ANALYSES SPÉCIALES. SOI

mieux d’abandonner le sang à lui-même et de laver et d’exprimer le caillot dans un nouet de linge. Le poids de la fibrine fournie par cette dernière méthode est toujours un peu plus élevé que celui de la première. Les indications à remplir sont d’éviter l’évaporation du sang, dont on ne peut prendre le poids qu’après le refroidissement, et de ne peser la fibrine qu’après lavage et dessiccation complètes.

M. Hoppe prescrit de recueillir 40 — 50 de sang dans un petit vase à précipiter fermé par une plaque en caoutchouc, qui laisse passer un agitateur en fanon de baleine ; le vase est pesé d’avance et repesé après le refroidissement et la précipitation de la fibrine déterminée par le mouvement de la spatule. La fibrine est lavée plusieurs fois par décantation avec de l’eau, filtrée sur un filtre taré, lavée à l’alcool bouillant et séchée à 120°; on laisse refroidir, avant de peser, au-dessus de l'acide sulfurique concentré.

2° Dosage des globules du scmg. — La seule méthode directe pour la détermination des cellules repose sur le fait observé par Berzelius, qu’en ajoutant au sang défibriné par battage deux fois ou plus de son volume d’une solution de sulfate de soude ou de sucre, on peut filtrer les globules et les séparer du sérum par des lavages avec du sulfate de soude. Le filtre est traité par Veau bouillante pour coaguler les matières protéiques des cellules, et le coagulum lavé, séché et pesé donne le poids des globules secs. On peut frire à ce procédé proposé par M. Figuier plusieurs reproches importants. l°Dans beaucoup de cas

CBIWE rarSfOLOGIQtJE.

la fiUration ne peut eiléctuée sans qu'il ne passe de cellules à travers les pores du ]>apier; 2* on arrive trèsdjfBcilement à enlever tout le sérum; 3° l’addition du sulfate de soude au sang défibriné détermine des échanges endosmotiques entre le contenu des globules et les matériaux du sérum. Tous les autres procédés donnent soit les globules secs, soit les globules humides, c’est-à-dire dans leur état physiologique, par des voies indirectes.

Méthode de MM. Prévost et Dtimas.

Une partie du sang sert à la détermination de la fibrine, comme il a été dit plus haut. Une autre, abandonnée au repos dans un vase cylindrique et couvert, se sépare en caillot et en sérum qu’on pèse séparément, pour avoir le rapport de ces deux parties ; puis on dessèche et on pèse une portion déterminée de chacnne d’elles ; en admettant que toute l’eau perdue par le caillot dérive du sérum emprisonné on peut calculer le poids des globules secs. Soient en effet :

a le poids de fibrine de IOOp de sang.

DI le poids du caillot humide.

100 — m celui du sérum séparé.

P le résidu sec du poids m de caillot humide.

q — — 100 — m de sérum.

On aura m — p pour l’eau perdue par le caillot ; elle correspond à x = t***” ~ "!). ~ P} (jg sérum; d’où nous

tirons pour le poids des globules secs

Comme il est difficile de dessécher le caillot sanguin, MM. Bequerel et Hodier ont modifié cette méthode.

AKALTSES SPÉCIALES. 503

ils dessèchent le sang défibriné, un une partie, après avoir établi le poids de la fibrine et celui du sang défibriné pour une quantité déterminée de sang (100 parties, par exemple); d’un autre côté, ils déterminent la richesse en eau du sérum pur obtenu par coagulation spontanée. Soient :

a le polila de la flhrine xVhe de 100 parties de sang.

100 — a celui du scrum arec les gkdiules.

•Il le poids du résidu sec du poids. 100 — o de sang défibriné.

f> la quantité d'eau de 100 parties de sérum pur.

Ou a pour le sérum de 100 parties de sang :

lflO(inO — m — o)

et pour les globules secs :

Le principe est, comme on le voit, celui du procédé de IILM. Dumas et Prévost, mais le perfectionnement pratique a beaucoup de valeur.

