III
Injection du virus frais ou desséché dans les veines.
Les sujets de l’espèce bovine et de l’espèce ovine possèdent une grande tolérance pour le virus du charbon symptomatique lorsqu’on leur introduit ce virus dans les veines.
En général, les premiers ne succombent point à l’injection de 4, 5 et 6 centimètres cubes de liquide extrait d’une tumeur charbonneuse ; les seconds supportent bien 1 à 2 centimètres cubes.
Ces inoculations déterminent quelquefois des frissons, tou jours de la tristesse, de l’inappétence et de la fièvre; la température s’élève d’un à deux degrés au-dessus de la normale ; mais ces troubles généraux ne durent que deux ou trois jours, et, après leur disparition, les sujets se montrent réfractaires à des inoculations ultérieures dans le tissu conjonctif.
Si l’on inocule une matière extrêmement active, ou si l’on rencontre un animal particulièrement sensible à l’action du virus, on peut assister à l’évolution complète de l’affection charbonneuse. On verra se développer une ou plusieurs tumeurs, ou bien le microbe envahira presque tous les tissus et viscères; l’animal succombera. On sera exposé à assister à l’évolution d’une tumeur si l’animal est porteur de quelque contusion profonde au moment où l’on pratique l’injection intra-veineuse.
Laissant de côté ces cas exceptionnels, on peut dire qu’il est très remarquable de constater que l’introduction du virus dans le sang cause un charbon larvé qui prémunit les ani-
LE CHARBON SYMPTOMATIQUE
maux contre le développement ultérieur d’une tumeur habituellement mortelle.
Le microbe ne manifeste pas son action, en tant que ferment des matières albuminoïdes, au milieu de la masse sanguine. Néanmoins il s’y mulliplie, ainsi qu’en témoignent des expériences spéciales que nous avons entreprises sur ce point de sa physiologie, et il suffira qu’il franchisse la barrière endothéliale des vaisseaux pour qu’il exerce une influence funeste sur l’organisme.
Les animaux supportent aussi très bien l’injection intraveineuse du virus desséché à 32°, comme le démontre l’exemple suivant :
19 janvier 1883. — On délaye 1 centigramme de virus dans 2 centimètres cubes d’eau en y apportant le plus grand soin. On filtre ensuite à travers un linge fin pour retenir les grumeaux.
Le liquide filtré est injecté dans la jugulaire d’un mouton ; température rectale, 40°.
Le 20, la température monte à 41°, 1.
Le 21, elle descend à 40°, 3.
Le 22, elle est revenue à l’état normal.
Au surplus, l’appétit de l’animal n’a pas été troublé un seul instant.
Le 29 janvier, on éprouve ce mouton en injectant six gouttes de suc musculaire frais, très virulent, dans les muscles de la fesse droite.
Le lendemain, le jarret droit est chaud, légèrement tuméfié; la boi terie est assez forte ; mais le surlendemain la boiterie et la tuméfaction diminuent et tout rentre dans l’ordre.
Le mouton a donc été vacciné par l’injection du virus sec, comme il l’aurait été avec le virus frais. Mais l’emploi du virus sec expose à des accidents emboliques.
Il vaut mieux s’adresser au virus frais qui n’offre pas ces inconvénients au même degré. C’est donc du virus frais que nous allons parler.
Il n’est pas nécessaire d’injecter dans le sang une quantité considérable de virus à l’état naturel pour faire appa-
raître un charbon bénin, avorté, capable de conférer l'immunité. Nous avons réussi à obtenir cet heureux résultat sur le mouton, en injectant 3/10 dégoutté de virus; nous l’obtenons couramment sur les animaux de l’espèce bovine, en inoculant 3, 5 ou 10 gouttes. Quand l’inoculation est faite avec une aussi petite quantité de virus, les troubles généraux de la santé sont insignifiants ; le thermomètre seul accuse quelques dérangements ; la température rectale monte de 2 à 4 dixièmes de degré.
Par la constance de leurs effets, par la facilité de se procurer les virus, les injections intra-veineuses nous ont paru constituer un excellent moyen de conférer l’immunité aux animaux de l’espèce bovine. Mais il présente quelques difficultés quirésultent du danger de faire fausse routelorsqu’on pratique l’injection. Pour atténuer ce danger, nous nous sommes appliqués à régler minutieusement le manuel opératoire. Nous estimons avoir réussi à rendre l'emploi des injections intra-veineuses à peu près complètement inoffensif.
Avant de pratiquer une inoculation préventive par la voie sanguine, il faut préparer le liquide virulent et choisir les instruments et ustensiles nécessaires à l’opération.
