RECHERCHE DES GRAISSES, LÉCITHINES, ACIDES GRAS ET SAVONS

Les Selérostomes sont, dés leur arrivée du laboratoire, lavés plusieurs fois à l'eau physiologique, puis desséchés entre des doubles de papier à filtrer blanc. On les triture longuement avec

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du sable fin purifié et stérilisé à l'autoclave, à 120 C. La pulpe obtenue est imprégnée d'une petite quantité d'éther tout récemment redistillé, répartie sur des assiettes que l'on dispose sous des cloches à vide sulfurique.

Au bout de 24 heures, la dessiccation est complète ; la pulpe se pulvérise facilement au mortier. Seules, les cuticules résistent à l'action du pilon et restent intactes. La poudre bien sèche est placée dans un flacon bouché à l'émeri, avec 4 fois son poids d'éther humide ; on agite fréquemment.

Il est nécessaire d'employer un assez grand volume d'éther, de facon à entrainer les lécithines peu solubles dans ce véhicule.

Apres un contact de 24 heures, l'éther est décanté, puis remplacé par de nouvel éther (2 fois plus d'éther que de substance, en poids). On pratique une nouvelle macération de 24 heures. Nous avons remarqué qu'il faut 5 macérations successives de 24 heures chacune pour obtenir l'épuisement complet de la pulpe: la liqueur évaporée sur un verre de montre ne laisse plus de résidu. Les liqueurs éthérées sont réunies, et la pulpe ainsi épuisée est desséchée dans le vide sulfurique. Elle sera reprise plus tard pour préparer un extrait aqueux.

La solution éthérée, trés légérement colorée en jaune, est brassée pendant une heure dans une grande ampoule à décantation, avec un volume égal d'eau distillée. Ce traitement a pour but de retirer de suite les savons alcalins qui possédent, comme l'ont montré Iscovesco (1) et Nocucni (2), une action hémolytique marquée. On recueille séparément les deux couches éthérée et aqueuse.

PORTION AQUEUSE.— Elle est évaporée, au bain-marie, à une douce chaleur. Une partie du résidu d'évaporation est dissoute dans un peu d'eau physiologique pour la recherche du pouvoir hémolytique; l'autre partie est dissoute dans de l'eau distillée pour y rechercher les savons alcalins.

Recherche des savons alcalins. — La solution aqueuse, qui mousse beaucoup par l'agitation, est chauffée, puis traitée par quelques gouttes d'acide sulfurique dilué de moitié. Par le refroidissement, il se formeune pellicule mince, surnageante, graisseuse, probable-

(4) Iscovgsco, C. В. Soc. Biologie, LXIV, р. 675. (2) Мовоснт, Biochemische Zeitschrift, VI, p. 327.

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ment constituée par des acides gras. La masse est reprise par de l'éther, dans uneampoule à décantation ; l'éther séparé est évaporé à l'air libre, le résidu est repris par une solution faible de carbonate sodique; la solution est neutralisée par HCl, puis traitée par le chlorure de baryum; il s'est formé un précipité blanc assez abondant.

Dans une autre série d'essais, la portion aqueuse provenant du traitement par l'eau dela solution extractive éthérée a été directement traitée par une solution de chlorure de baryum ; il s'est également formé un précipité blanc.

Enfin, dans de nouvelles expériences, cette portion aqueuse a été saturée, dans un grand vase de Bohéme, par un grand ехсёз de cristaux de chlorure de sodium. Par le repos, au bout de 48 heures, il s'est séparé à la surface du liquide un gáteau d'une substance ayant tous les caractéres physiques des savons. Ce gáteau, recueilli et dissous dans l'eau, a donné un précipité blanc par le chlorure de baryum.

Tous ces caractères, joints au mode d'extraction, nous font affirmer la présence des savons alcalins dans la portion aqueuse.

Recherche du pouvoir hémolytique. — Il est positif, mais faible.

PORTION ETHEREE. — Elle est évaporée a l'airlibre,àla température du laboratoire. On obtient ainsi une substance légèrement colorée en jaune, d'aspect gras, d'odeur forte. Une petite quantité étalée sur une lamelle de verre et exposée aux vapeurs d'acide osmique noircit fortement et rapidement.

On a fait deux parts de cette substance :

Premi?re part. Recherche des acides gras : on la dissout dans de l'éther nouvellement redistillé, et la solution est agitée dans une ampoule à décantation avec une solution aqueuse faible de carbonate de soude (5 p. 1000) ; s'il y a des acides gras, ceux-ci passeront à l'état de savons sodiques et se dissoudront dans l'eau. Il se forme au sein du mélange une sorte de gelée faible. On agite vigoureusement et fréquemment aprés addition d'eau distillée, afin de rendre plus nette la ligne de séparation entre les deux liqueurs aqueuse et éthérée.

La liqueur inférieure aqueuse est recue dans un grand vase de Bohéme, puis additionnée d'un grand excés de sel marin; оп