Une modification proposée par Popp consiste à laisser le sang défibriné en repos, les globules gagnent le fond, et on détermine d’une part, l’eau °/„ du liquide clair surnageant, et de l’autre celle du dépôt. Ce procédé ne tUOèrq du précédent que parce qu’il n’exige pas la coagulation lente d’une deuxième portion.

Le procédé de Bequerel donne des résultats assez concordants, quand on l’applique plusieurs fois de suite au même liquide.

Scherer détermine, comme nous l’avons déjà dit, le poids de la fibrine par lavage et expression du caillot. 11

CHIMIE PBTSIOLOGIQIIE.

dessèche d’un autre côté du sang défibriné, et pèse le résidu ; la somme des deux pesées calculées °j, donne les matériaux solides et secs. Une partie du sang défibriné versée dans l’eau bouillante additionnée d’un peu d’acide acétique, donne les matières coagulables, moins la fibrine contenue dans le sang ; la même opération répétée avec le sérum donne l’albumine ; avec ces résultats, on peut calculer les matières solides des globules. '

La méthode de Scherer donne moins de cellules que les précédentes.

Par des considérations qu’il serait trop long de développer ici, G. Schmidt a trouvé qu’en multipliant par 4 le poids des globules secs donné par le procédé de M.M. Prévost et Dumas, on peut calculer celui des globules humides dans leur état physiologique. Il se fonde surtout sur cette observation, que le contenu solide du sérum est à celui du caillot bien contracté dans un rapport assez constant. Le facteur 4 est probablement trop élevé et devra être abaissé à 3 1 /2.

Sacharjin a cherché à prouver que toute la soude du sang appartient au plasma. Ses expériences, si elles n’établissent pas encore ce fait d’une manière certaine pour toutes les espèces de sang, le rendent au moins très-probable. En partant de là et en dosant la soude du sang et celle du sérum, on peut calculer immédiatement le poids des globules frais. Soient :

m le poldi de loude de 100 parilet de tang.

n — — de 100 — de adram.

fi — de fibrioe de lOO — deeeng.

ÀNALYSES SPÈCUtZS.

On a :

pour le sérum de 100 parties de sang et 100 — (x + p) pour les globules humides.

Zimmerman emploie le dosage du chlore dans le sang et le sérum pour arriver au même résultat, en supposant que les cellules ne contiennent pas de chlorure.

Le procédé de Hoppe repose sur une condition qui ne peut pas toujours être remplie ; aussi, bien qu’exact, ne doit-il pas être considéré comme général. Pour sa réussite, il faut que la séparation de la fibrine n’ait lieu que lorsque le dépôt des cellules s’est en partie effectué, afin qu’on puisse enlever avec une pipette une quantité suffisante de plasma clair.

On dose la fibrine avec les précautions indiquées plus haut dans le sang et dans le plasma ; le reste est une affaire de calcul.

a la fibrine de. 100 parties de san^.

b — de 100 — de plasma.

X le poids da plasma de lOO — de sang

(sérom fibrine)

On a:

le poids des cellules humides = 100 — x.

Les déterminations de Sacharjin et de Hoppe donnent moins de cellules humides que celles de G. Schmidt, 330 environ au lieu de 432 pour 1 000 parties de sang.

Yicrordt et Welker comparent la contenance des diverses espèces de sang en globules, en comptant les cel-

SÜ6 CHtMIR PUTStOLOGlQUK.

Iules sur le porte-objet du microscope. Ce procédé ne donne pas le poids des globules, mais seulement leur nombre. Pour diminuer la longueur de cette opération, on peut, comme le prescrit Welker, étendre 1« de sang, ou même moins, avec une solution convenable de sucre, de manière à former un volume déterminé dont on mesurei-a une dose très-faible avec un tube capillaire calibré, pour la verser sur le porte-objet.

Nasse se sert despoidsspécifiquesdu sang défibriné et du sérum pour calculer avec une formule le poidsdes globules.

Enfin, on peut employer pour la comparaison du sang au point de vue de ses éléments morphologiques colorés, une méthode depuis longtemps proposée parles fabricants d’indienne pour la détermination de la richesse des matières colorantes. On dose ainsi réellement l’hénratine, mais il est probable que dans la plupart des cas le poids des globules est proportionnel à celui du principe coloré.

