GLOBULINE DE DENIS ', MATIÈRE DU STROMA

Nous avons appris (p. 457) à extraire la-globuline du globule sanguin S dont elle forme comme la cliaq)cnte. C'est elle qui ctnistitue en grande partie le globule dénué d*hémoglobinc, uu le stroma de Rollett ; les propriétés que Denis attribue à la globulinc. coïncident avec celles qu'on a reconnues plus tard à la substaiiie du stroma. La globulinc du sang d'oiseau, dit Denis*, est quand on l'a bien lavée, molle, blanche, demi-transparente, formée par un amas confus de granulations soudées entre elles. Elle est insoluble dans Teau. Mais Teau salée au dixième la rend visqueuse et produit avec elle une demi-dissolution. Il en résulte une matière épaisse, (]ui file à peu près comuie un sirop de transparence parfaite. Si l'on mêle cette liqueur à de l'eau pure, la globuline reparaît de nouveau dans son état primitif : toutefois une faible partie semble rester en solution. Au bout d'un certain temps la globulinc humide exposée à l'air perd la propriété de devenir visqueuse dans l'eau salée. Le contact de l'alcool froid prolongé quelques heures, ou celui de l'eau bouillante pendant peu d'instants, produisent le même effet. Denis donne le nom de (jlohuUue modifiée au corps ainsi obtenu'. Les solutions d'alcalis ou de carbonates alcalins précipitent la matière visqueuse (globulnie (^/;/^ l'eau salée) ; une faible portion cependant reste en solution. Ltacides agissent de même.

Si l'on verso de l'alcool à 22" centésimaux sur la globulinc \iqueuse celle-ci est complètement coagulée, mais si Ton porte .'i l'ébullition le congulum se redissout, à moins que la qu^intitê d'alcool ne soit insuflisante. Le refroidissement fait ropamitre partiellement le précipité. La chaleur de l'eau bouillante co;ii:uli

* Nous sav(»iis (|u't'llt' ne iloit pas ôlrc confomlne avoc la ^loiiiiliiic <1 I-tM-itilu' ijiu' riinko a ivconmi |HMiVi»lr cristalliM'i' oi qui n'osl «|U«; de rii''nio.'liil»iiie i i:jli:.. dont iu)U*< pillions plus loin.

« l)^Ms, inr cit., p. ti».

^ hKM>, Joc. rit., p. 'i.'> , (lil <pic la ^^lohuiiiu' contionl loujoui» un |mmi ilf lil-im ipron p<' it lui (Milrvn* en la nuxlifiant d'alMnl avec de TalciHil, t*l Iruitant t-n>uit(: t< coa^uliiin avt.-c du sel uiaiin d d<.' l'eau qui dissojvi-nl la liininr.

PRINaPES CONSTITUTIFS DU GLOBULE nOUGE. 403

la matière visqueuse, mais une partie reste en dissolution et se comporte à la façon de la caséine.

La globuline est difficile à extraire des globules du sang veineux humain. Elle se prépare comme celle de sang d'oiseau, mais elle se modifie bien plus promptement qu'elle. La solution de sel marin au dixième donne avec la globuline humaine fraîche une demi-solution visqueuse d*où Ton peut séparer, par agitation avec de l'eau, les particules restées intactes que la solution salée est impuissante à ramollir. Toutes ses propriétés concordent avec celles |de la globuline de sang d'oiseau ^ Elles concordent aussi avec les propriétés du stroma de RoUett. Dans le sang d'abord congelé puis maintenu quelque temps à 60°, Schultze a reconnu que les stromata se fondent peu à peu sans se dissoudre, modiGés sans doute qu'ils sout par le chlorure de sodium du sérum. Si Ton vient alors à refroidir de nouveau ce sang, il devient gélatineux.

Les stromata se liquéfient dans le sérum traité par l'éther. L'alcool et le chloroforme, les alcalis et les acides très-dilués, ainsi que les cholates alcalins les dissolvent. Le stroma de RoUett parait donc être principalement formé de globuline, mêlée d'une [)etite quantité de lécitliine et peut-être d'hémoglobine, corps (]ue la congélation est impuissante à fuire complètement extravaser de la masse solide du globule.

5} 4. — HÉMOCLOBIME'*.