1° Préparation du liquide virulent. — On a lu précédemment que 3/10 de goutte de liquide de pulpe musculaire avaient suffi pour conférer l’immunité au mouton ; 3, 5, 10 gouttes, pour le bœuf. Il n’est donc pas nécessaire d’employer une dose bien considérable d’agents virulents pour vacciner un jeune animal de l’espèce bovine; on peut compter sur un bon résultat en employant 10 gouttes de liquide de pulpe musculaire.
Pour obtenir le virus, nous inoculons un cobaye, et, lorsqu’il a succombé, nous préparons une pulpe musculaire avec deux parties de muscles pris dans sa tumeur et une partie
Arl. Corn, et Th. — Charbon symptomatique. 14
LE CHARBON SYMPTOMATIQUE
d’eau; nous la pressons dans un linge, puis nous filtrons le liquide extrait de cette pulpe sur deux à trois doubles de toile batisle.
Lorsque le liquide virulent est obtenu, nous l’associons à telle quantité d’eau nécessaire pour faire une dilution au 1/5.
La dilution a pour but de faciliter le maniement de la dose vaccinale et de rendre les accidents moins redoutables dans le cas où il s’échapperait quelques gouttelettes de liquide en dehors de la veine pendant l’injection.
2 à 3 centimètres cubes de cette dilution suffiront à inoculer un animal de un à trois ans.
On aura soin d’agiter la solution chaque fois qu’on y puisera la dose nécessaire à un animal, afin de mettre les microbes uniformément en suspension dans la masse liquide, car ils tombent toujours au fond en vertu de leur densité.
2° Instruments et ustensiles. — Les instruments nécessaires pour faire l’inoculation sont :
1° Une seringue graduée pouvant contenir 4 centimètres cubes de liquide, munie de canules piquantes capillaires ;
2° Deux paires de pinces à dissection ; les pinces à artères, dont les branches sont maintenues rapprochées par un ressort à cran, sont préférables ;
3° Un bistouri convexe et un bistouri droit ;
4° Une paire de ciseaux courbes ;
5° Une aiguille à suture et du fil ;
6° Deux linges (essuie-mains).
Avant d’opérer, il est important de flamber ou de plonger les instruments tranchants un instant dans l’eau bouillante. Le fil à ligature doit être maintenu dans une solution d’acide salicylique à 2/1000.
L’adaptation exacte de la canule surlaseringue seraassurée par une petite garniture de stéarine ou de paraffine fondue,
pour éviter que le liquide ne vienne sourdre entre ces deux organes au cours de l’injection.
Opération. — - L’injection est poussée dans l’une des jugulaires, sur l’animal couché, afin d’éviter des accidents qui pourraient lui coûter la vie.
S’il s’agit d’un animal jeune et de petite taille, on le maintient couché sur une table ou un établi pour qu’il soit mieux à portée de l’opérateur ; s’il s’agit d’un animal plus âgé, on le couche sur un lit de paille.
Quand le sujet est couché, l’opérateur aspire 2 1/2 à 3 centimètres cubes de dilution virulente avec la seringue ; il lave ensuite à grande eau la canule et la surface entière de l’instrument pour les débarrasser des microbes qui pourraient s’y trouver ; puis il retire légèrement le piston, en tenant la seringue relevée, afin d’aspirer dans le corps de pompe le liquide virulent enfermé dans la canule. La seringue est dès lors préparée, il suffit de la maintenir verticale' ment ou obliquement, la canule en l’air, jusqu’au moment de l’injection.
Ensuite, il faut découvrir la veine, et, pour éviter de faire fausse route lorsqu’on voudra la ponctionner, il importe de la dénuder complètement.
L’opérateur choisira la veine droite ou la veine gauche, à sa convenance ; il se placera à genoux, en arrière de l’encolure ; son aide se mettra en face.
La tête du sujet sera maintenue de façon qu’elle fasse un angle droit avec l’encolure.
L’aide presse sur la gouttière de la jugulaire en bas du cou, afin d’amener la distension de la veine. L’opérateur fait avec le bistouri convexe une incision longitudinale de 6 à 8 centimètres au niveau du bord antérieur de la saillie formée par la veine. Cette incision intéresse la peau et le muscle peaucier cervico-facial près du bord inférieur du mastoïdo-huméral.
212 LE CHARBON SYMPTOMATIQUE
Il saisil ensuite alternativement les bords de l’incision faite au peaucier avec les pinces à fermeture automatique ; puis, confiant la pince inférieure à son aide, il divise les lames de tissu conjonctif qui entourent la jugulaire avec le bistouri droit. Comme ce tissu forme plusieurs gaines minces emboitées les unes dans les autres, il doit saisir et écarter plusieurs fois les bords des incisions faites sur ces gaines successives. La dénudation est complète lorsqu’on voit, entre le feuillçt que l’on soulève et les parois de la veine, de petits tract us conjonctifs déliés, au sein desquels existent les vaisseaux et les nerfs destinés aux parois de la jugulaire.