Welker étend le sang de 1000 fois son poids d’eau, et compare la nuance à celle' d'une échelle chromatique, dont chaque terme correspond à une richesse déterminée d’avance en hématine ou en cellules.

Hoppe se sert d’une solution titrée de matière colorante (hématine) préparée de la manière suivante :

1 litre de sang défibriné est versé dans un flacon et agité avec une quantité d’éther telle, qu’il n’y ait pas séparation des deux liquides. On filtre sur un entonnoir couvert. Le liquide filtré est précipité par le carbonate de potasse. Le dépôt filtré est exprimé, desséché et épuisé par l’alcool. On dose le fer de la matière organique contenue

ANALVSeS SrÊCIALES.

dans 10" de la solution alcoolique, l’oxyde de fer Fe^O’ multiplié par 10,1 donne le poids del’hématine. Le liquide ^coolique est étendu d'une quantité d’eau telle que 100" de la nouvelle solution contiennent 0,01 d’hématine. On prend 10“ de sang défibriné, on y ajoute 1“ d’une lessive de soude de 1 ,2 densité et on étend avec 89“ d’eau. Il ne reste plus qu’à comparer la nuance des deux liqueurs dans un appareil convenable (colorimétre), et à ajouter assez d’eau à l’essai pour le rendre égal à la liqueur normale. Le volume de l’eau ajoutée permettra de calculer le poids d’hématine du sang.

L’intérêt qui s’attache à la question des globules nous a engagé à donner en résumé tous les procédés successivemeqt proposés pour leur dosage, par les savants qui se sont occupés de ccttc question.

Le dosage des cellules par la richesse en hématine au moyen d’une liqueur titrée est de toutes la plus rapide, elle est susceptible d’étre encore simplifiée, et pourra prendre place un jour parmi les procédés d'analyse clinique dont la simplicité et la rapidité sont des conditions essentielles.

Analyse du lait. — La nature et la quantité des substances minérales en tout et eu particulier se déterminent d’après la méthode générale. On peut aussi, après avoir coagulé en présence d’un fragment de caillette de veau lavée, extraire les sels solubles par lavage à l’eau chaude, évaporer à sec et brûler la matière organique restée en dissolution. L’iiicinéraitioa du coagulum donnera les sels insolubles.

Le poids des matériaux solides s’obtient facilement en

SOS CBIVII PHTSIOUKMQDB.

évaporant 20" de lait avec une quantité connue de plâtre calciné (3 grammes), en desséchant au bain-marie, puis à l’étuve à 110° ; le poids trouvé moins 3 grammes retranché du poids du lait donne la quantité d'eau. Le résidu épuisé par l’éther lui cède sa matière grasse, de sorte que l’on pourra déterminer le poids de cette dernière par la perte sous l’influence de l’éther, ou directement par l’évaporation de la solution éthérée. M. Marchand agite 10“ de lait additionné d’une goutte de soude caustique, avec 10" d’éther dans un tube gradué, divisé en dixièmes de centimètres cubes ; il ajoute encore 1 0“ d’alcool à 90 */., agite de nouveau et laisse reposer le tube maintenu vertical dans un bain-marie à 40°, jusqu’à ce que le volume de l’huile qui se réunit à la partie sup&ieure n’angn\,ente plus. Ce volume en centimètres cubes multiplié par 23,3 et augmenté de 12,6 donne le poids du beurre contenu dans 1 litre de lait (approximativement).

Le sucre de lait se dose avec la liqueur de Fehling, en opérant avec le petit lait ou même avec le lait sans préparation aucune ; ^(. Boussingault a en elTet observé que les autres principes du lait ne gênent pas l’expérience.

Comme toute substance active, la lactose peut être dosée avec l’appareil de Soleil ; il suifit de multiplier par 0,961 la quantité de glucose correspondante à la déviation observée pour avoir le poids de la lactose. A cet effet, on ajoute à 2 volumes de lait 1 volume d’une solution d’acétate de plomb marquant 1 1 * à l’aréomètre de Baumé ; on fait bouillir un instant, on filtre et on laisse refroidir. Si le lait est acide, on neutralise avec un peu de carbonate de soude avant