Préparation. — Nous avons VU p. 458, comment OU sépare l'hémoglobine cristallisée des autres matériaux du sang. Le procédé de préparation que nous avons décrit, est en luênic temps celui qui permet d avoir les cristaux les plus purs. On se borne souvent à verser de l'éther goutte à goutte dans du sang défibriné, en

* Cette substance est (ri'S- analogue à In para globuline, n la myo«inc et à la fibrine.

* I^ matière appelée aujourd'hui hémoglobine, quelquefois hc mato- globuline ^ est identique a celle que Ton avait nommée hémalocristalline, nom auquel on a renoncé parce que l'iiémoglobine n'est pas toujours cristallisée. I^ globuline ou hématoglobinc de Uerzolius, qu'il confondail prcs(]ue avec la cristalline du cristallin et qu'il croyait éire à peu près la snulc matière albuminoïdc du globule, n'est que de l'hémoglubine à Télnt impur. Il n'existe )>as dauK le globule d'autre matière colorante : les sut)slanccs colorées auxquelles ou donnait autrefois le nom d'hœmalinc, iVhannalosine en dérivent par allémlioii. Slockes n iloiiné à riiémoglobiiic le noui de cruorint.

agitant sans cesse jusqu'à ce qu'il ait pris une teinte rouge foncée, et soit devenu transparent et sirupeux. En Varrètant alors, et laissant ^e mélange dans une enceinte à 0*, il ne tarde pas à se transformer en une pulpe de cristaux d'hémoglobine. Mais un conçoit que cette substance soit ainsi mélangée à des globules non altérés, à leur stromata et à quelques globules blancs.

Toutefois, si au lieu de sang défibriné ordinaire, on prend les globules rouges du sang de cheval séparés des globules blancs et du plasma, comme il a été dit p. 457, et qu'on ajoute de l'éther goutte à goutte à ces globules refroidis, on obtiendra un liquide sirupeux qui, contenant cette fois une petite quantité de Gbrioe non encore coagulée, se prendra bientôt en une gelée qui emprisonne toutes les particules en suspension et spécialement le< stromata. Le caillot s'ctant ainsi formé, on le passe rapidement a travers un linge ; la liqueur ne tarde pas à se prendre en un magma critallin. On peut alors séparer les cristaux par le filtre, les laver à l'eau alcoolisée (1 vol. d'alcool pour 4 vol. d*eau), en maintenant le tout à 0°, puis purifier les cristaux en les redissolvant dans de l'eau additionnée d'une trace de carbonate d'ammoniaque que Ton sature ensuite par une quantité exacte d'acide phosphorique titré. Cette dernière solution, qui peut être faite à 50"*, est filtrée, refroidie à 0**, agitée avec de l'air, mêlée d'un (|uart de son volume d'alcool, et mise à recristalliser dans un lieu frais. On doit répéter plusieurs fois ce traitement pour obtenir riiéiiioglobine parfaitement pure et cristallisée. L'action de la lumière paraît aider la formation des cristaux (Lehmann.)^

L'hémoglobine peut être obtenue à l'état amorphe. Les eaux mères de l'hémoglobine cristallisée la contiennent sous cet état. (Voir pour sa préparation, Hoppe-Scyler, loc. cit.) *.

Qoels sangs contieancnt de rhémogloblne. — Les sangS do

rat, d'écureuil, de cochon-d'inde, de chien donnent une gramlo proportion d'hémoglobine cristallisée. Les sangs d*liomme, il<* bœuf, de mouton, de porc, traités par le procédé ci-dessus déposent aussi des cristaux, mais ils contiennent en bien plus grande quantité, de l'hémoglobine amorphe. On peut dire que Thémogh»-

* Tous les coPi s qui cnipcclienl lo san|j tin se coaprulcr, tels que les act'lalcs .ili .'♦I ■ * rs pliosplintos <lc soude, io s:il|>ôlro, le sulfalc de soude nu de ina!;nc>ic, lorsqu ils '» '

.'ijoiités nu saii^, ttMidiMit à fain- appnrnUre de riicmoglobiue cristaHiséc (/«irrsf/ .

* Iloppo-Scylrr, Mnlvrhi, Cntt'rs, I. \, p. 1011.

IIEMOGlOniNE 4G5

bine cristallisée est fournie par tous les vertébrés à sang rouge, mammifères, oiseaux, poissons ou reptiles; on verra plus loin en quelle quantité.