Pendant cette partie de l’opération, l’aide a étanché le sang avec l’un des linges indiqués à l'instrumentation.
Arrive le temps le plus délicat, l 'injection. L’opérateur saisit la seringue, se rend compte de son état de propreté, puis vient se placer à genoux, près du bout du nez de l’animal, en regardant dans la direction de la gouttière de la jugulaire.
La pince supérieure est confiée à un second aide (d’ordinaire celui qui maintient la lête de l’animal); la gaine de la veine est maintenue entr’ouverle ; la pince inférieure est abandonnée à son propre poids. Le premier aide fait de nouveau gonfler la jugulaire, la fixe ainsi dans sa position et en distend les parois.
Il est important d’abandonner simplement à elle-même la pince qui est fixée sur la lèvre inférieure de la plaie faite à la gaine, car une traction exercée sur cet instrument aurait pour effet d’aplatir la veine, et d’exposer l’opérateur à la transpercer avec la canule de la seringue lorsqu’il ponctionne le vaisseau.
Enfin, la moitié supérieure de la plaie est recouverte d’un linge jeté en travers de l’encolure.
Ces précautions observées, l’opérateur abaisse la seringue
avec lenteur, et la place de manière à ne pas perdre de vue le biseau taillé à l’extrémité delà canule. Si une goutte de la dilution virulente se présentait sur ce biseau, il aurait soin de l’enlever avec les doigts ou avec son tablier. Il approche la canule de la veine et l’introduit enfin brusquement dans le vaisseau en la dirigeant presque parallèlement au grand axe de la jugulaire, en évitant de se placer trop près d’une valvule veineuse.
L’aide presse toujours sur la veine. Pour bien s’assurer que l’instrument n’a point fait fausse route, l’opérateur relire légèrement le piston ; si le sang monte dans la seringue, la canule est bien dans le vaisseau. Il ordonne à l’aide d’abandonner la veine à elle-même, puis il presse modérément sur la tige du piston, et introduit dans le vaisseau 2 à 3 centimètres cubes de la dilution.
Il ne faut pas vouloir pousser l’injection trop brusquement, car l’orifice d’écoulement de la canule étant très fin, relativement au diamètre du corps de pompe, si l’on presse trop énergiquement sur le piston, la tension dans la seiingue devient énorme, on s’expose à voir la canule quitter son emmanchure et le virus se répandre dans la plaie.
C’est, du reste, pour parer à cet accident possible ou h toute suffusion du liquide virulent au niveau de 1 ajustage de la canule que l’on place un linge propre entre la plaie et la seringue.
L’injection poussée, il faut retirer la canule et ne pas inoculer les parois de la veine pendant cette manœuvre.
On échappera à ce dernier danger : 1° en laissant la canule dans la veine quelques secondes, afin que les flots de la jugulaire en lavent bien la surface libre ; 2° en remplissant, avec le sang du vaisseau, la canule et une partie delà seringue, par un coup de piston en arrière; 3 enfin, en retirant brusquement l’instrument sous un bain de solution
LE CHARBON SYMPTOMATIQUE
salicylée à 2/1000 que l’aide prépare en transformant la plaie en une sorte de cuvette dans laquelle il verse le liquide antiseptique.
La plaie est inondée de la sorte durant cinquante ou soixante secondes; on en rapproche ensuite les bords avec deux points de suture ; l’animal est relevé, conduit à l’étable où on le soumet à son régime habituel.
Nous dirons encore, comme dernières recommandations générales, qu’il est indispensable de ne jamais toucher la plaie avec les doigts, de se laveries mains à grande eau lorsqu’on a rempli la seringue du virus vaccinal, et chaque fois qu’on aura manié ce dernier pour une raison quelconque, d’éviter le contact des instruments tranchants avec la seringue et le virus; et de ne jamais employer indistinctement le linge qui sertà nettoyer les instruments ou à protéger la plaie pour étancher le sang pendant la vivisection.
La manuel opératoire que nous venons d’exposer peut paraître long et difficile; il n’est que minutieux. La dénudation de la jugulaire n’offre pas de difficultés sérieuses. Il n’est même pas nécessaire, > pour réussir, de porter cette dénudation à ses dernières limites; mais nous estimons que c’est une précaution ulile au succès de l’opération. Enfin la plus grande propreté est de rigueur.
Malgré les nombreux détails que nous avons indiqués, une injection n’exige pas plus de douze à quinze minutes d’un opérateur quelconque, et cinq minutes d’un opérateur exercé. On met, en général, plus de temps pour coucher l’animal, pour peu qu’il soit turbulent ou que l’on n’ait pas à sa disposition des auxiliaires au courant des manœuves nécessaires, que pour pratiquer les différents temps de l’inoculation.
