RÉCUPÉRATION ET AUGMENTATION DE LA VIRULENCE DU B ACTE RII] M CHAÜVŒI

§ Ier-

Récupération de la virulence primitive.

S’il est établi que la virulence normale d’un microphyte nosogène peut s’affaiblir au point de cesser d’être appréciable par les moyens dont nous disposons, nous ne savons pas si elle peut disparaître complètement sans que la mort et la destruction de l’organisme dont elle émane en soient la conséquence. Nous constatons seulement que quelques microbes infectieux, ceux du rouget du porc et du choléra des poules entre autres, peuvent perdre rapidement la virulence qui se traduit par la mort ou la vaccination des animaux inoculés, sans cesser de vivre, de se multiplier en série de générations. On ne connaît point encore dans ces cas le moyen de raviver la virulence éteinte.

D’autres microbes affaiblis se reproduisent avec l’atté-

t64 le charbon symptomatique.

nualion acquise et forment ainsi des races précieuses pour la pratique des inoculations préventives.

Nous nous sommes altacliés avec soin à rechercher comment se comporte, à cet égard, le bactérium du charbon symptomalique. Il n’est pas de ceux qui perdent leur propriété virulente aussi fortement que le rouget ; on peut l’amoindrir considérablement, mais non la faire disparaître totalement, à moins de tuer le microbe, lant que celui-ci végète, sa nocivité persiste, amoindrie, latente, mais prête à se manifester si des conditions favorables se présentent.

Le déterminisme des conditions capables de redonner au virus atténué son activité première nous a beaucoup préoccupés. Nous avons trouvé que l’on peut y arriver, soit en choisissant des sujets dans l’organisme desquels il se régénère, soit en agissant directement sur lui.

Si l’on prend du virus chauffé à 100° pendant sept heures, il est atténué, il ne tue plus les animaux adultes, mais leur confère seulement une légère immunité facile à vaincie.

Qu’au lieu de choisir un animal adulte pour sujet d’inoculation, on prenne un petit cobaye qui vient de naître, on le fera mourir en cinquante heures avec une tumeur charbonneuse. Le virus a retrouvé dans son organisme ses propriétés premières.

On peut encore arriver à tuer un animal adulte en lui inoculant des doses massives de virus charbonneux atténué, la qualité est remplacée par la quantité, et une fois la résistance organique vaincue, le virus se régénère dans le sujet d’expérience qui succombe. L’expérience qui suit en fournit la preuve :

15 octobre 1881. — On prend quatre cobayes qu’on partage en deux séries de deux chacune. Les deux sujets de la première série reçoivent chacun 1/2 centigramme de puipe chauffée à 85°. Ceux de la deuxième série reçoivent chacun 3 centigrammes de la même pulpe. Ils meu-

rent en quarante-huit heures, tandis que les deux premiers résistent, éprouvés dix jours plus tard avec du virus frais, ces animaux ont bien supporté l’épreuve.

Nous avons aussi trouvé le moyen de redonner au virus très affaibli sa virulence première en agissant directement sur lui : Il suffit d’ajouter à l’eau dans laquelle on le délaye

1 /5 d’acide lactique et de laisser ce mélange ainsi acidulé de cinq à six heures en contact. Après ce temps, l’inoculation du virus primitivement atténué communique à coup sûr la maladie charbonneuse mortelle.

Nous relevons dans notre registre, à titre d’exemple, l’expérience suivante :

5 juin 1886. — On prend 2 centigrammes de virus sec, très atténué par une température de 105° prolongée pendant sept heures, qu on délaye dans 1/2 centimètre cube d’eau distillée. Le liquide qui résulte de cette manœuvre est divisé en deux parties égales et placé dans deux petits verres à réactifs stérilisés; le contenu de l’un est additionné de trois gouttes d’acide lactique, tandis que le contenu de 1 autre ne reçoit rien. On abandonne les liquides à eux-mêmes pendant cinq heures, puis on inocule, en se servant de deux seringues stérilisées, chaque liquide à deux cobayes. Par surcroît de précaution, on inocule

2 gouttes d’acide lactique pur également à deux cobayes.

Les deux animaux qui avaient reçu le virus traité par l’acide lactique moururent l’un à la vingt-quatrième et l’autre à la trentième heure, tandis que les quatre autres cobayes résistèrent.

Ce n’est pas seulement quand le virus a été atténué artificiellement par l’homme qu’il peut être régénéré au moyen de l’acide lactique, mais encore quand il s’est affaibli spontanément dans la terre par l’action naturelle des divers agents physiques. En voici la preuve :

3 juin 1886. — A 7 centimètres de profondeur, on prélève un peu de terre arrosée quatre-vingt-dix-huit jours auparavant de liquide charbonneux très actif, on la soumet à un lavage dans quantité suffisante d’eau pure, on filtre sur une simple feuille de papier. Dix grammes

LE CHARBON SYMPTOMATIQUE

de cette eau filtrée sont prélevés et placés par parties égales dans des verres à réactif. Dans l’un de ces verres, on laisse tomber 8 gouttes d’acide lactique, et l’on n’ajoute rien à l’autre. Après six heures de contact, on pratique des inoculations sur deux lots de cobayes. Les animaux du lot qui reçurent dans la cuisse l’eau de lavage non additionnée d’acide lactique résistèrent à l’inoculation et gagnèrent l’immunité, ceux qui furent inoculés avec l’eau acidulée par l’acide lactique moururent vers la vingt-cinquième heure.

