet que comme des excroissances peu importantes (fig. 3). Toute la culture a la forme d'un cône aplati et découpé en secteurs par des cannelures radiées plus ou moins
LE TRICHOPHYTON A CULTURE ACUMINÉE
profondes. Lorsque la culture vieillit, ces cannelures s'ouvrent souvent, et la culture devient lacunaire, phénomène que même de jeunes cultures peuvent présenter, lorsqu'elles ont souflert.
Tels sont les deux types culturaux les plus habituels de nos tondantes trichophyliques infantiles : Le Tr, acuminatum et le Tr. crateriforme.
Fig. 2. — Trichophyfon crateriforme, sur milieu d'épreuve maUosé. Cultures premières; âge: 20 jours. Grandeur naturelle.
Pour assurer la différenciation de ces deux espèces mycosiques, on peut les ensemencer comparativement sur plusieurs milieux, par exemple sur un milieu d'éfyreuve imMosé et sur un milieu d'épreuve glycosé(l), l'identification de chacune et la différenciation des deux n'en seront que plus certaines.
Il va sans dire, et ceci est une règle qui ne souffre aucune excep-
(1) Les mUieux dits d'épreuve, sont ceux qui, objectivement, donnent aux diverses espèces trichophytiques leur aspect le plus différsntiel et le plus spécial, qui en outre permettent le développement des formes de reproduction des parasites, et rendent possibles, ou facilitent, les inoculations positives à l'animal. Ils sont
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tion, que tous les cheveux malades du même individu donnent lieu, sans faute, à une culture semblable, et aussi tous les individus contaminés d*une épidémie familiale (1).
De plus ces caractères de culture sont rigoureusement personnels à chaque espèce, immuables, héréditaires. Jamais on nechangéra les caractères de la culture acuminée en ceux de la culture
cratériforme et inversement.
Sans doute ces caractères objectifs d*une culture sont étroitement liés à la nature du milieu, et j*ai montré dès 1893 94 (2) qu'en faisant varier la composition chimique d'un milieu nutritif, on mo-
Fig. 3 — Trichnphyion acuminalum, cul- ..^ . i / j u
lure sur milieu d'épreuve en malrasdEr- dlfiait la forme de Chaque
lenmeyer; âge: 30 jours. Grandeur natu- culture trlchophvtique. Voici
relie. Vue de profil. ,^ . ov , .
(fig. 4 et 5) des cultures adultes de Tr, acnminatum et de Tr. cratériforme sur un milieu d'épreuve mallosé; si nous les transportons sur notre milieu de conservation [3), nous obtiendrons de nouvelles figures. Le Trichophyton cratériforme prendra un aspect tourmenté, bien moins cratériforme et une couleur tout à fait blanche, tandis que le Trichophyton acuminatum, tout en gardant sa forme acuminée, perdra ses sillons radiés pour prendre une surface glabre, raboteuse, presque humide et de couleur jaunâtre (fig. 6 et 7).
Malgré ces changements de forme, connexes aux changements de milieux, il est aisé de voir par ces exemples que, sur un même milieu, tous les exemplaires de la même espèce prennent une forme identique, et que des cultures d'espèces différentes restent
composés pour 100 d'eau pure, de 4 grammes de sucre, et d'un gramme de peptone, avec 1,8 d'agar-agarpour solidifier. La glycose massée deChanut, la maîtose de Chanut p1 la peptone granulée de Chassaing sont les produits que nous employons. J'ai exposé l'importance des milieux d'épreuve dans Les trichophyties humaines^ p. 31.
(1) Sabouraud, Les Irichophyties humaines^ p. 9.
(2 Société et Annale» de dermatologie et de syphiligraphie, 1893; Les trichaphyties humaines^ 1894. p. 31 et suiv.
(3 Notre milieu de conservation ne comprend aucun sucre mais seulement de la peptone 3 -5 0/0 . H préserve les cuitu es pendant toute leur vie de toute altération pléomorphique capable de défigurer leur type premier et de les rendre méconnaissables. Voir: Archives de Parasitologie^ XII, 1907, p. 33.
