Ш. — TRAITEMENT DE L’EXTRAIT AQUEUX PAR L’ALCOOL CONCENTRE ЕТ CHAUD

L’extrait aqueux précédent est traité par de Га1соо1 a 95°, porté а 40° C à quatre reprises différentes. (Des essais préalables nous ont donné un rendement en extrait bien supérieur par l'emploi de l'alcool chaud.) On pratique :

Une premiere macération de 30 heures, puis 3 macérations successives de 6 heures chacune. De cette facon, la durée totale de contact avec l'alcool concentré ne dépasse pas 48 heures. (Un contact trop prolongé pourrait insolubiliser cer-

taines albuminoides.) П faut avoir soin de brasser trés souvent la masse afin d'augmenter le pouvoir dissolvant de l'alcool. Leliquide du dernier macéré est incolore et ne laisse plus de résidu par évaporation sur un verre de montre.

Les quatre liqueurs alcooliques sont réunies et seront, plus tard, distillées dans le vide. L'aleool à 95°, à la température de 40°, enléve ainsi environ 18 p. 100 de l'extrait aqueux.

L'extrait aqueux restant, privé des substances solubles dans l'alcool concentré, a été l'objet des essais suivants :

Recherches sur l'extrait aqueux non dissous par l'alcool concentré et chaud. — L'extrait est repris par de l'eau distillée froide : presque tout se dissout (le contact de l'alcool а insolubilisé une très faible portion d'extrait aqueux). Оп obtient un liquide brun-rouge, à réaction neutre, moussant par l'agitation. Ce liquide est filtré à travers un filtre blanc préalablement gonflé par des lavages à l'eau distillée.

А. — Sur une portion de ce filtrat très limpide, nous avons refait un certain nombre de réactions de coloration et de précipitation des substances albuminoides. Elles ont été toutes positives.

La liqueur a donné, à froid, des coagulums avec la solution picrique, le Réactif de TANRET, l'acide trichloroacétique. Mais ces trois précipités se dissolvent presque entièrement à l’ébullition, pour se reformer. par le refroidissement, après filtration à chaud. C'est là un caractere spécial des peptones et des albumoses.

B. — Recherche des nucléoprotéides et de la mucine. — A l’autre portion de la liqueur, de beaucoup la plus considérable, nous ajoutons une petite quantité d'eau distillée légèrement acétique. П se fait un précipité peu abondant, dû aux nucléoprotéides ou à la mucine. On continue de verser, peu à peu, avec beaucoup de précaution, de l'eau acétique, jusqu'au maximum de précipitation. On s'assure en opérant,à part, dans un tube à essai, quele précipité formé est insoluble dans un excés d'acide acétique. Au bout de 24 heures de repos à la glaciere, la liqueur est filtrée à travers un tout petit filtre à analyses, sans plis. Le précipité du filtre est soigneusement lavé, à plusieurs reprises, avec de l'eau acétique, puis desséché dans le vide sulfurique, à l'aide de la trompe. Le précipité sec est partagé en deux parties, sensiblement égales.

UND IAE

Dans la première part, nous avons recherché le Phosphore de la façon suivante : la substance est calcinée dans un creuset de porcelaine ауес un peu d'azotate et de carbonate de soude purs. Le résidu blanc est repris à froid par un peu d'eau acidulée par l'acide azotique ; on chaufle doucement et on ajoute quelques gouttes d'une solution de molybdate d'ammoniague pur; il ne se produit pas de coloration jaune due au phosphomolybdate. Donc, pas de Р; par suite, pas de nucléoprotéides.

Dans ladeuxiéme part, nous avons recherché la mucine: la substance est hydrolysée avec de l'acide chlorhydrique dilué. La liqueur réduit, apres neutralisation parla soude, la solution de Fehling. Ce pouvoir réducteur, joint à l'insolubilité du précipité dans un excès d'acide acétique, nous fait admettre l'eristence d'une mucine dans la liqueur (les mucines donnent beaucoup de. sucre réducteur, jusqu'à 35 p. 100 de glucosamine).

Recherches des albumoses et des peptones. — La liqueur extractive précédente, débarrassée de la mucine, est additionnée dans un grand vase de Bohême d'un excès de cristaux de sulfate dammoniaque pur. On agite fréquemment. Au bout de 24 heures, il s'est formé du sein de la liqueur d'abondants flocons blancs qui se déposent lentement. On attend encore 24 heures pour bien permettre aux légers flocons de se rassembler. Le sulfate d'ammoniaque, à saturation et en exces, précipite toutes les albuminoides, sauf les peptones ; оп. filtre la liqueur et le précipité rassemblé sur le filtre est lavé, à plusieurs reprises, avec une solution saturée de sulfate d'ammoniaque. Le filtrat ne donne plus les réactions des albuminoides (ne coagule pas par la chaleur, ne précipite pas par l'acide azotique le tanin acétique).

П ne donne plus les réactions des peptones et des albumoses constatés avant le traitement parle sulfate dammoniaque (précipités à froid par la solution picrique, le réactif de TANRET, l'acide trichloroacétique, solubles à chaud, se reformant par le refroidissement). Or, les peptones seules peuvent étre restées en solution et se retrouver dans le filtrat; donc, pas de peptones, et le précipité du filtre renferme des albumoses (KUHNE а montré que les diverses albumoses sont précipitées par le sulfate dammoniaque).

Recherche du pouvoir hemolytigue de l'extrait aqueux apres l'épuisement par l'alcool :

Tube N° 1 : témoin : XX gouttes de sang de Cheval lavé et dilué : + V gouttes d'eau physiologique.

Tube №2: XX gouttes de sang de Cheval lavé et dilué : + V gouttes d'extrait.

Pas а hemolyse.

Conclusion. — L'alcool cencentré a donc enlevé à l'extrait aqueux toutes les substances hemolysantes.

WEINBERG а montré que l'extrait agueux a un pouvoir anticoagulant sur le sang de Cheval. Or, il est possible qu'ici, ce pouvoir appartienne en partie aux albwmoses qui jouissent, comme l'on sait, d'un peuvoir anticoagulant.