B) TECHNIQUE PROPOSÉE

Elle est histo-physique et histo-chimique. Elle combine l’amploi du microscope polarisant et la réaction à la digitonine. Elle permet de distinguer in situ le cholestérol de ses éthers et cela avec une certaine appréciation de quantité.

Le tissu à examiner, fixé au formol salé, est divisé en trois fragments.

a) L’un est coupé aussitôt, monté dans la glycérine gélatinée phéniquée avec ou sans coloration. Examiné au microscope polarisant, il est destiné à l’étude du tissu et à la localisation des éléments biréfringents primitifs.

b) Un autre fragment est immergé quelques heures dans l’alcool puis dans l’éther (5 cc. pour un fragment de 1 em. sur 0,5 cm.), pendant 48 heures. Renouveler deux fois l’éther. Immerger ensuite dans l'alcool à 50° pendant 24 heures, et diviser en deux parties, l’une sera coupée aussitôt, pour montrer la nature lipidique des produits biréfringents de a), et l’autre, immergée dans la solution alcoolique de digitonine pendant dix jours. Les coupes issues de ce fragment ne devront pas contenir d’élément biréfringent. |

c) Le dernier fragment sera immergé 10 jours dans la solution alcoolique de digitonine. On le di-

vise ensuite en deux parties :

a) L’une est traitée par l’éther, qu’on renouvelle deux fois, en laissant en contact chaque fois 48 heures pour distinguer le complexe des éléments primitivement biréfringents.

B) L'autre est coupée à congélation. Les coupes, colorées au bleu de Nil ou au Soudan ou au R. Scarlach, ou non colorées sont montées et examinées. Elles contiennent à la fois les éléments biréfringents primitifs, et les cristaux du complexe.

Il va sans dire que la technique précitée n’est à suivre entièrement que dans l’étude poussée d’un tissu. En pratique, il suffira d’étudier une coupe de tissu

neuf, et des coupes ayant subi l’action de la digitonine.