Ainsi réglé, le procédé des injections intra-veineuses préventives contre le charbon symptomatique s’applique avec sûreté et à peu près sans danger.
Nous en donnerons pour preuve les 500 inoculations que nous avons pratiquées, en 1880 et 1881, dans le Rhône la Haute-Marne et l’Algérie, avec l’assistance du Mimstèie de l’agriculture, dans l’arrondissement de Gex, sous les auspices du Comice agricole de cette ville, ou à la deman e spontanée d’un certain nombre de propriétaires.
Sur ce chiffre, un seul animal est mort des conséquences d’une manœuvre survenue pendant l’opération.
M. Nocard a proposé d’injecter le virus dans la jugulaire sur l’animal debout, en ponctionnant préalablement la peau et le vaisseau avec un trocart du modèle de la seringue pnmiiive de Pravaz.
Au début de nos recherches, nous avons employé ce procédé, qui s’offre le premier à l’esprit; il ne nous a pas réussi et nous l’avons abandonné, estimant qu’en présence des dangers que présentait l’insertion du virus dans le tissu conjonctif, il valait mieux découvrir le vaisseau et opérer a cie
Nous ne contestons pas qu’avec de l’habileté et un long exercice, on parvienne à faire de bonnes injections intraveineuses avec le trocart, mais le noviciat ne sera ni plus long ni plus difficile pour acquérir le manuel que nous préconisons, et, probablement, il sera moins périlleux.
§ iv
Injection du virus à fêtât naturel dans les voies respiratoires.
En poussant du liquide virulent dans l’arbre trachéobronchique des animaux aptes à l’évolution du charbon, avec tous les soins nécessaires pour éviter l’inoculation du tissu conjonctif, on observe les mêmes résultats que si l’inoculation était pratiquée dans une veine.
Voici un exemple :
9 mai 1881. — On injecte dans la trachée d’une brebis 4 centimètres cubes de liquide virulent. L’injection est faite avec lenteur pour que le liquide virulent s’écoule goutte à goutte et ne provoque pas d’accès de toux.
10 mai. — Plaie trachéale nette; mais l’animal est triste; il frissonne de temps en temps; la température rectale s’est élevée de 9/10 de degré.
11 mai. — Les frissons continuent dans la matinée; ils disparaissent le soir.
12 et 13 mai. — Retour à la santé parfaite.
Celte brebis a élé éprouvée le 17 et le 20 mai, comparativement avec des cobayes. L’insertion du virus dans le tissu conjonctif a tué les cobayes; la brebis a survécu.
L’introduction du microbe dans les voies respiratoires peut donc constituer aussi un procédé d’inoculation préventive contre le charbon symptomatique.
Le mécanisme par lequel ce procédé communique une maladie bénigne se déduit de celui des inoculations intraveineuses.
Le microbe se répand dans les infundibula pulmonaires, d’où il pénètre dans les capillaires du poumon en traversant purement et simplement les deux endothéliums adossés des alvéoles du poumon et des vaisseaux capillaires sanguins. Or, le microbe ne peut agir comme ferment, puisque cette propriété demande pour se révéler le passage du microbe dans le tissu conjonctif.
Toutes les difficultés de l’application pratique de ce procédé résident dans le soin qu’il faut apporter pour éviter de laisser tomber les microbes en dehors de la trachée.
Jusqu’à présent, nous avons ponctionné la trachée avec un trocart de 5 millimètres de diamètre ; nous laissons la canule en place; nous glissons ensuite dans cette canule un
très fin tube de caoutchouc qui flotte à l’intérieur de la trachée, d’une part, tandis qu’on l’ajuste à la monture d’une petite seringue, d’autre part; la seringue étant chargée de virus, on presse sur le piston, de manière à en faire tomber 1 centimètre cube dans les voies respiratoires; on donne ensuite un coup de piston en arrière, pour appeler dans le corps de pompe de la seringue le contenu du tube de caoutchouc, puis on retire doucement ce dernier au dehors; de la sorte, il traverse les tissus dans un tunnel métallique; il n’y a donc pas de danger d’inoculation.
Nous avons conçu le plan d’un appareil plus perfectionné. Celui-ci consiste en une seringue dont la canule est à double courant. Le tube central se continue avec l’intérieur du corps de pompe et donne écoulement au virus. Le tube périphérique communique avec un petit réservoir d eau extérieur qui permet de laver l’extrémité de la canule après l’injection, afin de la débarrasser des particules virulentes avant de la retirer de la trachée.
Comme ce procédé réclame autant de soin que l’injection intra-veineuse, nous ne l’avons pas appliqué hors du laboratoire; mais, tel que nous le présentons, il enrichit la méthode générale des inoculations prophylactiques.
ARTICLE II
