IV. — RECHERCHES SUR L'EXTRAIT ALCOOLIQUE

Dans une première série d'essais, les quatre liqueurs alcooliques provenant de l'épuisement de l'extrait aqueux par l'alcool à 95°, chaud, ont été concentrées dans le vide,à une température maxima de 40° С. Cet extrait se présente sous la forme d'une pâte molle, jaune foncé, ayant l'aspect du cérumen et une odeur rappelant un peu celle de la dextrine. П est assez soluble dans le toluène, insoluble dans l'acétone. Les solutions aqueuse et alcoolique précipitent abondamment par l'acétone, par le chlorure de platine. Ces propriétés physiques rapprochent cet extrait alcoolique de certains lipoides déjà décrits par nombre d'auteurs. STRECKER (1) a montré que l'on pouvait précipiter les phosphatides ou lipoides de leurs solutions au moyen du chlorure de platine. Mais, d'après ERLANDSEN, HopPE-SEYLER, le chlorure de platine n'enlève de la solution que les 2/3 environ du lipoide.

Recherche du pouvoir hémolytique. — L'hémolyse des globules de sang de Cheval est trés rapide, compléte au bout d'une demi-heure. L'alcool a étéemployé parun certain nombre d'expérimentateurs

. pour l'extraction des lipoides hémolytiques. KonscHUN et MORGENвотн (1) ont extrait, à l'aide de l'alcool, des lipoides hémolytiques

(1) STRECKER, Annalen der Chemie und Pharm. CXLVIII, p. 117.

du pancréas, des glandes surrénales, de la rate et de l'intestin. Levapiri (2) à l'aide du méme véhicule, a retiré une hémolysine du sérum sanguin.

Hecherche des acides biliaires dans l'ertrait alcoolique. — Nous avons mis à profit la Réaction de Pettenkofer. Une petite quantité d'extrait est délayée dans un verre de montre ауес une goutte d'eau distillée jusqu'à émulsion complete. On ajoute un peu de poudre de sucre de.canne, puis de l'acidesulfurique pur, goutte à goutte.

Nous n'avons pas obtenu la coloration rouge caractéristique due à l'action du furfurol sur l'acide cholalique, noyau commun des acides taurocholique et glycocholique.

L'essai a été renouvelé plusieurs fois, toujours négativement.

Donc, pas d acides biliaires.

On sait que le glycocholate et le taurocholate de soude pro. duisent l'hémolyse des globules rouges. Ces sels biliaires sont solubles dans l'eau et dans l'alcool, mais insolubles dans l'éther (Bile cristallisée de PLATTNER). Dans la série des manipulations précédentes, les sels biliaires n'auraient pas été entrainés par l'éther, mais seraient passés successivement en solution aqueuse, puis en solution alcoolique.

Le pouvoir hémolytique de l'extrait alcoolique ne peut donc pas etre attribué aux sels biliaires.

Dans une préparation de l'extrait alcoolique, nous avons eu l'occasion d'observer certains faits intéressants.

En surveillant soigneusement la concentration dans le vide, nous avons remarqué à un moment donné, lorsque la masse était en consistance sirupeuse, le dépótde grumeaux blanes, volumineux, assez abondants, tranchant fortement sur la couleur jaune foncé de la liqueur-mére. Ces grumeaux sont séparés par filtration de l'extrait alcoolique concentré. On les lave a plusieurs reprises avec une petite quantité d alcool à 95° froid et le filtre est desséché dans

le vide sulfurique. Le précipité blanc, bien sec, est détaché du filtre.

(1) Ковзсном et Мовекмвотн, Ueber die hemolytischen Eigenschaften von Organ-Extrakten, Berlin, Klin, Woch., p. 870, 1902.

(2) Гкуломм С. В. Soc. Biologie, LXVIII.

Sur une certaine quantité de cette substance, on observe les propriétés suivantes :

Soluble dans l'eau ; légèrement soluble dans le chloroforme.