La recherche des germes virulents dans le sol est toujours une opération longue, difficile, nécessitant des cultures successives pour les isoler, et encore n’arrive-t-on pas toujours à retrouver la virulence si l’on possède les microbes.

L’action remarquable de l’acide lactique sur ceux du charbon symptomatique fournit un moyen des plus simples de les retrouver dans les terrains infectés. En agissant sur l’eau de lavage de ces terrains, comme il vient d’être dit dans l’expérience précédente, et inoculant ensuite l’eau ainsi traitée à une série d’animaux, on a les plus grandes chances de leur communiquer le charbon emphysémateux.

Une fois la virulence récupérée, elle se conserve avec son activité normale et elle produit ses conséquences fatales tant que les actions précédemment indiquées ne viennent pas l’affaiblir et l’atténuer à nouveau. Le protoplasma constituant des microbes, lors de l’atténuation, n’avait été que gêné temporairement, soit dans l’élaboration du principe toxique qui cause la mort, soit dans sa puissance de prolifération, soit dans l’une et l’autre.

En tous cas, il ne nous a jamais été possible de fixer l’atténuation obtenue et de créer, comme cela se fait pour d’aulres virus, des races de microbes atténués se perpétuant avec leurs propriétés nouvellement acquises.

Augmentation des propriétés virulentes .

De même que l’activité d’un virus s affaiblit, elle peut aussi s’exalter. L’observation de la marclie des épidémies et des épizooties, avec leurs périodes d’augment où la mort est aussi rapide que sûre et leurs périodes de déclin où elle est plus lente et la guérison moins rare, l’avaient fait pressentir. Nous allons montrer expérimentalement qu’on peut communiquer au virus du charbon symptomatique une activité de beaucoup supérieure à celle qu’on lui connaît habituellement.

La mort étant la terminaison ordinaire du charbon, la mesure de la virulence ne peut être déterminée que par le temps qui s’écoule entre le moment de 1 inoculation et celui où le décès se produit, toutes choses étant égales quant à la quantité de virus inoculée, à la voie d’introduclion dans l’économie, à lage, au poids, au sexe, à l’espèce et au régime des animaux d’expérience.

Dans les conditions ordinaires, si l’on prend un cobaye adulte, et qu’on lui pousse dans le tissu musculaire de la cuisse 3 gouttes de liquide de pulpe musculaire provenant d’un animal qui vient de succomber au charbon spontané ou inoculé, on va déterminer l’apparition d’une tumeur au point inoculé et la mort arrivera de la quarantième à la cinquantième heure.

Il est possible de faire évoluer la maladie plus rapidement et d’amener le dénouement à la dix-huitième, à la quinzième et même à la douzième heure ; ce qui revient à dire que l’activité du virus a été doublée, triplée et même quadruplée.

Pour cela, c’est encore à l’acide lactique que nous avons

LE CHARBON SYMPTOMATIQUE

recours. On peut l’employer seul en le mélangeant au liquide virulent normal dans les proportions indiquées à propos des virus atténués et laissant en contact de vingt-quatre à trente heures avant d’inoculer. Mais si on le mélange à une faible quantité d’eau additionnée d’un sucre très fermentescible et que, sous cet état, on le verse dans le liquide virulent, qu’on laisse s’écouler trente heures avant d’inoculer, on communique à celui-ci une activité maximum. L’expérience suivante donnçra au lecteur une bonne idée de ce qui se passe dans ce cas :

2 avril 1885. — On prend deux lots de trois cobayes chacun. Un lot est inoculé avec du liquide de pulpe musculaire ordinaire, l’autre reçoit la même quantité du même liquide auquel on a ajouté, trente heures avant l’inoculation, un mélange d’eau sucrée et d’acide lactique.

Les trois cobayes du premier lot meurent de la quarantième à la quarante-huitième heure.

Ceux du second succombent à la douzième , à la treizième et à la quinzième heure.

L’augmentation de la virulence se produit donc d’une façon très nette, sans que nous sachions au surplus à quoi elle tient.

Il nous est arrivé aussi d’obtenir cette exaltation de la virulence en nous servant de la chaleur. En chauffant à 70° pendant deux heures dix minutes, de telle sorte que nous touchions à la limite où le microbe est détruit, nous avons vu mourir les animaux dix-huit ou vingt heures après l’inoculation de ces produits ainsi chauffés.

Nous avons déjà appelé l’attention sur d’autres modifications subies par le virus dans cette circonstance (Voy. p. 140), mais comme celles-ci ne se produisent pas avec la constance qui est la règle quand on se sert de l’acide lactique, nous n’y insistons pas pour le moment.

ARTICLE III