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di fié rentes sur tous milieux. Ces différences sont éclatantes même sur des tubes de culture, et elles peuvent suflire à empêcher toute confusion. Pourtant quand les cultures en grandissant rencontrent les parois du verre, elles se déforment. C'est pourquoi il importe de repiquer les premières cultures sur un disque de milieu nutri-
Fig. 4. — Trichophyton acuminatunif cultures premières de 30 jours sur milieu d'épreuve maltosé.
Grandeur naturelle.
Fig. 5 — Trichophyton craurif urine.
Cultures premières de 30 jours sur milieu d'épreuve maltosé. Grandeur naturelle.
tif, au fond de matras d'Erleîimeyer, pour obtenir leur plein développement et leur forme parfaite. C'est ainsi que sont obtenues les cultures destinées à des collections.
Voici deux figures consacrées chacune à l'un des Trichophylons que nous étudions, cultures d'âge divers, sur le même milieu d epreuve, capables d'assurer leur diflérencialion absolue aux yeux de tous les observateurs qui se serviront de nos milieux d'épreuve pour la culture des Dermatophytes en tous pays (fig. 8 et 9).
Je ne veux plus insister maintenant que sur les caractères de
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ces cultures que la pLotographie est insuffisante à démontrer. Les Tr. acuminatum et cratert forme ne sont nullement parmi les plus vivaces des TricLophytons. Leurs cultures sont d*une vitalité et d'une activité de développement très moyennes. En 40 ou SO jours, même sur des milieux optima, elles ne dépassent guère 3 cent. 1/2 de diamètre. Sous ce rapport, et en dépit de leurs différences objectives, les deux cultures se ressemblent.
Fig. 6. — Trichophylon acuminatum, sur mUieu de cooservaUon. Peptone 5 0/0 ; âge : 2 mois. Grandeur natureUe.
Pendant la première partie de sa vie, la culture du Tr, crateriforme est de couleur plus blanche, et au contraire quand elle vieillit, sa couleur crème s'accentue. Passé la première période de son développement, cette culture cesse d'être duveteuse. Elle devient aride et poudreuse. Cette poudreestadhérenteetnese détache pas aisément au moindre contact, comme celle des cultures des grands Trichophytons pyogènes. La consistance de la culture est cartonnée ; avec la baguette de platine, il est aisé de faire des trous dans ce carton et d'en détacher des parcelles.
Dans la première partie de sa vie, la culture est limitée au cratère lui-même, ensuite, et plus elle vieillit, plus elle s'entoure de
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rayons immergés très fins dont l'ensemble (ait à la culture une aréole poudreuse.
J*ai dit que la culture acuminée débute sous la forme d'une minuscule calotte hémisphérique, surmontée de trois ou quatre plumets bizarres, frangés, pennés, ressemblant aux palpes de certains Papillons et Hannetons et qui persistent plus tard sur la culture vieille mais en s*atténuant.
Fig. 7.— Trichophy ton craterif orme, sur mUieu de conservaUon. Peptooe 5 0/^ ; âge : 2 mois. Grandeur naturelle.
Dès son origine la culture est à peine veloutée, elle devient poudreuse presque immédiatement. Sa couleur d'abord blanche, puis d'un blanc crème, devient brunâtre enfin, quelquefois avec une teinte un peu violette. En somme, rien n'est plus facile que de distinguer entre eux le Tr. acuminatum et le Tr. crateriforme, et cela dès les premiers jours de leur culture.
Les cultures de ces deux parasites persistent à vivre plus de six mois. Je crois qu'elles ne meurent que quand leur substratum est arrivé à un état de dessiccation totale. Cependant, dès la fin du
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deuxième mois, elles ne grandissent plus; elles restent seulement immobiles.