La solution aqueuse donne les réactions colorées des albuminoides (Réactions du biuret, de Милом; xanthoprotéique, ADAMKIEWICZ); mais on s'assure facilement que les substances albuminoides sont loin de constituer toute la masse de la substance ; qu'elles sont, au contraire, plaquées sur elle et constituent des impuretés. La substance, trés rapidement lavée à l'eau distillée, ne donne plus les réactions colorées des albuminoides. Aprés dessiccation, dans le vide sulfurique,la substance est dissoute dans la plus petite quantité d'eau distillée possible. La solution limpide est placée dans une ampoule à décantation et brassée avec 4 volumes de chloroforme. Apres 24 heures de repos, on décante la liqueur inférieure chloroformique dans une capsule de porcelaine. Le chloroforme, évaporé à l'air libre, laisse un trés léger dépót, une substance jaune, butyreuse, d'odeur aromatique. Ce résidu est trop minime pourétre soumis à un examen chimique.

La liqueur aqueuse ainsi purifiée est évaporée, d'abord au bainmarie tiéde, puis dansle vide sulfurique. La substance blanche est lavée avec de l'éther rectifié, puis avec de l'acétone jusqu'à ce que ces solvants ne laissent plus trace de résidu.

Recherche de l'azote. — On place un fragment de la substance blanche dans un tout petit tube à essai, bien sec, avec une petite quantité de potassium. Le mélange est chauflé sur un bec Bunsen, jusqu'à déflagration : on observe la formation d'un sublimé sur les parties élevées du tube, moins chaudes. On ajoute un peu d'eau distillée et on filtre ; le filtrat jaune est chauffé vers 50° C et on y verse une goutte d'une solution étendue de sulfate ferreux et une goutte d'une solution étendue de chlorure ferrique. Finalement, on ajoute quelques gouttes de potasse et d'acide chlorhydrique. Il se produit un précipité vert-bleuátre ай au mélange de bleu de Prusse formé et de la coloration jaune initiale de la liqueur. Il s'est donc formé un cyanure ; par suite, présence d'azote dans la substance.

Recherche des acides aminés (groupe du glycocolle). — 19 Un frag . ment de substance blanche est placé avec un peu de chaux vive

us HE

dans un tout petit tube effilé à l'autre extrémité; on chaufle; on percoit une odeur d'amine. Les vapeurs bleuissent fortement un papier rouge de tournesol mouillé présenté à l'extrémité effilée ;

2° Dans un premier verre de montre. on place un peu de substance blanche, un peu d'eau distillée ; et, à la solution, on ajoute 3 gouttes d'acide chlorydrique étendu d'eau (P. E.), puis quelques gouttes d'une solution de chlorure de platine. Le verre de montre est recouvert d'un entonnoir pour le préserver des poussières du laboratoire. Au bout de 48 heures, on observe au microscope la formation de beaux cristaux octaédriques, à contours d'une netteté parfaite ;

3e Dans un deuxième verre de montre, on dispose quelques gouttes de la solution aqueuse de la substance et quelques gouttes d'une solution faible d'acide picrigue. Au bout de 48 heures, on décéle au microscope des formes dendritiques, rameuses, allongées, ne rappelant pas la cristallisation de l'acide picrique dans ces conditions. Les acides aminés donnent des chloroplatinates et des picrates cristallisés ;

до Action de l'oxyde de cuivre noir, récemment préparé :

On sait que les solutions d'acides amidés ont la propriété de dissoudre l'oxyde decuivre noiren donnant une liqueur bleu foncé.

Une solution aqueuse de sulfate de cuivre pur a été précipitée par une petite quantité de lessive de potasse. Le précipité gelatineux obtenu a été bouilli; au bout d'un certain temps d'ébullition, il s'est formé un précipité noir qui a été jeté sur un filtre. L'oxyde noira été lavé à l'eau distillée jusqu'à ce que l'eau de lavage ne bleuisse plus le papier rouge de tournesol (absence de potasse).

Un peu de ce précipité, misà bouillir avec la solution aqueuse de substance, est entré en dissolution, et la liqueur a pris une teinte bleue. A la longue, en présence d'un excès d'oxyde noir de cuivre, la coloration bleue s'est accentuée et est devenue aussi intense que celle de la liqueur de FEHLinG. Parallèlement, nous avons répété cette réaction avec une solution de glycocolle.

De l'ensemble des recherches précédentes, il résulte que la substance blanche est constituée, en majeure partie, sinon en totalité, par des acides aminés.

Recherche de la tyrosine, — La solution aqueuse de substance ne