RECHERCHE ET ANALYSE DE LA BILE

Recherehe qualitative de la bile daos les liquides anlniawK.

(a). Réaction de Pettenkoffer. — Si l'on veut simplement démontrer l'existence de la bile, ou plutôt des acides biliaires, dans un liquide tel que l'urine ou le sang, il sera bon de recourir au procédé de Pettenkoffer qui est d'une très-grande sensibilité.

Pour cela l'on évapore la liqueur où l'on soupçonne l'existence de la bile, on reprend le résidu par de l'alcool et on dessèche

ANALYSE DE LA BILE. lil

cette solution. On délaye alors l'extrait alcoolique sec dans quelques gouttes d'eau, et on le verse dans une solution de 1 partie de sucre ordinaire dans 3 parties d'eau; enfin on ajoute à ce mélange, goutte à goutte et en refroidissant, de l'acide sulfurique concentré jusqu'à ce que la dissolution qui se trouble redevienne limpide. Le liquide «passe alors au jaune orangé, au carmin et au pourpre ; il finit ensuite par se décolorer. L'eau en trop grande quantité et une chaleur supérieure à 60° empêchent cette réaction ^

{b) Réaction par Vacide nitrique nitreux. — Quand on soupçonne dans un liquide l'existence des pigments biliaires, il suffit d'ajouter à la liqueur, ou mieux à son extrait repris par du chloroforme chaud, et évaporé, une certaine quantité d'acide nitrique chargé de vapeurs nitreuses. Le liquide prend alors successivement les teintes verte, bleue, violette, rouge etjaune qui caractérisent la bilirubine et ses divers dérivés d'oxydation. On peut aussi agiter directement le liquide avec du chloroforme, séparer ce dernier par décantation, l'évaporer, et rechercher sur le résidu les caractères de la bilirubine. Par Tun ou l'autre de ces procédés, il est facile de déceler des traces de pigments biliaires dans l'urine ou le sérum du sang.

AnÊdjme ttamntHmiiwe ée la bile. — Il existe pour analyser la bile un certain nombre de méthodes parmi lesquelles nous recommandons surtout la suivante.

On évapore à siccité un poids de 10 à 15 grammes de la bile à analyser. On pèse le résidu complètement séché dans le vide à i 00**. La perte est égale au poids de l'eau*. Si Ton calcine une partie de ce résidu on aura le poids total des cendres.

D'un autre côté, on additionne 20 à 30 grammes de bile de son volume d'alcool à 85° centésimaux. Celui-ci. sépare nettement le mucus, les épithéliums, l'albumine s'il y en existe, et quelques sels minéraux. Ce précipité, recueilli sur un filtre, est traité par de l'acide acétique cristallisable, qui dissout l'albjumine et laisse la mucine. On évapore, et on obtient Talbumine pour résidu ; ou bien on la précipite sous forme de syntonine en neutralisant la liqueur. Le poids de ses sels minéraux est dosé par calcination. La liqueur alcoolique, séparée par filtration des substances pré«

* Voir ce qui a ét6 dit de la recherche de ces acides dans les urines.

* Ce résidu est extrêmement hygroscopiquc. Le mieux est de le broyer arec un poids connu de sable sec et de le priver d'eau dans un courant de gaz bien desséché.

cédentes, est évaporée à siccité dans le vide à 100*. Le résidu est pesé. La différence . avec le poids de la même bile desséchée donne le poids du mucus, des épithéliums et des matières albuminoïdes à l'état sec. La proportion dVau ayant été déterminé par l'expérience directe, on a, par différence, la somme des poids du groupe des substances insoluble dans l'alcool.. Le résidu repris de nouveau par ce dernier dissolvant laisse une petite quantité de substances insolubles (a), formées surtout de sels que L'on dose par calcination.

La solution alcoolique, réduite à un petit volume, est additionnée d'éther, agitée et abandonnée jusqu'à ce que la liqueur sott tout à fait claire. Les acides biliaires se séparent quelquefois ainsi à l'état cristallin. On les lave avec soin à l'éther, puis au chloroforme, pour enlever une trace de matières colorantes; enBn on les sèche et on en note le poids (6).

Toutes les liqueurs éthérées ayant été réunies sont évaporées; elles laissent comme résidu les graisses, la cholestérine, la lécithine, la choline et l'urée. L'eau dissout cette dernière substance. La cholestérine, la Iccithine et les graisses restées indissoutes se séparent en ajoutant un peu de lessive de soude pour saponiGer les corps gras, évaporant et ajoutant de l'éther qui ne dissout plus que la cholestérine; ou bien encore on peut précipiter les savons à acides gras par de l'acétate de plomb, enlever à la liqueur l'excès de plomb par l'hydrogène sulfuré, évaporer et reprendre par l'éther qui s'empare de la cholestérine.

Pour déterminer le rapport des acides biliaires, dans le cas de la bile humaine, ou de celle de bœuf qui ne contient que les acides taurocholiques et glycocholique, on peut, suivant la méthode indiquée au paragraphe précédent, séparer les acides biliaires dans le précipité (b) qui a servi à les doser. Mais on peut aussi sur une partie de ce précipité doser les alcalis par calcination, et sur un autre, déterminer le soufre. Dans l'hypothèse où la bile ne contiendrait pas de sulfates, le dosage du soufre donnerait indirectement le poids de Tacide taurocholique, sachant qu'un gramme de soufre équivaut à 16,095 de cet acide ^ Le poids d'acide glycocholique pourra donc s'obtenir par différence. Mais il vaut mieux chauffer 24 heures au bain-marie le mélange des deux acides biliaires avec

* C'est l'hypothèse qui est faite par Hoppe-Seyler ; mais on a vu plas haut que d'aprèn Jacobsen, la bile contiendrait souvent des suirates.