Pléomorphisme. ^ On sait importance des transformations pléomorphiques dans les cultures deTrichopLyton. On sait particuliè-
Fig. 8. — Tnchnphylon craieriforme^ culture sur milieu d épreuve maltosé. Peptone 1, maltose 4 0/0; à^c: 20 jours, 27 jours, 35 jours. Grandeur natureUe.
rement que presque tous les Trichophytons connus fournissent plus ou moins tôt, suivant leur espèce, une culture pléomorphique en duvet blanc, de forme spéciale pour chaque espèce. On sait aussi que ces cultures pléomorphiques, duveteuses, blanches, se comportent habituellement comme des formes de dégénérescence, car beaucoup ne présentent plus d'or^sranes de fructification, même quand elles dérivent de cultures-mères présentant des formes de reproduction en abondance.
LE TRICHOPHYTON A CULTURE ACUMINÉE
En ce qui concerne le pléomorphisme, les Trichophyton acuminatum et crateriforme se conduisent d'une façon très diflérente.
Le Tricliophyton crateriforme peut fournir une forme pléomorphique duveteuse blanche. Cette forme, qui naît à peine une fois
Fig. 9. — Trichophyton acuminatum, culture sur milieu d'épreuve maltosé. Peptone 1, maitose 4 0/0; âge : 20 jours, 27 jours, 35 jours. Grandeur naturelle.
sur cinquante vieilles cullures, naît ordinairement sur toute la surface de la culture, comme une reviviscence du duvet qui la caractérisait à ses premiers jours, et non pas sous la forme d'une touffe isolée de duvet blanc. Sa couleur, comme celle de toutes les formes pléomorphiques vraies de Dermatophytes, est d'un blanc pur. La forme de la culture pléomorphique est radiée et les radiations sont creusées dans le gâteau blanc de la culture (fig. 10). Archives de ParMitologie, XII, n* 1, 1908. 4
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Quant au Tr. acuminatum je ne lui connais pas de forme pléomorphique. Je n'en ai obtenu de lui par aucun moyen sur aucun milieu. Sa culture ne vieillit pas jusqu'à sa mort et des réensemencements successifs la reproduisent toujours dans sa forme primitive.
Espèces trichophytiques à cultures pseudo-cratériformes et pseudoacuminées. — Je veux dire un mot ici d'une question qui touche à celle dont je traite et qui demandera à être étudiée plus tard sérieusement. Le Tr. cru ter i forme a, dans la série des Trichophytons, un
Fig. 10. — Pléomorpbisme blanc du Trichophylon crateriforme, après t) jours, sur milieu d'épreuve maltosé.
certain nombre de sosies. A côté de cette espèce parfaitement monomorphe et caractérisée, il existe une série d'espèces voisines ou de variétés qui s'en rapprochent extrêmement. Que l'on adopte pour en parler le terme despèces ou de tariétés, ce qu'il faut savoir en tous cas, c'est qu'il ne s'agil pas de parasites à culture variable.
Ces espèces , appelons-les donc de ce titre puisqu'elles sont fixes, diffèrent les unes des autres par leur culture et diffèrent de la culture cratériforme par des caractères constants que les réensemencements perpétuent sans jamais les effacer. Néanmoins leur forme en culture rappelle d'assez près la culture cratériforme pour prêter à des confusions. Ces confusions ont été faites par plusieurs auteurs (l).
Je connais en ce moment quatre espèces pseudo-cratériformes et une espèce pseudo-acuminée. Laissant de côté ces types accès*
(1) Ainsi E. Bodin (de Rennes) a pris un Trichophylon endo-ectothrix de la barbe à culture pseudo-cralériforme pour le Tr. cratériforme. Ainsi, la plupart des auteurs anglais, quand ils ont éludé la Irichophylie tondante des enfants, n'y trouvaient que mon Tr. cratériforme^ alors que des tondantes anglaises m'ont fourni des Trichophytons diflérenls, etc*
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soires, pour réserver tout notre intérêt aux espèces caractéristiques que nous étudions, nous pouvons voir que celles-ci s'opposent en tousieurs caractères extérieurs et ne peuvent jamais être confondues.
Ayant en mains désormais ce moyen sûr d'identification qu'est la culture en milieux choisis, nous allons chercher quels sont les signes communs et les signes différentiels des deux principaux Trichophytons dans leur vie parasitaire sur Tenfant.
IL — Etude clinique.