ConipoaittcMi de rhémofs^iobinc. — La composition chimique de Thémoglobine est-elle la même chez les divers animaux ? On Tignore ; mais il est probable que cette composition peut varier légèrement, car suivant son origine, la forme des cristaux n'appartient pas toujours au même système cristallin, et les propriétés des hémoglobines diverses ne sont pas tout à fait constantes (voir plus loin).

Voici dans tous les cas, les derniers résultats analytiques obtenus par Hoppe-Seyler :

ANALYSE DE CBISTAUX d'uÉMOGLOBINE SÉGMÉE bE 11" A 120" ^

C II Az S Fc 0 P«0»

Ucmoglobine de sang

de chien. . .. . 55.85 7.5î2 10.17 0.59 0.45 21.84 n Hémoglobine de sang

d'oie 54.26 7.10 16.21 0.54 0.45 SO.O'J 0.77

On remarquera la présence du fer, et la faible teneur en soufre de cette substance. A ce dernier point de vue elle s'éloigne de l'albumine et de la fibrine, et se rapproche de la légumine.

Forme cristalline. Propriétés optiques des cristaax. — Les Cris-

taux du sang veineux de Thomme, sont des prismes à quatre pans (voy. fig. 20, p. 466). Ils se présentent souvent sous forme de rectangles ou de rhombes allongés (fig. 20 a et fc). Le sang de chat (fig. 20. c) donne aussi des tables rhoinbordales minces, et des prismes à quatre pans avec des faces terminales très-obliques. Les cristaux du sang de cochon d'Inde (fig. 20. (/), sont des tétraèdres non réguliers dérivant d'un prisme rhombiquc. Ceux du sang de souris et de rat ont aussi la forme tétraédrique. Les cristaux si remarquables du sang d'écureuil (fig. 20. f) appartiennent au système hexagonal : ce sont des prismes aplatis à six pans. Le sang de lapin donne des cristaux très-analogues à ceux du sang humain. Le sang de chien fournit des cristaux en aiguilles à quatre pans, analogues à c. Le castor donne des parallélipipèdes obliques, exempts de facettes

' L'iiémoglobiiic parait conlonir de l'eau de crlslallisalion; desséchée brusquement a 0*f elle 8C transforme cii une poudre rouge brique, qui redissoute, reproduit les cristaux primitifs, ('.elte poudro, séchée à 1 10-121)", perd chez le chien 5,4 p. 100, chez l'oie 7,2 p. 100 d'eau, en même temps qu'un peu d'oxygène.

â GAcrirn. cRime app. a l\ v^d. 50

molli lîcatriccs. Les cristaux de sang de cheval sont des lamelles rhonibiquGs ou des {irimes épais à quatre pans. Enfin du sang de poisson on retire de l'hémoglobine cristallisée en prismes analogues à ceux du sang humain'.

Tous les cristaux d'hémoglobine sont biréfringents et dichroïques. Si l'on fait tomber sur une lame hexagonale d'hémoglobine dV>curcuil, un faisceau de lumière polarisée et qu'on r«nai]-sc avec un prisme de Nicol, telle lame restera rouge fonndans tous tes azimuts; ^lai^ si l'on fait traverser à Ij lumière polarisée, les faces

parallèles qui fomicnl les

M^ ^t^^%^k^p P""^ latéraux des priimies

^^M ^^s. ^r d'hémoglobine, on recuii-

^^^^^ naît, en faisant tourner l'a-

^k ^^H ^^ nalyscur, des maximums ri

W ^^f ^\À/ A ^r ^''^ minimums de lumière

* ' qui indiquent la double n-

fringence ; en même tem[»

les cristaux paraissent tantôt rouge écartate, tanlol rimgc bleuiUre.

Les propriétés optique' de la sohilion scntnl dou- Jiccs au g suivant.

Propriété. eUBl««r*4r rbémag:lolit>e. — L'llémi>gluliine dcss«''«'lit'e an-^h-s- I!. . - mm 0 p.iiB rii-[i i,.,- j.^j|^ j^ ^y,^ forme une |kiu-

dre rouge brique qui j^'altèrc lentement, et peut même être portée à 100* sans jH'nlrv >a pro|iriélé de rcirislalliser. Mais si l'on a desséché celte subslancc a 15' on 20°, elle se modifie, ses cristaux dcviciment verdàlrvs et ne donnent jibis avec l'eau qu'une solution brun foncé. Ine jurtie tiintefois parait se ronscrver intacte. An point de vue do sa suliihilité, l'hénioj^loliine a des propriéti>